| 研究課題/領域番号 |
16591494
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
整形外科学
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
田中 浩 山口大学, 医学部, 助教授 (50197464)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2005年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2004年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 脂肪組織 / 骨芽細胞 / 軟骨細胞 / bone formation / cartilage regeneration / gene expression |
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| 研究概要 |
1)脂肪組織由来前駆細胞の培養
(方法)脂肪吸引手術時に採取した脂肪吸引物を処理することにより、脂肪組織由来前駆細胞を分離し、継代培養を行った。
2)骨芽細胞への分化に関する研究
(方法)培養した脂肪組織由来前駆細胞にデキサメサゾン及びBMPを作用させた。これらの細胞に対しアルカリフォスファターゼ染色を行った。また細胞よりmRNAを抽出し、RT-PCRにより骨芽細胞のマーカー遺伝子の発現を調べた。
(結果)デキサメサゾンやBMPを加えることにより、アルカリフォスファターゼ染色陽性細胞が多数みられ、骨芽細胞のマーカー遺伝子の発現が増加していた。
3)軟骨細胞への分化に関する研究
(方法)脂肪組織由来前駆細胞を遠心管培養法、高密度培養法など三次元構造を維持する方法にて培養した。これらの培養法に対し成長因子(BMP、TGF-b)を作用させ、3週まで培養した。これらの細胞を包埋切片とし、アリューシャンブルーにて染色し、軟骨基質の産生について組織学的に評価した。また細胞よりmRNAを抽出し、RT-PCRにより軟骨細胞のマーカー遺伝子の発現を調べた。
(結果)脂肪組織由来前駆細胞では、これらの培養法により、アリューシャンブルーにて染色される基質を有する軟骨様の組織がみられ、軟骨細胞のマーカー遺伝子の発現が増加していた。
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