| 研究課題/領域番号 |
16591112
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
新関 寛徳 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (10228124)
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| 研究分担者 |
宮川 幸子 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (30094626)
浅田 秀夫 奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (60252681)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2005年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
2004年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 紫外線 / TLR4 / 自然免疫 / 接触過敏症 / ランゲルハンス細胞 |
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| 研究概要 |
紫外線照射部位では、ランゲルハンス細胞(LC)数が減少し、同部位からの接触過敏症(Contact hypersensitivity, CH)の誘導が阻害されるが、TLR4欠損マウスであるC3H/HeJ(HeJ)では、CHの誘導が阻害されない。そこで、今回TLR4の直接刺激による皮膚への影響を検討するために、大腸菌由来LPSを直接真皮注入し、表皮シートにおけるIa陽性細胞の形態観察および細胞数の測定および、接触過敏症の誘導によりTLR4分子の役割を検討した。
まずLPS25μgを真皮注入後、表皮シートを作製、抗Ia抗体にて染色し、形態を観察した。C3H/HeN(HeN)マウスではPBS注入群あるいはLPS投与後のHeJに比べIa陽性細胞(LC)の細胞体は膨化し、dendriteは減少しており、単位あたりの細胞数も減少していた。以上の所見は紫外線による変化と同等であった。LPS投与は紫外線同様TNFが媒介しているかを検討するため、抗TNF抗体投与後にLPS真皮注入を行った。投与群では、LPS注入による効果は認められなかった。以上より、紫外線照射によるLCに与える影響は、TLR4を介したTNFの作用によるものと考えられた。
次にTLR4のアダプター蛋白であるMyD88欠損マウス(KO)において紫外線がCHの誘導に与える影響を検討した。各実験群のマウス腹部皮膚に4日間連続400J/m^2/日の紫外線を照射した。最終照射直後30分以内の照射部位に185μg dinitrofluorobenzene(DNFB)をマウス腹部皮膚に塗布し、5日後15μg DNFBによる耳介challengeを行い、24, 48時間後の耳介腫脹を測定した。紫外線照射KOはその野生型マウス(B6 background)同様に非照射マウスに比べ耳介腫脹が減少しており、すなわちCHの誘導を阻害した。このことより紫外線によるCHの誘導阻害は(TLR4依存性であるが)MyD88非依存性であることが示唆された。
最後にLPSがTLR4を介した刺激により紫外線によるCH誘導阻害を阻止できるかどうかを検討した。紫外線照射前においても後においても、LPS注入を施行したマウスでは、非照射マウスと同等の耳介腫脹がみられた。このことよりTLR4シグナルはCH誘導相を調節する能力があることを示している。
以上より紫外線照射による皮膚免疫能の変化においてTLR4が関与することが示唆された。
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