内分泌攪乱物質による精巣機能障害発現時に変動する遺伝子の機能解析

• 研究課題/領域番号: 16590091
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 環境系薬学
• 研究機関: 富山大学 (2005); 富山医科薬科大学 (2004)
• 研究代表者: 田渕 圭章 富山大学, 生命科学先端研究センター, 助教授 (20322109)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2005年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円); 2004年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
• キーワード: 内分泌攪乱物質 / ビスフェノールA / simian virus 40大型T抗原 / セルトリ細胞 / 精巣上体頭部細胞 / 遺伝子発現 / マイクロアレイ / 精巣 / 精巣上体頭部上皮細胞 / 精巣セルトリ細胞 / 温度感受性SV40大型T抗原遺伝子 / DNAマイクロアレイ / HSP70 / DJ-1

研究概要

マウス精巣上体頭部の初代培養細胞に温度感受性simian virus 40大型T(tsSV40LT)抗原遺伝子を導入し,条件付不死化精巣上体頭部細胞株MECP5を樹立することに成功した.許容温度33℃では,大型T抗原が発現し,細胞が増殖した.一方,非許容温度におけるT抗原の発現低下と33℃における細胞密度の上昇は,細胞増殖を停止し,p21^<waf1>のタンパク質発現を誘導した.本細胞は,ME-1,SGP-2やアンドロゲン受容体等精巣上体頭部に発現する遺伝子を発現した.興味深いことに,ME-1とSGP-2の遺伝子発現は,細胞増殖停止の状態において顕著に増加した.
tsSV40LT抗原遺伝子導入トランスジェニックマウス由来の精巣セルトリTTE3細胞は,33℃は増殖するが,39℃では大型T抗原の発現が低下し,細胞分化が誘導される.この分化誘導の機構を詳細に解明するために,我々はcDNAマイクロアレイを用いて遺伝子の経時的な発現変化を解析した.865遺伝子を解析した結果,14遺伝子の発現量が増加することが明らかとなった.リアルタイム定量的PCR測定法により,p21^<waf1>,MFGME-8,HRP12とselenoprotein P遺伝子の発現が顕著に上昇することを確認した.
以上より,精巣上体頭部MECP5とセルトリTTE3細胞は,男性生殖システムにおける遺伝子発現や内分泌攪乱物質を研究する非常に有用なモデルになると考えられる.以前の我々の研究において,セルトリTTE3細胞へのビスフェノールAの暴露によりfra-2,c-mycやODCを含む31遺伝子の発現が誘導されることを示した.現在,樹立した細胞株を用いて内分泌攪乱物質による男性生殖器障害におけるfra-2,c-mycとODCの役割を検討している.

研究成果

• [雑誌論文] Therapeutic potential of follistatin for colonic inflammation in mice (2005)
  • 著者名/発表者名: Dohi T et al.(7^<th> author in 8 authors)
  • 雑誌名: Gastroenterology 128 ページ: 411-423
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Apoptosis induced by the sonomechanical effects of low intensity pulsed ultrasound in a human leukemia cell line (2005)
  • 著者名/発表者名: Feril LB et al.(4th author in 9 authors)
  • 雑誌名: Cancer Lett. 221 ページ: 145-152
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Analysis of gene expression in apoptosis of human lymphoma U937 cells induced by hyperthermia and the effects of α-phenyl N-tert-butylnitrone (PBN) and its derivatives (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirano H et al.(2^<nd> author in 8 authors)
  • 雑誌名: Apoptosis 10 ページ: 331-340
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Functional characterization of a conditionally immortalized mouse epididymis caput epithelial cell line MEPC5 using temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen (2005)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi Y et al.(1^<st> author in 6 authors)
  • 雑誌名: Biochem Biophys.Res.Commun. 329 ページ: 812-823
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Genes involved in nonpermissive temperature-induced cell differentiation in Sertoli TTE3 cells bearing temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen (2005)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi Y et al.(1^<st> author in 4 authors)
  • 雑誌名: Biochem Biophys.Res.Commun. 329 ページ: 947-956
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Therapeutic potential of follistatin for colonic inflammation in mice (2005)
  • 著者名/発表者名: Dohi, T., Ejima, C., Kato, R., Kawamura, Y.I., Kawashima, R., Mizutani, N., Tabuchi, Y., Kojima, I.
  • 雑誌名: Gastroenterology 128 ページ: 411-423
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Functional characterization of a conditionally immortalized mouse epididymis caput epithelial cell line MEPC5 using temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen (2005)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi, Y., Toyama, Y., Toshimori, K., Komiyama, M., Mori, C., Kondo, T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys.Res.Commun. 329 ページ: 812-823
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Genes involved in nonpermissive temperature-induced cell differentiation in Sertoli TTE3 cells bearing temperature-sensitive simian virus 40 large T-antigen (2005)
  • 著者名/発表者名: Tabuchi, Y., Kondo, T., Suzuki, Y., Obinata, M.
  • 雑誌名: Biochem Biophys.Res.Commun. 329 ページ: 947-956
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Apoptosis induced by the sonomechanical effects of low intensity pulsed ultrasound in a human leukemia cell line (2005)
  • 著者名/発表者名: Feril, L.B., Jr., Kondo, T., Cui, Z.-G., Tabuchi, Y., Zhao, Q.-L., Ando, H., Misaki, T., Yoshikawa, H., Umemura, S.
  • 雑誌名: Cancer Lett. 221 ページ: 145-152
  • NAID: 10020456138
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Analysis of gene expression in apoptosis of human lymphoma U937 cells induced by hyperthermia and the effects of α-phenyl N-tert-butylnitrone (PBN) and its derivatives (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirano, H., Tabuchi, Y., Kondo, T., Zhao, Q.-L., Ogawa, R., Cui, Z.-G., Feril, L.B., Jr., Kanayama, S.
  • 雑誌名: Apoptosis 10 ページ: 331-340
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Apoptosis induced by the sonomechanical effects of low intensity pulsed ultrasound in a human leukemia cell line (2005)
  • 著者名/発表者名: Feril LB et al.(4^<th> author in 9 authors)
  • 雑誌名: Cancer Lett. 221 ページ: 145-152
• [雑誌論文] Analysis of gene expression in apoptosis of human lymphoma U937 cells induced by hyperthermia and the effects of □-phenyl N-tert-butylnitrone (PBN) and its derivatives (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirano H et al.(2^<nd> author in 8 authors)
  • 雑誌名: Apoptosis 10 ページ: 331-340
• [雑誌論文] Analysis of gene expression in apoptosis of human lymphoma U937 cells induced by hyperthermia and the effects of α-phenyl N-tert-butylnitrone(PEN) and its derivatives (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirano H, Tabuchi Y et al.(8 authors)
  • 雑誌名: Apoptosis (in press)
• [雑誌論文] Apoptosis induced by the sonomechanical effects of low intensity pulsed ultrasound in a human leukemia cell line (2005)
  • 著者名/発表者名: Feril LB et al.(4^<th> author in 9 authors)
  • 雑誌名: Cancer Lett. (in press)
• [雑誌論文] Therapeutic potential of follistatin for colonic inflammation in mice (2005)
  • 著者名/発表者名: Dohi T et al.(7^<th> author in 8 authors)
  • 雑誌名: Gastroenterology (in press)