| 研究課題/領域番号 |
16590007
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
化学系薬学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
村上 啓寿 大阪大学, 薬学研究科, 教授 (00210013)
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| 研究分担者 |
田村 理 大阪大学, 薬学研究科, 助手 (30362619)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2005年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2004年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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| キーワード | 核外移行シグナル / 1'-acetoxychavicol acetate / 核外移行阻害剤 / 医薬リード化合物 / 抗HIV剤 / 抗がん剤 / CRM1 / 分子軌道計算 / 1)-acetoxychavicol acetate |
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| 研究概要 |
既に我々が見出している核外移行シグナル(NES)依存的な核外移行阻害物質である1'-acetoxychavicol acetate(ACA)は、分子内にアセチル基を有していることから、エステラーゼ等の作用を受け加水分解されると考えられる。そこで、生体内での安定性向上を目的に、アセチル基を加水分解され難いと推定されるカルボネート、カルバメートへと変換したアナログを合成し、血清を含む培地中での安定性および核外移行阻害活性について検討した。その結果、フェノール性水酸基に加水分解され難い官能基を導入することで活性が大きく減弱することが判明し、強力な活性発現にはこの部分の加水分解とそれに続くキノン中間体の形成が必須であることを明らかにした。また、ACAはCRM1のCys残基に結合することから、N-アセチル-L-Cys Me esterとのモデル反応を行い、ACAの4位アセトキシル基が加水分解されたCys付加体形成を確認している。そこで、この部分の加水分解とそれに続くキノン形成の活性化エネルギーを分子軌道計算により算出したところ、4位アセトキシル基の加水分解が活性発現の律速段階であることを明らかにした。また、各種合成アナログの本活性化エネルギーを算出したところ、NES含有蛋白核外移行阻害能との間に良好な相関があることを見出した。さらに、各種置換基を導入したアナログの活性化エネルギーを算出し、数種の活性向上アナログの設計・合成を行い蛋白核外移行阻害能を検定した結果、天然物であるACAより50倍強い活性を示す2、3位にフッ素を導入したアナログを見出すことができた。
一方、これまで相同性の高い蛋白が全く報告されていなかったNES含有蛋白の受容体蛋白であるCRM1については、フォールド認識法によってモデル構造を構築した。現在、構築したモデル構造に対するACAのドッキングスタディを検討している。
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