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タイト結合裏打ち蛋白Z0-1の過剰発現と抑制による形態と機能の解析

研究課題

研究課題/領域番号 16590146
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 解剖学一般(含組織学・発生学)
研究機関九州大学

研究代表者

稲井 哲一朗  九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (00264044)

研究分担者 柴田 洋三郎  九州大学, 大学院・医学研究院, 理事(教授) (90037482)
西井 清雅  九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (20264020)
研究期間 (年度) 2004 – 2005
研究課題ステータス 完了 (2005年度)
配分額 *注記
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2005年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2004年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
キーワードtight junction / claudin / ZO-1 / actin / MDCK cell / freeze fracture / epididymis / RT-PCR / MDCK / permeability / Cx43
研究概要

タイト結合構成膜蛋白claudin-1は、そのC末端で裏打ち蛋白ZO-1と結合し、さらにZO-1のC末端側半分のABR(actin binding region)がactin filamentと結合している。前回の研究で、claudin-1とZO-1の結合が阻害されると細胞側面膜全体にタイト結合のストランドが形成されることがわかった。そこで、claudin-1のC末端にZO-1のC末端側半分を結合し、さらにmyc-tagを付与した1CL-ZO1Cmycと、1CL-ZO1CmycからZO-1のABRを欠失させた1CL-ZO1CΔABRmycをMDCK細胞にて発現して、細胞側面膜にタイト結合ストランドが形成されるかどうかを調べた。側面膜のタイト結合ストランドは、1CL-ZO1Cmyc、1CL-ZO1CΔABRmycともに減少したが、依然として一部の細胞の側面膜に認められた。このことから、タイト結合ストランドが側面膜頂端部に局在するためには、アクチンとの結合以外の他の因子が必要であることが示唆された。
タイト結合ストランドを形成するclaudin-1は、ラットの精巣上体管上皮では細胞側面膜全体に局在しており、細胞側面膜にタイト結合のストランドがあるか否かをフリーズフラクチャー法で観察した。その結果、一部の細胞でのみ側面膜にタイト結合ストランドが認められた。このことから、側面膜のclaudin-1分子の大部分は、タイト結合ストランドに重合されずにモノマーあるいはオリゴマーのような形で側面膜に存在し、タイト結合ストランド形成のためのプールとして働いていると推察された。さらに、ラットの精巣上体管上皮におけるclaudin-2と-10の局在や、15種のマウスclaudinのRT-PCRの条件などについて雑誌に報告した。

報告書

(3件)
  • 2005 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2006 2005 2004

すべて 雑誌論文 (14件)

  • [雑誌論文] Spetex-1 : a new component in the middle piece of flagella of rodent spermatozoa.2006

    • 著者名/発表者名
      H.Iida et al.
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 73(3)

      ページ: 342-349

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Spetex-1 : a new component in the middle piece of flagella of rodent spermatozoa.2006

    • 著者名/発表者名
      H.Iida et al.
    • 雑誌名

      Mol.Reprod.Dev. 73(3)

      ページ: 342-349

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 実績報告書 2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Heterogeneity in expression and subcellular localization of tight junction proteins, claudin-10 and -15, examined by RT-PCR and immunofluorescence microscopy.2005

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Arch. Histol. Cytol. 68(5)

      ページ: 349-360

    • NAID

      10017244311

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Segment-specific expression of tight junction proteins, claudin-2 and -10, in the rat epididymal epithelium.2005

    • 著者名/発表者名
      X.Guan et al.
    • 雑誌名

      Arch. Histol. Cytol. 68(3)

      ページ: 213-225

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Heterogeneity in expression and subcellular localization of tight junction proteins, claudin-10 and -15, examined by RT-PCR and immunofluorescence microscopy.2005

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Arch.Histol.Cytol. 68(5)

      ページ: 349-360

    • NAID

      10017244311

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 実績報告書 2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Segment-specific expression of tight junction proteins, claudin-2 and -10, in the rat epididymal epithelium.2005

    • 著者名/発表者名
      X.Guan et al.
    • 雑誌名

      Arch.Histol.Cytol. 68(3)

      ページ: 213-225

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 実績報告書 2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Shear stress-induced upregulation of connexin 43 expression in endothelial cells on upstream surfaces of rat cardiac valves.2004

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Histochem. Cell Biol. 122

      ページ: 477-483

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Inhibition of vascular endothelial growth factor (VEGF) signaling in causes loss of endothelial fenestrations, regression of tumor vessels, and appearance of basement membrane ghosts.2004

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Am. J. Pathol. 165

      ページ: 35-52

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Reciprocal regulation of permeability through a cultured keratinocyte sheet by IFN-gamma and IL-4.2004

    • 著者名/発表者名
      J.Kobayashi et al.
    • 雑誌名

      Cytokine 28

      ページ: 186-189

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Shear stress-induced upregulation of connexin 43 expression in endothelial cells on upstream surfaces of rat cardiac valves.2004

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Histochem.Cell Biol. 122

      ページ: 477-483

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Inhibition of vascular endothelial growth factor (VEGF) signaling in cancer causes loss of endothelial fenestrations, regression of tumor vessels, and appearance of basement membrane ghosts.2004

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Am.J.Pathol. 165

      ページ: 35-52

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要 2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Shear-stress induced up-regulation of connexin 43 expression in endothelial cells on upstream surfaces of rat cardiac valves.2004

    • 著者名/発表者名
      T.Inai et al.
    • 雑誌名

      Histochem.Cell Biol. 122

      ページ: 477-483

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Reciprocal regulation of permeability through a cultured keratinocyte sheetby IFN-g and IL-4.2004

    • 著者名/発表者名
      J.Kobayashi et al.
    • 雑誌名

      Cytokine 28

      ページ: 186-189

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Conduction abnormality in gap junction protein connexin45-deficient embryonic stem cell-derived cardiac myocytes.2004

    • 著者名/発表者名
      K.Egashira et al.
    • 雑誌名

      Anat.Rec. 280A(2)

      ページ: 973-979

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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