人型癌転移抑制抗体によるエピトープの解析とその遺伝子群からの転移のプロセスの解明

• 研究課題/領域番号: 16591285
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 外科学一般
• 研究機関: (財)田附興風会
• 研究代表者: 石田 久雄 (財)田附興風会, 医学研究所第5研究部, 研究員 (40322771)
• 研究分担者: 三宅 正幸 (財)田附興風会, 医学研究所第5研究部, 部長 (90250076) ; 服部 登 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科第2内科, 講師 (00283169) ; 広田 喜一 京都大学, 医学研究所麻酔科, 講師 (00283606)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2005年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: KMマウス / Aminopaptidase N / ヒト型モノクローナル抗体 / Aminopeptidase N / ADCC効果 / Aminopeputidase N

研究概要

転移抑制ヒト型モノクローナル抗体を作製し、そのエピトープの解析から転移のメカニズムを解析することは、実際のヒトの癌転移のモデルとして非常に意義深いものと考える。我々は肺小細胞癌株から高肺転移を起こす細胞株SBC-Hを作製することに成功しており、これも利用して、キリン麦酒より提供を受けたヒトのB細胞を持つKMマウスを用い、高肺転移細胞株SBC-Hでマウスを免疫し、SBC-Hの母細胞株に発現していないような転移に関係したエピトープを認識するヒト型モノクローナル抗体を作製してきた。現在のところ、すでにこれらの抗体を用い、この高肺転移株の肺転移を抑制できるものを11種類選別することができた。これらのうち7種類は蛋白質を認識しており、残りの4種類は糖鎖を認識していた。そこで、前者については遺伝子クローニングをすすめ、そのエピトープを明らかにし、後者についてはTLC immunostaining、NMR分析等でその糖鎖構造を明らかにしてきた。既にこれまでのところ、そのうち2種の抗体がAminopeptidase Nを認識しており、この内のMT95-4抗体はこれまでに作製したAminopeptidase N認識マウスモノクローナル抗体よりもはるかに高率にAminopeptidase Nの酵素活性を抑制した。そこで、動物実験を行うことにし、乳癌細胞の骨転移をヌードマウスを用いた実験でMT95-4抗体は、マウス抗体MH8-11などよりはるかに効率に骨転移を抑制することを証明した。我々が作製した、ヒト型抗APN抗体は転移を抑制する機能を持つ世界では類を見ないユニークな抗体であり、ヒト化抗体やキメラ抗体に比べ副作用は更に少ないと考えられ、直ちに臨床応用可能であると考える。

研究成果

• [雑誌論文] 細胞運動の制御による癌移転の抑制 Suppression of metastasis by inhibition of cell motility (2005)
  • 著者名/発表者名: 徳原孝洋, 三宅正幸
  • 雑誌名: 外科治療 93 ページ: 221-222
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Circulating aminopeptidase N/CD13 is an independent prognostic factor inpatients with non-small celllung cancer (2005)
  • 著者名/発表者名: Murakami.H.et al.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. 11 ページ: 8674-8679
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Two cases of hyperkalemia after administration of hypertonic mannitol during craniotomy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K. et al.
  • 雑誌名: J Aflesth. 19 ページ: 75-77
  • NAID: 10014429030
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regulation of hypoxia-inducible factor 1 by prolyl and asparaginyl hydroxylases. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K. et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 338 ページ: 610-616
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Hypoxia reduces constitutive and TNF-alpha-induced Expression of monocyte chemoattractant protein-1 in human proximal renal tubular cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Li, X.et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 335 ページ: 1026-1034
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] KL-6, a human MUCI mucin, promotes proliferation and survival of lung fibroblasts. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ohshimo, S. et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 30 ページ: 1845-1852
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Circulating aminopeptidase N/CD13 is an independent prognostic factor in patients with non-small cell lung cancer (2005)
  • 著者名/発表者名: Murakami, H., Yokoyama, A., Kondo, K., Nakanishi, S., Kohno, N., Miyake, M.
  • 雑誌名: Clin.Cancer Res 11 ページ: 8674-8679
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Two cases of hyperkalemia after administration of hypertonic mannitol during craniotomy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K., Hara, T., Hosoi, S., Hara, Y., Adachi, T.
  • 雑誌名: J.Anesth. 19 ページ: 75-77
  • NAID: 10014429030
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Regulation of hypoxia-inducible factor 1 by prolyl and asparaginyl hydroxylases. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K., Semenza, G.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 338 ページ: 610-606
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Hypoxia reduces constitutive and TNF-alpha-induced expression of Monocyte chemoattractant protein-1 in human proximal renal tubular cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Li, X., Kimura, H., Hirota, K., Sugimoto, H., Yoshida, H.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 335 ページ: 1026-1034
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] KL-6, a human NUC1 mucin, promotes proliferation and survival of Lung fibroblasts. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ohshimo, S., Yokoyama, A., Hattori, N., Ishikawa, N., Hirasawa, Y., Kohno, N.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 30 ページ: 1845-1852
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Circulating aminopeptidase N/CD13 is an independent prognostic factor in patients with non-small celllung cancer. (2005)
  • 著者名/発表者名: Murakami, H. et al.
  • 雑誌名: Clin.Cancer Res. 11 ページ: 8674-8679
• [雑誌論文] Clinicopathological significance of Aminopeptidase N/CD13 expression in human gastric carcinoma. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kawamura, J. et al.
  • 雑誌名: Hapato-gastroenterol. (in press)
• [雑誌論文] Two cases of hyperkalemia after administration of hypertonic mannitol during craniotomy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K. et al.
  • 雑誌名: J.Anesth. 19 ページ: 75-77
  • NAID: 10014429030
• [雑誌論文] Regulation of hypoxia-inducible factor 1 by prolyl and asparaginyl hydroxylases. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K. et al.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 338 ページ: 610-616
• [雑誌論文] Hypoxia reduces constitutive and TNF-alpha-induced expression of monocyte chemoattractant protein-1 in human proximal renal tubular cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Li, X.et al.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 335 ページ: 1026-1034
• [雑誌論文] KL-6, a human MUC1 mucin, promotes proliferation and survival of lung fibroblasts. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ohshimo, S. et al.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 30 ページ: 1845-1852
• [雑誌論文] The Plasminogen activation system reduces fibrosis in the lung by a Hepatocyte growth factor-dependent mechanism. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori, N., et al.
  • 雑誌名: Am. J. Pathol 164 ページ: 1091-1098
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] MRP-1/CD9 gene transduction downregulates Wnt signal pathways. (2004)
  • 著者名/発表者名: Huang, C. et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 7475-7483
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 癌の封じ込めによる肺切除適応の拡大 Enlargement of application for lung cancer surgery based on metastasis prevention. (2004)
  • 著者名/発表者名: 石田久雄 et al.
  • 雑誌名: 外科治療 90 ページ: 85-86
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 多変量解析による膵癌の進展・予後に関与する遺伝子異常の検索 (2004)
  • 著者名/発表者名: 池田直也 e tal.
  • 雑誌名: 病理と臨床 22 ページ: 819-825
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The Plasminogen activation system reduces fibrosis in the lung by a Hepatocyte growth factor-dependent mechanism. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori, N., Mizuno, S., Yoshida, Y., Chin, K., Mishima, M., Sisson, TH., Simon, RH., Nakamura, T., Miyake, M.
  • 雑誌名: Am.J.Pathol. 164 ページ: 1091-1098
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Gene therapy for pulmonary diseases. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori, N., Miyake, M.
  • 雑誌名: Frontiers in Immuno-gene Therapy ページ: 209-225
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] MRP-1/CD9 gene transduction downregulates Wnt signal pathways. (2004)
  • 著者名/発表者名: Huang, C., Liu, D., Masuya, D., Kameyama, K., Nakashima, T., Yokomise, H., Ueno, M., Miyake, M.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 7475-7483
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The plasminogen activation system reduces fibrosis in the lung by a hepatocyte growth factor-dependent mechanism. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori, N. et al.
  • 雑誌名: American Jpurnal of Pathology 164 ページ: 1091-1098
• [雑誌論文] MRP-1/CD9 gene transduction downregulates Wnt signal patyhways. (2004)
  • 著者名/発表者名: Huang, C. et al.
  • 雑誌名: Oncogene 23 ページ: 7475-7483
• [雑誌論文] Response shift in perception of sleepiness in obstructive sleep apnes-hypopnea syndrome before and after treatment with nasal CPAP. (2004)
  • 著者名/発表者名: Chin, K. et al.
  • 雑誌名: Sleep 27 ページ: 490-493
• [雑誌論文] The intravenous anesthetic propofol inhibits hypoxia-inducible factor 1 activity in an oxygen tension-dependent manner. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takabuchi, S. et al.
  • 雑誌名: FEBS Lett 577 ページ: 434-438
• [雑誌論文] The inhibitory effect of sodium nitroprusside on HIT-1 activation is not dependent on nitric oxide-soluble guanylyl cyclase pathway. (2004)
  • 著者名/発表者名: Takabuchi, S. et al.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 324 ページ: 417-423
• [雑誌論文] Induction of hypoxia-inducible factor 1 activity by muscarinic acetylcholine receptor-signaling. (2004)
  • 著者名/発表者名: Hirota, K. et al.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 279 ページ: 41521-41528
• [雑誌論文] Clinical significance of Aminopeptidase N in Non-Small Cell LungCancer.
  • 著者名/発表者名: Tokuhara.T.et al.
  • 雑誌名: Clin. Cancer Res. (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] MRP-1/CD9 gene transduction regulates the actin cytoskeleton through the down-regulation of WAVE2.
  • 著者名/発表者名: Huang, CL. et al.
  • 雑誌名: Oncogene (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] MRP-1/CD9 gene transduction regulates the actin cytoskeleton throug the down-regulation of WAVE2.
  • 著者名/発表者名: Huang, CL., Ueno, M., Liu, D., Masuya, D., Nakano, J., Yokomise, H., Nakagawa, T., Miyake, M.
  • 雑誌名: Oncogene (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Clinical significance of Aminopeptidase N in Non-Small Cell Lung Cancer.
  • 著者名/発表者名: Tokuhara, T., Hattori, N., Ishida, H., Hirai, T., Higashiyama, M., Kodama, K., Miyake, M.
  • 雑誌名: Clin, Cancer, Res. (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] 呼吸器外科の最新医療 (2005)
  • 著者名/発表者名: 石田久雄, 三宅正幸
  • 総ページ数: 3
  • 出版者: 先端医療技術研究所
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] Frontiers in lmmuno-gene Therapy (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori.N., Miyake, M.
  • 総ページ数: 16
  • 出版者: Research Signpost
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] Frontiers in Immuno-gene Therapy (2004)
  • 著者名/発表者名: Hattori, N, Miyake, M.
  • 総ページ数: 16
  • 出版者: Osamu Mazda