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創傷治癒のinvitroモデルの開発;新生毛細血管の切断による転写因子の解析

研究課題

研究課題/領域番号 16591796
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 形成外科学
研究機関埼玉医科大学

研究代表者

穐田 真澄  埼玉医科大学, 医学部, 教授 (60105905)

研究期間 (年度) 2004 – 2005
研究課題ステータス 完了 (2005年度)
配分額 *注記
1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2004年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
キーワード創傷治癒 / 血管新生 / Egr-1 / FGF-2 / レーザー / 転写因子 / コラーゲンゲル / 培養 / レーザーマイクロダイセクション / Egr / マクロファージ
研究概要

【目的】マウス大動脈片をコラーゲンゲル内に包埋培養し、培養下で毛細血管を新生させた後、レーザーあるいはメスを用い新生した毛細血管を顕微鏡下で切断した。切断後、血管新生因子の調節にかかわる転写因子であるearly growth response gene(Egr)-1,血管新生因子である線維芽細胞増殖因子(FGF)-2の発現について検討した。
【材料と方法】成熟マウスより採取した動脈片を培養皿(PetriPERM50)に置き、その上にコラーゲンゲル液を重層しゲル化した後、培養液を加え培養を行った。培養10日後、PALMレーザーマイクロダイセクション(窒素レーザー;パルス方式、337nm)あるいはメスを用いて新生毛細血管様チューブを顕微鏡下で切断後、位相差顕微鏡と電子顕微鏡による観察を行った。さらに、切断前後の毛細血管様チューブおよび遊走細胞からtotal RNAを抽出し、cDNAに変換後、リアルタイムRT-PCRによりEgr-1,FGF-2の遺伝子発現を検討した。
【得られた成果】動脈片から新生した毛細血管様チューブの切断後、その周囲にネクローシスに陥った細胞が認められた。レーザーの方がより微細な毛細血管の切断が可能であるが、レーザー、メスによる切断後ともにEgr-1の発現は増強し、その後減少を認めた。FGF-2の遺伝子発現はEgr-1の発現の減少後も引き続きみられた。Egr-1は血管傷害時に一過性に発現が認められ、細胞遊走、増殖、血栓形成などに重要な役割を担い、血管の傷害によって発現が誘導される遺伝子群の共通の調節因子であると考えられている。本モデルは血管傷害後の細胞動態だけでなく、創傷治癒の分子機構を解析する為の有用なモデルになり得ることが分かった。

報告書

(3件)
  • 2005 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて 2005 2004

すべて 雑誌論文 (7件)

  • [雑誌論文] 三次元コラーゲンゲル培養法を用いたin vitro毛細血管損傷モデル作成の試み2005

    • 著者名/発表者名
      藤田恵子
    • 雑誌名

      脈管学 45・10

      ページ: 637-641

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 実績報告書 2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] An in vitro model for studying vascular injury after laser microdissection2005

    • 著者名/発表者名
      Fujita Keiko
    • 雑誌名

      Histochemistry and Cell Biology

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 実績報告書 2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] An in vitro model for studying micro-vascular injury using a three-dimensional collagen gel culture2005

    • 著者名/発表者名
      Fujita K
    • 雑誌名

      J Jpn College of Angiology 45-10

      ページ: 637-641

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] An in vitro model for studying vascular injury after laser microdissectio2005

    • 著者名/発表者名
      Fujita K
    • 雑誌名

      Histochemistry and Cell Biology

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Remodeling of small blood vessels after laser injury in vitro2004

    • 著者名/発表者名
      Akita Masumi
    • 雑誌名

      Cardiovascular Pathology 13・3

      ページ: 163-163

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Remodeling of small blood vessels after laser injury in vitro2004

    • 著者名/発表者名
      Akita M
    • 雑誌名

      Cadiovascular Pathology 13-3

      ページ: 163-163

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2005 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Remodeling of small blood vessels after laser injury in vitro2004

    • 著者名/発表者名
      Akita Masumi
    • 雑誌名

      Cardiovascular Pathology 13

      ページ: 163-163

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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