ブドウ球菌プロテアーゼ病理作用解析を基盤とした感染症病態機序の研究

• 研究課題/領域番号: 16590319
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 今村 隆寿 熊本大学, 大学院・医学薬学研究部, 助教授 (20176499)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2005年度: 800千円 (直接経費: 800千円); 2004年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
• キーワード: 黄色ブドウ球菌 / システインプロテアーゼ / 血管透過性亢進 / キニン / 敗血症 / ショック / 血圧降下 / ブラディキニンリセプタ / ブラディキニンリセプター / 黄色ブドウ球 / ショツク

研究概要

黄色ブドウ球菌感染症の病態を解明するために、本菌が産生・放出するシステインプロテアーゼstaphopains(ScpA,AspB)に注目し、その病原作用を調べた。培養上清から精製したScpAをヒト血漿とインキュベートすると、内因系凝固反応を測定する活性化部分トロンボプラスチン時間が濃度に比例して短縮した。一方、staphopain Bは延長した。システインプロテアーゼに特異的なインヒビターE-64で処理したstaphopainsにはこのような作用はみられないことから、プロテアーゼ活性が関与していると考えられた。外因系凝固反応を測定するプロトロンビン時間でも、同様の結果が得られた。Staphopain Aは凝固系因子を活性化している可能性が考えられたので、凝固系因子欠損血漿を使って活性化部分トロンボプラスチン時間を調べてみると、IX因子欠損血漿のみからはstaphopain Aによる凝固時間短縮効果が認められなかったことから、staphopain AはIX因子を主として活性化していることがわかった。プロトロンビン時間ではVII因子、X因子、プロトロンビン欠損血漿でも弱いながらも凝固時間短縮効果が認められたことから、X因子、プロトロンビンも活性化しうることがわかった。線溶作用を確かめるために、staphopainsとインキュベートした血漿のトロンビン時間を測定するとstaphopain Bは濃度に比例して凝固時間を延長したが、staphopain Aでは影響がみられなかった。血漿の代わりに血漿濃度のフィブリノーゲンを使っても、同様の結果が得られた。以上の結果から、staphopain Aは主としてIX因子を活性化して凝固反応を誘導し、staphopain Bはフィブリノーゲンを切断して線溶作用を示すことが明らかになった。凝固に関係する血小板凝集作用はstaphopainsには認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Urokinase immobilization suppresses inflammatory responses to polyurethane tubes implanted in rabbit muscles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai, Z.-F., Imamura, T., 他2名
  • 雑誌名: J. Biomed. Mater. Res. 76A ページ: 81-85
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] DX-9065a inhibits proinflammatory events induced by gingipains and factor Xa. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsusita, K., Imamura, T., 他4名
  • 雑誌名: J. Periodont. Res. 41 ページ: 148-156
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Urokinase immobilization suppresses inflammatory responses to polyurethane tubes implanted in rabbit muscles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai, Z.-F., Imamura, T.et al.
  • 雑誌名: J.Biomed.Mater.Res. 76A ページ: 81-85
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] DX-9065a inhibits proinflammatory events induced by gingipains and factor Xa. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Imamura, T.et al.
  • 雑誌名: J.Periodont.Res. 41 ページ: 148-156
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Urokinase immobilization suppresses inflammatory responses to polyurethane tubes implanted in rabbit muscles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Lai, Z.-F., Imamura, T., 他2名
  • 雑誌名: J.Biomed.Mater.Res. 76A ページ: 81-85
• [雑誌論文] Neuropeptide release from dental pulp cells by RgpB via PAR-2-signaling. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tancharoen, S., Sarker, K.P., Imamura, T., 他7名
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 174 ページ: 5794-5804
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of vascular leakage through release of bradykinin and a novel kinin by cystein proteases from Staphylococcus aureus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., 他5名
  • 雑誌名: The Journal of Experimental Medicine 201 ページ: 1669-1676
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis stimulate production of hepatocyte growth factor through protease-activated receptors in human gingival fibroblastsin culture. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uehara, A., Muramoto., K., Imamura, T., 他5名
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 175 ページ: 6076-6084
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Neuropeptide release from dental pulp cells by RgpB via PAR-2-signaling. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tancharoen, S., Imamura, T.et al.
  • 雑誌名: J.Immunol. 174 ページ: 5794-5804
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of vascular Leakage through release of bradykinin and a novel kinin by cysteine proteinases from Staphylococcus aureus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Potempa, J.et al.
  • 雑誌名: J.Exp.Med. 201 ページ: 1669-1676
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis stimulate production of hepatocyte growth factor (Scatter factor) through protease-activated receptors in human gingival fibroblasts in culture. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uehara, A., Imamura, T.et al.
  • 雑誌名: J.Immunol. 175 ページ: 6076-6084
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis stimulate production of hepatocyte growth factor through protease-activated receptors in human gingival fibroblasts in culture. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uehara, A., Muramoto., K., Imamura, T., 他5名
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 175 ページ: 6076-6084
• [雑誌論文] Neuropeptide release from dental pulp cells by RgpB via PAR-2-signaling. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tancharoen, S., Sarker, K.P., Imamura, T., 他7名
  • 雑誌名: The Journal of Immunol.ogy (in press)
• [雑誌論文] Induction of vascular leakage through release of bradykinin and a novel kinin by cystein proteases from Staphylococcus aureus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., 他5名
  • 雑誌名: The Journal of Experimental Medicine (in press)
• [雑誌論文] Assessment of thrombin in urine of glomerulonephritis patients by ELISA. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, Y., Tomita, K., Imamura, T.
  • 雑誌名: Annals of Clinical Biochemistry 41 ページ: 133-137
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Tissue factor in neutrophils : yes. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, S., Imamura, T., Okamoto, K.
  • 雑誌名: Journal of Thrombosis and Haemostasis 2 ページ: 214-217
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Protective effect of vascular endothelial growth factor/vascular permeabilityfactor 165 and 121 on glomerular endothelial cell injury in the rat. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto, K., Imamura, T., Tomita, K.他4名
  • 雑誌名: Laboratory Investigation 84 ページ: 1126-1136
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Activation of the kallikrein-kinin system and release of new kinins through alternative cleavage of kininogens by microbial and human cell proteinases (2004)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., 他2名
  • 雑誌名: Biological Chemistry 385 ページ: 989-996
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 血液凝固系と炎症・免疫系のクロストーク. (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 雑誌名: 日本集中治療医学会雑誌 11 ページ: 9-17
  • NAID: 50000382425
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 炎症の場での組織因子発現・炎症と血液凝固反応のクロストーク. (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 雑誌名: 臨床病理 52 ページ: 342-349
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 尿中トロンビン測定によるその病態生理学的意義の解明. (2004)
  • 著者名/発表者名: 北本康則, 今村隆寿, 他3名
  • 雑誌名: 病床病理 52 ページ: 350-354
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 組織因子(CD142)と炎症. 特集 DIC 診断・治療に対する戦略的プロジェクト (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 中村伸
  • 雑誌名: 病床病理レビュー 130 ページ: 80-86
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 組織因子. 臨時増刊号 虚血性心疾患と病床検査 (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 中村伸
  • 雑誌名: Medical Technology 32 ページ: 1503-1505
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Assessment of thrombin in urin of glomerulonephritis patients by ELISA. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, Y, Tomita, K., Imamura, T.
  • 雑誌名: Ann.Clin.Biochem. 41 ページ: 133-137
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tissue factor in neutrophils (polymorphonuclear leukocytes). Yes. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, S., Imamura, T., Okamoto, K.
  • 雑誌名: J.Thromb.Haemost. 2 ページ: 214-217
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Protective effect of vascular endothelial growth factor/vascular permeability factor 165 and 121 on glomerular endothelial cell injury in the rat. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto, K., Kitamoto, Y.et al.
  • 雑誌名: Lab.Invest. 84 ページ: 1126-1136
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Activation of the kallikrein-kinin system and release of new kinins through alternative cleavage of kininogens by microbial and human cell proteinases. (2004)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Potempa, J., Travis, J.
  • 雑誌名: Biol.Chem. 385 ページ: 989-996
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Gingipain R. (2004)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., Potempa, J., Travis, J.
  • 雑誌名: Handbook of Proteolytic Enzymes, 2nd edition. Chapter 410 (Barrett, A.J., Rawlings, N.D., and Woessner, J.F., eds) (Academic Press, Amsterdam.) ページ: 1319-1328
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Assessment of thrombin in urine of glomerulonephritis patients by ELISA. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kitamoto, Y., Tomita, K, Imamura, T.
  • 雑誌名: Annals of Clinical Biochemistry 41 ページ: 133-137
• [雑誌論文] Protective effect of vascular endothelial growth factor/vascular permeability factor 165 and 121 on glomerular endothelial cell injury in the rat. (2004)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto, K., Imamura, T., Tomita, K.他4名
  • 雑誌名: Laboratory Investigation 84 ページ: 1126-1136
• [雑誌論文] 血液凝固系と炎症・免疫系のクロストーク (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 雑誌名: 日本集中治療医学会雑誌 11 ページ: 9-17
  • NAID: 50000382425
• [雑誌論文] 炎症の場での組織因子発現-炎症と血液凝固反応のクロストーク (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿
  • 雑誌名: 臨床病理 52 ページ: 342-349
• [雑誌論文] 尿中トロンビン測定によるその病態生理学的意義の解明 (2004)
  • 著者名/発表者名: 北本康則, 今村隆寿, 他3名
  • 雑誌名: 臨床病理 52 ページ: 350-354
• [雑誌論文] 組織因子(CD142)と炎症.特集 DIC診断・治療に対する戦略プロジェクト (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 中村伸
  • 雑誌名: 臨床病理レビュー 130 ページ: 80-86
• [雑誌論文] 組織因子.臨時増刊号 虚血性心疾患と臨床検査 (2004)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 中村伸
  • 雑誌名: Medical Technology 32 ページ: 1503-1506
• [図書] α1-プロテアーゼインヒビター : 構造と機能. 臨床免疫学.第63巻 増刊4 (2005)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 前田 浩
  • 出版者: 日本臨床社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] α1-酸性糖蛋白質 : 構造と機能. 臨床免疫学. 第63巻 増刊4 (2005)
  • 著者名/発表者名: 前田 浩, 今村隆寿
  • 出版者: 日本臨床社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] 組織因子(tissue factor,CD142)の基礎と臨床 : TFのゲノム特性および好中球FT. 図解血栓・止血・血栓学-21世紀の国民病・血栓症制圧のために. (2005)
  • 著者名/発表者名: 中村伸, 上原由有子, 今村隆寿
  • 出版者: 中外医学社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] α_1-プロテアーゼインヒビター:構造と機能.臨床免疫学.第63巻 増刊4 (2005)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 前田 浩
  • 出版者: 日本臨床社
• [図書] α_1-酸性糖蛋白質:構造と機能.臨床免疫学.第63巻 増刊4 (2005)
  • 著者名/発表者名: 前田 浩, 今村隆寿
  • 出版者: 日本臨床社
• [図書] 組織因子(tissue factor, CD142)の基礎と臨床:TFのゲノム特性および好中球TF. 図解血栓・止血・血栓学-21世紀の国民病・血栓症制圧のために. (2005)
  • 著者名/発表者名: 中村伸, 上原由有子, 今村隆寿
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] α_1-プロテアーゼインヒビター:構造と機能.臨床免疫学 (2005)
  • 著者名/発表者名: 今村隆寿, 前田浩
  • 出版者: 日本臨床社(印刷中)
• [図書] Gingipain R. in Handbook of Proteolytic Enzymes, 2nd edition (2004)
  • 著者名/発表者名: Imamura, T., 他2名
  • 出版者: Academic Press, Amsterdam.
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より