肝内胆管細胞のheterogeneity(多様性)についてのプロテオーム解析

• 研究課題/領域番号: 16590573
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 上野 義之 東北大学, 病院, 講師 (70282126)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,700千円 (直接経費: 3,700千円); 2005年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2004年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
• キーワード: 胆管細胞 / 原発性胆汁性肝硬変 / プロテオーム解析 / 動物モデル / アクアポリン / 肝内胆管細胞 / Ebhrin / 不死化細胞

研究概要

平成17年度は、主に分離胆管細胞を用いて、その多様性をμアレイ法や、プロテオーム法を用いて解析し、さらにAMA陽性となる動物モデルから胆管細胞を分離してその表出分子の変化を調べることにより原発性胆汁性肝硬変(PBC)の標的細胞である胆管細胞上の蛋白発現と、AMA産生との関連を明らかにすることを目的とした。研究方法としてNODマウスは自己免疫現象を広範に起こすマウス種として知られているが、今回その亜種2系統を用いて胆管細胞の蛋白発現を検討することとした。そのため、まずは実験マウスのモデルとしての妥当性を検証し、またそのコロニーの維持を行った。更に、形態学的、病理学的に胆管炎の有無を確認し、更にAMA産生の有無をELISA法にて確認した。更に胆管細胞を分離する方法を新たに考案し、その後の解析に用いるための細胞回収法の基礎的検討を行った。その研究結果としてNODマウスの亜種2種を米国より入手し、適当な検疫業務の後に繁殖させて安定したコロニーを作製した。更に、経時的のこのモデル動物を観察することにより胆管炎モデルとして妥当であることを確認した。さらにAMAが経時的に産生されてくることを確認した。また、今回新たに開発した胆管細胞の分離法が、純度の高い胆管細胞を得る方法として有望であることを確認した。また、胆管細胞の多様性の一部としてヒト胆管細胞における水チャンネル(aquaporin)の発現があることを明らかにした。さらに今回用いた手法を応用して、胆管細胞の多様性や、細胞特性についての共同研究をまとめて発表した。胆管細胞の経時的変化については、現在最新のマイクロアレイ法とプロテインチップ法で解析中である。胆管細胞の表出分子を詳細に検討することにより、PBCの新たな治療法に貢献する可能性が示された。

研究成果

• [雑誌論文] The limited role of bone marrow cells in experimental cholestatic ductal hyperplasia. (2006)
  • 著者名/発表者名: Moritoki Y, Ueno Y, Kanno A, Yamagiwa Y, Fukushima K, Shimosegawa T.
  • 雑誌名: Liver International 26 ページ: 457-66
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Beta 1 and beta 2 adrenergic receptor agonists prevent bile duct injury induced by adrenergic denervation by increased cAMP levels and activation of Akt. (2006)
  • 著者名/発表者名: Glaser S, Alvaro D, Francis H, Ueno Y, Marucci L, Benedetti A, De Marrow S, Marzioni M, Mancino MG, Phinizy JL, Reichenbach R, Fava G, Summers R, Venter J, Alpini G
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 290
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ca-dependent cytoprotective effects of urso-and tauroursodeoxycholic acid on the biliary epithelium in a rat model of cholestasis and loss of bile ducts. (2006)
  • 著者名/発表者名: Marzioni M, Francis H, Benedetti A, Ueno Y, Fava G, Venter J, Reichenbach R, Mancino MG, Summers R, Alpini G, Glaser S
  • 雑誌名: Am J Pathology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The bioinformatic approach for understanding the heterogeneity of cholangiocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Fukushima K, Ueno Y
  • 雑誌名: World J Gastroenterology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Differential expressions of aquaporin proteins in human cholestatic liver diseases. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tamai K, Fukushima K, Ueno Y, Moritoki Y, Yamagiwa Y, Kanno N, Jefferson DM, Shimosegawa T.
  • 雑誌名: Hepatol Res 34 ページ: 99-103
  • NAID: 10020405804
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Over-expression of Interleukin-6 enhances cell survival and transformed cell growth in human malignant cholangiocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Meng F, Yamagiwa Y, Ueno Y, Patel T
  • 雑誌名: J Hepatol (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Vascular endothelial growth factor stimulates rat cholangiocyte proliferation via an autocrine mechanism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Gaudio E, Barbaro B, Alvaro D, Glaser S, Francis H, Ueno Y, Meininger CJ, Franchitto A, Onori P, Marzioni M, Taffetani S, Fava G, Stoica G, Venter J, Reichenbach R, De Mrrow S, Summers R, Alpini G
  • 雑誌名: Gastroenterology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Beta 1 and Beta 2 adrenergic receptor agonists prevent bile duct injury induced by adrenergic denervation by increased cAMP levels and activation of Akt. (2006)
  • 著者名/発表者名: Glaser S, Alvaro D, Francis F, Ueno Y, Marucci L, Benedetti A, Marzioni M, De Morrow, S, Mancino MG, Phinizy JL, Reichenbach R, Fava G, Summers R, Venter J, Alpini G.
  • 雑誌名: Am J Pathology 290
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The limited role of bone marrow cells in experimental cholestatic ductal hyperplasia. (2006)
  • 著者名/発表者名: Moritoki Y, Ueno Y, Kanno A, Yamagiwa Y, Fukushima K, Shimosegawa T.
  • 雑誌名: Liver International (in press)
• [雑誌論文] Beta 1 and beta 2 adrenergic receptor agonists prevent bile duct injury induced by adrenergic denervation by increased cAMP levels and activation of Akt. (2006)
  • 著者名/発表者名: Glaser S, Alvaro D, Francis H, Ueno Y, Marucci L, Benedetti A, De Manow S, Marzioni M, Mancino MG, Phinizy JL, Reichenbach R, Fava G, Summers R, Venter J, Alpini G
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol (in press)
• [雑誌論文] Differential expressions of aquaporin proteins in human cholestatic liver diseases. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tamai K, Fukushima K, Ueno Y, Moritoki Y, Yamagiwa Y, Kanno N, Jefferson DM, Shimosegawa T.
  • 雑誌名: Hepatol Res (in press)
  • NAID: 10020405804
• [雑誌論文] Tannic Acid Inhibits Cholangiocyte Proliferation after Bile Duct Ligation via a Cyclic Adenosine 5',3'-Monophosphate-Dependent Pathway. (2005)
  • 著者名/発表者名: Taffetani S, Ueno Y, Meng F, Venter J, Francis H, Glaser S, Alpini G, Patel T.
  • 雑誌名: Am J Pathology 166 ページ: 1671-80
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Autocrine/paracrine regulation of the growth of the bilisry tree by the neuroendocrine hormone serotonin. (2005)
  • 著者名/発表者名: Marzioni M, Glaser S, Francis H, Marrucci L, Benedetti A, Alvaro D, Taffetani S, Ueno Y, Roskams T, Phinizy JL, Venter J, Fava G, Lesage GD, Alpini G
  • 雑誌名: Gastroenterology 128 ページ: 121-37
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Autocrine/paracrine regulation of the growth of the biliary tree by the neuroendocrine hormone serotonin. (2005)
  • 著者名/発表者名: Marzioni M, Glaser S, Francis H, Marucci L, Benedetti A, Alvaro D, Taffetani S, Ueno Y, Roskams T, Phinizy JL, Venter J, Fava G, Lesage GD, Alpini G.
  • 雑誌名: Gastroenterology 128 ページ: 121-137
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tannic Acid Inhibits Cholangiocyte Proliferation after Bile Duct Ligation via a Cyclic Adenosine 5', 3'-Monophosphate-Dependent Pathway. (2005)
  • 著者名/発表者名: Taffetani S, Ueno Y, Meng F, Venter J, Fancis H.Glaser S, Alnini G, Patel T.
  • 雑誌名: Am J Pathology 166 ページ: 1671-1680
• [雑誌論文] Translational regulation of XIAP expression and cell survival during hypoxia in human cholangiocarcinoma. (2004)
  • 著者名/発表者名: Marienfeld C, Yamagiwa Y, Ueno Y, Brooks L, Meng F, Patel T
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1198-209
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Alpha-1 adrenergic receptor agonists modulate ductal secretion of BDL rats via Ca(2+)-and PKC-dependent stimulation og cAMP. (2004)
  • 著者名/発表者名: LeSage GD, Alvaro D, Glaser S, Francis H, Marucci L, Roskams T, Phinizy JL, Marzioni M, Benedetti A, Taffetani S, Marbaro B, FavaG, Ueno Y, Alpini G
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1787-97
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Nerve growth factor modulates the proliferative capacity of the intrahepatic biliary epithelium inexperimental cholestasis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Gigliozzi A, Alpini G, Baroni GS, Marucci L, Metalli VD, Glaser SS, Francis H, Mancino MG, Ueno Y, Barbaro B, Benedetti A, Attili AF, Alvaro D
  • 雑誌名: Hepatology 40 ページ: 1116-27
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] cAMP stimulates the secretory and proliferativecapacity of the rat intrahepatic biliary epithelium through changes in the PKA/Src/MEK/ERK1/2 psthway. (2004)
  • 著者名/発表者名: Francis H, Glaser S, Ueno Y, Lesage G, Marucci L, Benedetti A, Taffetani S, Marzioni M, Alvaro D, Venter J, Reichenbach R, Fava G, Lynne Phinizy J, Alpini G
  • 雑誌名: J Hepatol 41 ページ: 528-37
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Translational regulation of XIAP expression and cell survival during hypoxia in humann cholangiocarcinoma. (2004)
  • 著者名/発表者名: Marienfeld C, Yamagiwa Y, Ueno Y, Chiasson V, Brooks L, Meng F, Patel T.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1787-1797
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Alpha-1 adrenergic receptor agonists modulate ductal secretion of BDL rats via Ca(2+)- and PKC-dependent stimulation of cAMP. (2004)
  • 著者名/発表者名: LeSage GD, Alvaro D, Glaser S, Francis H, Marucci L, Roskams T, Phinizy JL, Marzioni M, Benedetti A, Taffetani S, Barbaro B, Fava G, Ueno Y, Alpini G.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1198-1209
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Nerve growth factor modulates the proliferative capacity of the intrahepatic biliary epithelium in experimnental cholestasis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Gigliozzi A, Alpini G, Baroni GS, Marucci L, Metalli VD, Glaser SS, Francis H, Mancino MG, Ueno Y, Barbaro B, Benedetti A, Attili AF, Alvaro D.
  • 雑誌名: Hepatology 40 ページ: 1116-1127
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] cAMP stimulates the secretory and proliferative capacity of the rat intrahepatic biliary epithelium through changes in the PKA/Src/MEK/ERK1/2 pathway. (2004)
  • 著者名/発表者名: Francis H, Glaser S, Ueno Y, Lesage G, Marucci L, Benedetti A, Taffetani S, Marzioni M, Alvaro D, Venter J, Reichenbach R, Fava G, Lynne Phinizy J, Alpini G.
  • 雑誌名: J Hepatol 41 ページ: 528-537
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Translational regulation of XIAP expression and cell survival during hypoxia in human cholangiocarcinoma. (2004)
  • 著者名/発表者名: Marienfeld C, Yamagiwa Y, Ueno Y, Chiasson V, Brooks L, Meng F, Patel T.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1787-1797
• [雑誌論文] alpha-1 adrenergic receptor agonists modulate ductal secretion of BDL rats via Ca(2+)- and PKC-dependent stimulation of cAMP. (2004)
  • 著者名/発表者名: LeSage GD, Alvaro D, Glaser S, Taffetani S, Barbaro B, Fava G, Ueno Y, Alpini G.
  • 雑誌名: Hepatology 40 ページ: 1116-1127
• [雑誌論文] Nerve growth factor modulates the proliferative capacity of the intrahepatic biliary epithelium in experimental cholestasis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Gigliozzi A, Alpini G, Baroni GS, Francis H, Mancino MG, Ueno Y, Barbaro B, Benedetti A, Attili AF, Alvaro D.
  • 雑誌名: Gastroenterology 127 ページ: 1198-1209
• [雑誌論文] cAMP stimulates the secretory and proliferative capacity of the rat intrahepatic biliary epithelium through changes in the PKA/Src/MEK/ERK1/2 pathway. (2004)
  • 著者名/発表者名: Francis H, Glaser S, Ueno Y, Lesage G, Fava G, Lynne Phinizy J, Alpini G.
  • 雑誌名: J Hepatol 41 ページ: 528-537
• [雑誌論文] Ca-dependent cytoprotective effects of urso-and tauroursodeoxycholic acid on the biliary epithelium in a rat model of cholestasis and loss of bile ducts.
  • 著者名/発表者名: Marzioni M, Francis H, Benedetti A, Ueno Y, Fava G, Venter J, Reichenbach R, Mancino MG, Summers R, Alpini G, Glaser S
  • 雑誌名: Am J Pathology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The bioinformatic approach for understanding the heterogeneity of cholangiocytes.
  • 著者名/発表者名: Fukushima K, Ueno Y
  • 雑誌名: World J Gastroenterology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Over-expression of Interleukin-6 enhances cell survival and transformed cell growth in human malignant cholangiocytes.
  • 著者名/発表者名: Meng F, Yamagiwa Y, Ueno Y, Patel T.
  • 雑誌名: J Hepatol (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Vasculat endothelial growth factor stimulates rat cholangiocyte proliferation via an autocrine mechanism
  • 著者名/発表者名: Gaudio E, Barbaro B, Alvaro D, Glaser S, Francis H, Ueno Y, Meininger CJ, Franchitto A, Onori P, Marzioni M, Taffetani S, Fava G, Stoica G, Venter J, Reichenbach R, De Morrow S, Summers R, Alpini G
  • 雑誌名: Gastroenterology (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より