研究概要 |
cytochrome P450 3A4(CYP3A4)遺伝子は,内因性のステロイドや薬や生体異物の代謝に関わる.また,multidrug resistance-1(MDR-1)遺伝子の転写産物であるP-glycoproteinは小腸において細胞内から腸管への排泄ポンプとして働く.両者とも,核内ホルモンレセプターファミリーに属するsteroid andxenobiotic receptor(SXR)によって転写活性が制御される.様々な内因性のステロイドや薬物がSXRのリガンドになる.これらのCYP3A4やMDR-1,SXR遺伝子は主に肝臓や小腸で発現するが,MCF-7のような乳癌細胞にも発現することが分かっている.乳癌に対して抗エストロゲン剤とし用いられるtamoxifenはCYP3A4やP-glycoproteinによって代謝されることが分かっており,SXRを介したCYP3A4やMDR-1の転写活性の変化を乳癌細胞株で調べた.乳癌由来細胞株MCF-7にMDR-SXRE-Luc、CYP3A4-SXRE-Lucレポータープラスミド、及びSXR発現ベクターを遺伝子導入し、4-hydroxy tamoxifen(4-HO-TAM)存在下に培養し,ルシフェラーゼレポーターアッセイを用いて転写活性を解析した。結果はMDR-1においてもCYP3A4においても,4-HO-TAMの濃度およびSXRの発現量に依存的に増強した。我々は,4-HO-TAMとSXRが結合することをligand binding assayにて確認した.さらに準定量的RT-PCRを用いて,4-HO・TAMの投与によってCYP3A4とMDR-1のmRNAのMCF-7細胞内での増加を確認した.これらの結果より,4-HO-TAMはSXRを介してCYP3A4やMDR-1の転写を活性化し乳癌細胞内でのtamoxifenの濃度の低下を引き起こしている可能性がある.そのため乳癌細胞におけるSXRの発現は,tamoxifen耐性などのリスク因子となり得る.
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