アルツハイマー病関連蛋白による未知の核内転写制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 16590824
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 木下 彩栄 京都大学, 医学部, 教授 (80321610)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2005年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: FRET / アルツハイマー病 / BACE / γセクレターゼ / アミロイド / γ-セクレターゼ / プレセニリン / カドヘリン / 情報伝達 / 核移行 / 転写

研究概要

平成17年度には、PS1のカドヘリン切断によるシナプス制御の機序を細胞レベルで解明するという計画をたてていたが、計画通り、N-カドヘリンの切断により、これまで知られていなかったシグナル伝達が制御されているということを明らかにすることができた。この結果を踏まえて、N-カドヘリンの段階的切断(ADAM10→PS1)の詳細な切断部位を同定し、その変異プラスミドを作成したところ、その変異により切断が生じず、それがシグナル伝達に影響を与えていることを見出した。そこで、この変異をノックインしたノックインマウスを作成することにより、PS1及びADAM10によるN-カドヘリンの切断がin vivoでどのような意義を持つかを検討する段階に入っている。これまでのところ、ADAM10とPS1によりそれぞれ切断されない変異を確定し、現在それをもとに、ターゲッティングベクターの構築が終了し、それをES細胞にトランスフェクションを行った。これらの2系統の変異につき、PCRでスクリーニングを行ったところ、それぞれ、陽性のクローンを得ることができ、さらにキメラマウス作成を目指して、実験が行われている最中である。さらに、細胞系の実験より得られた変異プレセニリンの結果を解析し、プレセニリンの機能の詳細を解明し、別のアプローチよりトランスジェニックマウスを作成する予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Activity-dependent regulation of beta-catenin via epsilon-cleavage of N-cadherin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Uemura K, et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 345(3) ページ: 951-958
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Characterization of sequential N-cadherin cleavage by ADAM10 and PS1. (2006)
  • 著者名/発表者名: Uemura K, et al.
  • 雑誌名: Neuroscience Letters 402(3) ページ: 278-283
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Characterization of sequential N-cadherin cleavage by ADAM10 and PS1. (2006)
  • 著者名/発表者名: Uemura K, Kihara T, Kuzuya A, Okawa K, Nishimoto T, Ninomiya H, Sugimoto H, Kinoshita A, Shimohama S.
  • 雑誌名: Neurosci Lett. 402(3) ページ: 278-283
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Activity-dependent regulation of beta-catenin via epsilon-cleavage of N-cadherin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Uemura K, Kihara T, Kuzuya A, Okawa K, Nishimoto T, Bito H, Ninomiya H, Sugimoto H, Kinoshita A, Shimohama S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 345(3) ページ: 951-958
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The low density lipoprotein receptor-related protein (LRP) is a novel beta-seoretase (BACE1) substrate. (2005)
  • 著者名/発表者名: von Arnim CA, Kinoshita A, Peltan ID, Tangredi MM, Herl L, Lee BM, Spoelgen R, Hshieh TT, Ranganathan S, Battey FD, Liu CX, Bacskai BJ, Sever S, Irizarry MC, Strickland DK, Hyman BT.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 280(18) ページ: 17777-17785
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cortical organization by the septin cytoskeleton is essential for structural and mechanical integrity of mammalian spermatozoa. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ihara M, Kinoshita A, Yamada S, Tanaka H, Tanigaki A, Kitano A, Goto M, Okubo K, Nishiyama H, Ogawa O, Takahashi C, Itohara S, Nishimune Y, Noda M, Kinoshita M.
  • 雑誌名: Dev Cell. 8(3) ページ: 343-352
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cortical organization by the septin cytoskeleton is essential for structural and mechanical integrity of mammalian spermatozoa (2005)
  • 著者名/発表者名: 猪原 匡史, 他
  • 雑誌名: Developmental Cell 8・3 ページ: 343-352
• [雑誌論文] The low density lipoprotein receptor-related protein (LRP) is a novel beta-secretase (BACE1) substrate (2005)
  • 著者名/発表者名: Christine von Arnim 他
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 280・18 ページ: 17777-17785
• [雑誌論文] Cortical organization by the septin cytoskeleton is essential for structural and mechanical integrity of mammalian spermatozoa (2005)
  • 著者名/発表者名: Ihara M, Kinoshita A et al.
  • 雑誌名: Developmental Cell 8 ページ: 343-352
• [雑誌論文] The LDL-receptor related protein(LRP) is a novel beta-secretase(BACE 1) substrate (2005)
  • 著者名/発表者名: Von Arnim C, Kinoshita A et al.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry (印刷中)
• [雑誌論文] Demonstration of BACE(beta-secretase) phosphorylation and its interaction with GGA1 in cells by fluorescence-life time imaging microscopy (2004)
  • 著者名/発表者名: Von Arnim C, et al.
  • 雑誌名: Journal of Cell Science 117 ページ: 5437-5445