| 研究課題/領域番号 |
16550084
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
分析化学
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| 研究機関 | 東京薬科大学 |
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研究代表者 |
楠 文代 東京薬科大学, 薬学部, 教授 (70057371)
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| 研究分担者 |
袴田 秀樹 東京薬科大学, 薬学部, 助教授 (70284750)
小谷 明 東京薬科大学, 薬学部, 助手 (40318184)
高橋 浩司 東京薬科大学, 薬学部, 助手 (50366415)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2005年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2004年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
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| キーワード | アミノ酸 / ボルメンタリー / 電気化学検出 / 高速液体クロマトグラフィー / トロロックス / 酸化前置波 / キャピラリーカラム / ボルタンメトリー / メタボローム解析 / アミノ酸分析 / HPLCシステム / 塩基物質 |
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| 研究概要 |
(1)トロロックスを用いるアミノ酸の定量
22種類のアミノ酸について、トロロックスと過塩素酸リチウムを含むジメチルスルポキシド中で電解すると、アミノ酸の濃度に依存した酸化前置波が出現すること確認した。この波高の計測によりアミノ酸の定量が可能であることを明らかにした。
(2)塩基物質の電気化学検出のための2流路系HPLCシステムの構築とその応用
トロロックスの電解酸化を活用してアミノ酸を検出するため、ポストカラム形式の2流路系HPLCシステムを設計した。システム作成の手始めとして、トロロックスと同様なクロマン環を有するトコフェロールを使って、分離カラムとトコフェロール試薬の2流路系から成るHPLCシステムを作製した。電気化学検出用電解セルでは、溶出液がウォールジェット型で作用電極表面にあたるような薄層電解セルを作製した。この電解セルを主要部として組込み、電気化学検出器と電極を接続して検出部を作製した。構築したシステムの作動を確認するために塩基物質のクロルジアゼポキシドを対象として定量分析を行った。
(3)メタボローム解析のための前処理方法の検討
メタボローム解析は、生体内における全代謝産物を同定および定量し、ゲノム機能と対応させることを目的とする。従って、生体試料から目的とする代謝産物を効率的に抽出する前処理方法が望まれる。血液中における薬物や漢方薬の代謝産物の同定及び定量を行うために必要な前処理方法を確立することができた。
(4)キャピラリーLCによる高性能分離定量法の開発
メタボローム解析を行うためには、高感度な分析法の開発が必須であり、その実現にはキャピラリーカラムを用いた電気化学検出CLCが有用であると考えた。高感度・高精度定量法のための改良を重ねた結果、アトモル(10^<18>mol)レベルの定量が可能であることが分った。
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