血管平滑筋細胞における炎症性遺伝子転写抑制因子のクローニング

• 研究課題/領域番号: 16590877
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 代謝学
• 研究機関: 滋賀医科大学
• 研究代表者: 西尾 善彦 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (40281084)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2005年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: インスリン / NO / CHOP / MCP-1 / C / EBP / 血管平滑筋細胞 / 炎症 / 血管平滑筋

研究概要

Nitric Oxide(NO)による血管平滑筋細胞における炎症性サイトカイン特に、monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1)の発現抑制には転写因子CEBP-homologous protein(CHOP)の発現が関連すること、またCHOPはロイシンジッパー構造を介してC/EBPと2量体を形成して、C/EBPのDNA結合を阻害することからC/EBPの活性を抑制することを明らかにした。一方、高濃度のNOは過剰なCHOP発現を介してMCP-1遺伝子の上流域の-190から-179番塩基の間にCHOPが直接作用して亢進させる事を見出し、本年度はさらにその機構の詳細を検討した。
1)ゲルシフト解析から、NO供与体であるSodium Nitroprusside(SNP)は血管平滑筋細胞においてMCP-1遺伝子の上流域-186から-184塩基を特異的に認識する核蛋白を誘導した。この部位の塩基配列は他の報告においてCHOP認識配列とされる配列と一致した。さらにこの蛋白のDNAへの結合は抗CHOP抗体で阻害された。
2)高濃度SNPおよびCHOP過剰発現によるMCP-1プロモーター活性の誘導は、我々が同定したCHOP反応領域のオリゴDNAをリポーター遺伝子とともに導入した場合デコイと作用してMCP-1プロモーター活性が低下することが明らかになった。
以上からNOにより誘導されるCHOP遺伝子はその発現量より炎症性遺伝子の発現抑制と発現亢進の2方向性に作用する特異な転写調節因子であることが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] The Transcription Factor AP-2{beta}Causes Cell Enlargement and insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tao Y, Maegawa H, Ugi S, Ikeda K, Nagai Y, Egawa K, Nakamura T, Tsukada S, Nishio Y, Maeda S, Kashiwagi A
  • 雑誌名: Endocrinology 147 ページ: 1685-96
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The Transcription Factor AP-2 {beta} Causes Cell Enlargement and Insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tao Y, Maegawa H, Ugi S, Ikeda K, Nagai Y, Egawa K, Nakamura T, Tsukada S, Nishio Y, Maeda S, Kashiwagi A
  • 雑誌名: Endocrinology 147 ページ: 1685-1696
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The Transcription Factor AP-2{beta} Causes Cell Enlargement and Insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tao Y, Maegawa H, Ugi S, Ikeda K, Nagai Y, Egawa K, Nakamura T, Tsukada S, Nishio Y, Maeda S, Kashiwagi A
  • 雑誌名: Endocrinology 147 ページ: 1685-1696
• [雑誌論文] Bidirectional regulation of monocyte chemoattractant protein-1 gene at distinctsites of its promoter by nitric oxide in vascular smooth muscle cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Kodama K, Nishio Y, Sekine O, Sato Y, Egawa K, Maegawa H, Kashiwagi A
  • 雑誌名: Am J Physiol Cell Physiol 289
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Supplement oftetrahydrobiopterin by a gene transfer of GTP cyclohydrolase IcDNA improves vascular dysfunction in insulin-resistant rats. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shinozaki K, Nishio Y, Yoshida Y, Koya D, Ayajiki K, Masada M, Kashiwagi A, Okamura T
  • 雑誌名: J Cardiovasc Pharmacol 46 ページ: 505-12
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Bidirectional regulation of monocyte chemoattractant protein-1 gene at distinctsites of its promoter by nitric oxide in vascular smooth muscle cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Kodama K, Nishio Y, Sekine 0, Sato Y, Egawa K, Maegawa H, Kashiwagi A
  • 雑誌名: Am J Physiol Cell Physiol 289
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Supplement of tetrahydrobiopterin by a gene transfer of GTP cyclohydrolase IcDNA improves vascular dysfunction in insulin-resistant rats. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shinozaki K, Nishio Y, Yoshida Y, Koya D, Ayajiki K, Masada M, Kashiwagi A, Okamura T
  • 雑誌名: J Cardiovasc Pharmacol 46 ページ: 505-512
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Single nucleotide polymorphism (-468 Gly to A) at the promoter region of SREBP-1c associates with genetic defect of fructose-induced hepatic lipogenesis (2004)
  • 著者名/発表者名: Nagata R, Nishio Y et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem 279・28 ページ: 29031-29042
• [雑誌論文] Stiffness and impaired blood flow in lower-leg arteries are associated with severity of coronary artery calcification among asymptomatic type 2 diabetic patients. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya M et al.
  • 雑誌名: Diabetes Care 27・10 ページ: 2409-2415
• [雑誌論文] Regulation of ATP-sensitive potassium channel subunit Kir6.2 expression in rat intestinal insulin-producing progenitor cells.
  • 著者名/発表者名: Hashimoto T et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem (in press)
• [図書] Mitochondorial Pathogenesis (2004)
  • 著者名/発表者名: Nishio Y et al.
  • 総ページ数: 352
  • 出版者: The New York Academy of Sciences