胎児環境汚染のリスク評価に有用なバイオマーカーの同定

• 研究課題/領域番号: 16591641
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 順天堂大学 (2005-2006); 千葉大学 (2004)
• 研究代表者: 長田 久夫 順天堂大学, 医学部, 講師 (30233505)
• 研究分担者: 坂本 理恵 千葉大学, 医学部附属病院, 助手 (00375635) ; 關 克義 千葉大学, 医学部附属病院, 助教授 (90272319) ; 関谷 宗英 千葉大学, 医学部附属病院, 教授 (00092065) ; 野村 文夫 千葉大学, 医学部附属病院, 教授 (80164739) ; 森 千里 千葉大学, 医学部附属病院, 教授 (90174375)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円); 2006年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2005年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2004年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: 胎児 / 環境汚染 / リスク評価 / バイオマーカー / プロテインチップ法 / 二次元電気泳動 / 臍帯血 / PCB / 臍帯

研究概要

1.胎児期PCB曝露のリスク評価に有用なバイオマーカーの同定
対象は、インフォームドコンセントの得られた正常妊娠経過母体52例で、その正常新生児の臍帯血について高感度ガスクロマトグラフ質量分析計を用いPCB濃度を測定した。測定値の上位5例を高濃度群、下位5例を低濃度群として抽出し、これら10例の臍帯血検体について蛋白量を測定後、等電点と分子量からなるアガロース2-DEを行った。蛋白染色したゲル上で、複数の症例に共通して高濃度群と低濃度群間に発現の違いが認められるスポットを選別し、トリプシンによるインゲル消化後、イオントラップ型LC-MS/MS装置にて蛋白の同定を行った。その結果、臍帯血PCB濃度(ng/g-wet)は、最低値16から最高値390までに分布していた。高濃度群で染色強度が明らかに高値を示したスポットは、計5個(分子量:60KD、40KD、40KD、35KD、35KD)存在した。逆に低濃度群の方が高値を示したスポットは計1個(分子量:35KD)であった。蛋白同定によって絞り込まれた候補蛋白の中には、α-fetoprotein、fibrinogen β-chain、apolipoprotein Eが含まれていた。2回目の蛋白同定では、β2-microglobulin、fibrinogen α-chain、fibrinogen γ-chainが候補蛋白として抽出された。以上より、アガロース 2-DEとLC-MS/MS法を用いたプロテオーム解析によって、臍帯血中にPCB曝露と関連する蛋白が複数存在することを明らかにし、さらに蛋白同定することができた。
2.今後の課題・展望
妊娠時母体血中のバイオマーカー候補蛋白の含有量と、分娩時検体中の内分泌撹乱物質、農薬・有機溶剤、必須元素・重金属の含有量の関連を、目標対象数を500例に設定した上で前方視的に解析し、バイオマーカーとしての有用性を検証する。

研究成果

• [雑誌論文] Necessity to measure PCBs and organochlorine pesticide concentrations in human umbilical cords for fetal exposure assessment. (2005)
  • 著者名/発表者名: Fukata, H., Omori, M., Osada, H., Todaka, E., Mori, C.
  • 雑誌名: Environ. Health Perspect. 113 ページ: 297-303
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Fetal exposure to phytoestrogens - the difference of phytoestrogen status in mother and fetus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Todaka, E., Sakurai, K., Fukata, H., Miyagawa, H., Uzuki, M., Omori, M., Osada, H., Ikezuki, Y., Tsutsumi, O., Iguchi, T., Mori C.
  • 雑誌名: Environ. Res. 99 ページ: 195-203
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Necessity to measure PCBs and organochlorine pesticide concentrations in human umbilical cords for fetal exposure assessment. (2005)
  • 著者名/発表者名: Fukata, H., Omori, M., Osada, H., Todaka, E., Mori, C.
  • 雑誌名: Environ.Health Perspect. 113 ページ: 297-303
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Fetal exposure to phytoestrogens-the difference of phytoestrogen status in mother and fetus. (2005)
  • 著者名/発表者名: Todaka, E., Sakurai, K., Fukata, H., Miyagawa, H., Uzuki, M., Omori, M., Osada, H., Ikezuki, Y., Tsutsumi, 0., Iguchi, T., Mori C.
  • 雑誌名: Environ.Res. 99 ページ: 195-203
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The contamination levels of 3 organochlorines and the pattern of gene expressions in human umbilical cords from intra-pairs of twins at delivery.
  • 著者名/発表者名: Omori-Inoue, M., Fukata, H., Komiyama, M., Todaka, E., Aburatani, H., Osada, H., Mori, C.
  • 雑誌名: Reprod. Toxicol. (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] The contamination levels of 3 organochlorines and the pattern of gene expressions in human umbilical cords from intra-pairs of twins at delivery.
  • 著者名/発表者名: Omori-Inoue, M., Fukata, H., Komiyama, M., Todaka, E., Aburatani, H., Osada, H., Mori, C.
  • 雑誌名: Reprod.Toxicol. (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The contamination levels of 3 organochlorines and the pattern of gene expressions in human umbilical cords from intra-pairs of twins at delivery.
  • 著者名/発表者名: Omori-Inoue, M., Fukata, H., Komiyama, M., Todaka, E., Aburatani, H., Osada, H., Mori, C.
  • 雑誌名: Reprod. Toxicol. (in press)