骨軟部腫瘍に対する新規分子標的治療法の開発

• 研究課題/領域番号: 16591520
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所)
• 研究代表者: 吉岡 潔子 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), 研究所, 主任研究員 (40342993)
• 研究分担者: 伊藤 和幸 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), 研究所, 部長 (20301806) ; 吉川 秀樹 大阪大学, 大学院・医学研究科, 教授 (60191558)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2005年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 2004年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
• キーワード: SSX / invasion / osteosarcoma / colony formation / tumor formation / siRNA / wrapped liposome / NASBA / breast cancer / tight junction / LC-MS / MS

研究概要

滑膜肉腫に特異的な融合遺伝子SYT-SSXのfusion partnerとして単離されたSSXは、生理的には精巣に、また多種の臨床腫瘍例で発現が報告されており、Cancer testis antigenと考えられている。我々は、Nucleic Acid Sequence-Based Amplification(NASBA)定量系を用いてstageの進んだ骨・軟部腫瘍症例でSSXの高発現が認められることを既に報告した(11.研究発表の4)。次に、SSXの腫瘍の進展、増悪における役割を明らかにすることを目的として、細胞レベル、動物固体レベルでの解析を行った。ヒト骨・軟部腫瘍かちSSX遺伝子のcDNA全長をクローニングし、FLAGtagを付加した発現ベクターを作製した。ヒト骨肉腫細胞株Saos-2に導入、発現量の異なる安定過剰発現株を複数作製してその生物学的機能を解析した.SSX過剰発現細胞ではヽ浸潤゜運動能の亢進(親株の3〜5倍)を認めた。親株と比較して細胞増殖速度に差を認めなかったが、軟寒天中のcolony formationは亢進(親株の2倍)を認めた。さらに、これらの安定発現株をヌードマウスの皮下に移植すると腫瘤を形成し、病理組織像ではosteoidの形成が観察された(Mockでは腫瘤形成を認めなかった)。また、SSXを内因性に発現しているヒト線維芽肉腫細胞株HT1080にSSX特異的siRNAを導入してSSXの発現レベルを低下させると、浸潤・運動能の減少(controlの50%)、ミオシン軽鎖のリン酸化、Rac1の活性化が抑制され、形態的にはrufflingの減少が認められた。現在、SSXに対するsiRNAを内包したwrapped liposomeを担がんヌードマウスに投与し、抗腫瘍効果を解析することを計画している。

研究成果

• [雑誌論文] Quantification of SSX mRNA expression in human bone and soft tissue tumors using Nucleic Acid Sequence-Based Amplification (NASBA) (2005)
  • 著者名/発表者名: Naka, N. et al.
  • 雑誌名: J. Mol. Diagn. 7 ページ: 187-197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Intrathecal administration of Y-27632, a specific ROCK inhibitor, for rat neoplastic meningitis (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, H. et al.
  • 雑誌名: Mol. Cancer Res. 3 ページ: 425-433
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Multiple signaling pathways are activated during Insulin-like growth factor-1 (IGF-1) stimulated breast cancer cell migration (2005)
  • 著者名/発表者名: Zhang X. et al.
  • 雑誌名: Breast Cancer Res. Treat. 93 ページ: 159-168
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Quantification of SSX mRNA expression in human bone and soft tissue tumors using Nucleic Acid Sequence-Based Amplification (NASBA) (2005)
  • 著者名/発表者名: Naka, N., Joyama, S., Tsukamoto, Y., Yoshioka, K., Hashimoto, N., Ujiiye T., Hayashi, T., Kawase, M., Mano, M., Ishiguro, S., Myoui, A., Ueda, T., Yoshikawa, H., Araki, N., Itoh, K.
  • 雑誌名: J.Mol.Diagn. 7 ページ: 187-197
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Intrathecal administration of Y-2 7632,a specific ROCK inhibitor, for rat neoplastic meningitis (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, H., Yoshioka, K., Miyahara, E., Fukushima, Y, Tamura, M., Itoh, K.
  • 雑誌名: Mol.Cancer.Res. 3(cited on the cover) ページ: 425-433
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Multiple signaling pathways are activated during Insulin-like growth factor-I (IGF-I) stimulated breast cancer cell migration (2005)
  • 著者名/発表者名: Zhang, X., Lin, M., van Golen, KL, Yoshioka, K., Itoh K., Yee, D.
  • 雑誌名: Breast Cancer Res.Treat. 93 ページ: 159-168
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Quantification of SSX mRNA expression in human bone and soft tissue tumors using Nucleic Acid Sequence-Based Amplification (NASBA) (2005)
  • 著者名/発表者名: Naka, N., et al.
  • 雑誌名: J. Mol. Diagn. 7 ページ: 187-197
• [雑誌論文] Intrathecal administration of Y-27632, a specific ROCK inhibitor, for rat neoplastic meningitis (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa, H., et al.
  • 雑誌名: Mol. Cancer Res. 3 ページ: 425-433
• [雑誌論文] Multiple signaling pathways are activated during Insulin-like growth factor-1(IGF-1) stimulated breast cancer cell migration (2005)
  • 著者名/発表者名: Zhang X., et al.
  • 雑誌名: Breast Cancer Res. Treat. 93 ページ: 159-168
• [雑誌論文] Quantification of SSX mRNA expression in human bone and soft tissue tumors using Nucleic Acid Sequence-Based Amplification (NASBA) (2005)
  • 著者名/発表者名: Naka, N. et al.
  • 雑誌名: J.Mol.Diagn. (印刷中)
• [雑誌論文] LIM kinase 1 : evidence for a role in the regulation of intracellular vesicle trafficking of lysosomes and endosomes in human breast cancer cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, Y. et al.
  • 雑誌名: Eur. J. Cell Biol. 83 ページ: 369-380
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Interleukin-6/soluble Interleukin-6 Receptor Signaling Attenuates Proliferation and Invasion, and Induces Morphological Changes of a Newly Established Pleomorphic Malignant Fibrous Histiocytoma Cell Line (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi, H. et al.
  • 雑誌名: Am. J. Pathol. 165 ページ: 471-480
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] SSX : new molecular target regulating cancer cell invasion (2004)
  • 著者名/発表者名: Itoh, K. et al.
  • 雑誌名: Clin. Exp. Metastasis 21 ページ: 617-617
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] LIM kinase 1: Evidence for a role in the regulation of intracellular vesicle trafficking of lysosomes and endosomes in human breast cancer cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, Y., Yoshioka, K., Bernard, O., Himeno, M., Itoh, K.
  • 雑誌名: Eur.J.Cell Biol. 83 ページ: 369-380
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] IL-6/soluble IL-6R Signaling Attenuates Proliferation and Invasion, and Induces Morphological Changes of a Newly Established Pleomorphic Malignant Fibrous Histiocytoma Cell Line (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi, H.Yoshioka, K., Joyama S., Araki, N., Myoui, A., Ishiguro, S., Ueda, T., Yoshikawa, H., Itoh, K.
  • 雑誌名: Am.J.Pathol. 165 ページ: 471-480
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] SSX : new molecular target regulating cancer cell invasion (2004)
  • 著者名/発表者名: Itoh, K., Joyama, S., Naka, N., Yoshioka, K.
  • 雑誌名: Abstracts of the 10th International Congress of the Metastasis Research Society 617
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Interleukin-6/Soluble Interleukin-6 Receptor Signaling Attenuates Proliferation and Invasion, and Induces Morphological Changes of a Newly Established Pleomorphic Malignant Fibrous Histiocytoma Cell Line (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi, H. et al.
  • 雑誌名: Am.J.Pathol. 165 ページ: 471-480
• [雑誌論文] LIM kinase 1 : evidence for a role in the regulation of intracellular vesicle trafficking of lysosomes and endosomes in human breast cancer cells (2004)
  • 著者名/発表者名: Nishimura, Y. et al.
  • 雑誌名: Eur.J.Cell Biol. 83 ページ: 369-380
• [雑誌論文] SSX : new molecular target regulating cancer cell invasion (2004)
  • 著者名/発表者名: Itoh, K. et al.
  • 雑誌名: Clin.Exp.Metastasis 21 ページ: 617-617