| 研究課題/領域番号 |
16590456
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
病態検査学
|
|---|
| 研究機関 | 大阪大学 |
|---|
研究代表者 |
高野 徹 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00263236)
|
|---|
| 研究分担者 |
中田 幸子 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00346222)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2005年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2004年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
|
|---|
| キーワード | 悪性リンパ腫 / 橋本病 / 甲状腺 / イムノグロブリン重鎖 / サザンブロット法 / ベクトレットPCR / 穿刺吸引細胞診 / モノクロナリティー / イムノグロブリン / モノクロナリテイー |
|---|
| 研究概要 |
悪性リンパ腫を疑う症例に対して手術生検を施行する際、少量の新鮮な組織を取り分けて凍結保存した。最終的に57例の組織を収集した。凍結した検体の一部を削ってゲノムDNAをDNA抽出キットにて精製した。1検体あたり1-3μgのDNAが回収された。検体によっては複数箇所を削ってDNAを抽出した。200ngのDNAを用いてベクトレットPCR法を行った。反応後のゲル電気泳動の結果、57例中36例でIgH遺伝子のモノクロナリティーが陽性であると判断された。最終的な病理組織診断との比較では橋本病と診断された10例は全例モノクロナリティーが陰性であった。これに対して悪性リンパ腫と診断された47例中36例(76.6%)でモノクロナリティーが陽性であった。モノクロナリテイーの陽性率は悪性リンパ腫の各組織型(Diffuse Large Cell、MALT、Mixed Cellular)の間では明らかな差がなかった。収集した検体のうち悪性リンパ腫と診断された45例でサザンブロットも同時に施行された。サザンブロットでは45例中33例(73.3%)が陽性であり、陽性率はベクトレットPCR法とほぼ同等であった。これらの結果よりベクトレットPCR法では200ngの少量のDNA検体で十分に検査が可能であり、また悪性リンパ腫におけるIgH遺伝子のモノクロナリティーの検出率は従来法のサザンブロットとほぼ同等であることが推測された。
引き続き、悪性リンパ腫を疑う患者の頚部腫脹部を穿刺し、細胞よりDNAを採取して解析した。現在までベクトレットPCR法でモノクロナリティー陽性の症例1例がその後手術生検を受け、病理組織診断でDiffuse Large Cell型のB細胞リンパ腫であると診断されている。
|
