| 研究概要 |
1 反復流産患者IVF-ET反復不成功患者、妊娠中毒症患者JUGRをもつ患者に対して、抗フォスファチジルセリン(PS)抗体、抗カルジオリピン(CL)抗体、抗フォスファチジルエタノールアミン(PE)抗体、抗アネキシンA5抗体のスクリーニングを逐次遂行した。疫学調査からIgGを重視し、カラムを用いてポリクローナルIgG抗体を精製した。
2 IVF-ET反復不成功患者につき、抗PS抗体、抗CL抗体、抗PE抗体が卵胞液中に存在しているか確認した。さらにその影響をIVF受精卵のグレードを観察する事により、後方視的に検討した。特にIgGアイソタイプに病原性が存在することが確認された。
3 アネキシンA5はカルシウム依存性リン脂質結合蛋白であるため、その性質を利用して胎盤から精製を行った。また、リコンビナントアネキシンA5の作製を行った。
4 リン脂質のソースとして、リボソーム(PS/PC,CL/PC,PE/PC,PI/PC,SM/PC,PC only)、血小板、トロフォブラストを用い、アネキシンA5、抗アネキシンA5抗体、リン脂質、抗リン脂質抗体の相互関係をELISA、Biacore、Immunoblot、フローサイトメトリー、免疫組織化学にて検討し、PC単独以外にはアネキシンA5が結合する事を確認した。
5 マウス卵および.精子を用い、精製した抗PS抗体、抗CL抗体、抗PE抗体、抗アネキシンA5抗体をコファクターと共に添加し、卵、精子および受精に及ぼす影響を形態学的、免疫組織学的に検討した。
6 抗ラミニン1抗体の流産への関与を確認した。
7 末梢血NK細胞活性増加の不妊症への関与を確認した。
8 レーザー散乱粒子計測法を用いた血小板凝集機能検査を用いて、抗PSI抗体、抗CL抗体、抗PE抗体、抗アネキシンA5抗体の添加による微少凝集反応を確認した。
9 以上の検討から、不妊症と不育症の類似点を多数見いだした。
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