| 研究課題/領域番号 |
16591804
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
形成外科学
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
岩切 致 日本医科大学, 医学部, 助手 (50307899)
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| 研究分担者 |
水野 博司 日本医科大学, 医学部, 助教授 (80343606)
赤石 諭史 日本医科大学, 医学部, 助手 (10373010)
村上 正洋 日本医科大学, 医学部, 助教授 (00239500)
百束 比古 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00165135)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2006年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2005年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
2004年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / 脂肪 / 皮膚 / 再生医学 / 組織工学 |
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| 研究概要 |
F344近郊系ラットの鼠径部脂肪塊から酵素処理により脂肪組織幹細胞(Adipose derived Stem cells、以下ASC)を獲得し10%FBS添加DME培地内で培養、継代を繰り返した。皮膚潰瘍モデルを用いた実験に先立ち、第3継代ASCをトリプシン処理後、細胞浮遊液を作成し、直径1.5cmのコラーゲンスポンジ1個あたり1x10^6個播種した後、再度100mmディッシュ内で培養を継続後、1,3,5,7日後にコラーゲンスポンジ内の細胞数をカウントし増殖曲線を作成したところ、7日目までは比例的に細胞増殖することを確認できた。
次に同系ラットに直径1.5cmの背部皮膚欠損創を作成後、濃度1mg/mlのマイトマイシンCを塗布して作成した難治性皮膚潰瘍モデルに対し、コラーゲンスポンジに組み込んだASC(以下ハイブリッド型コラーゲンスポンジ)を移植し、移植後7および14日後に肉芽組織の増殖の程度や新生血管の程度を組織学的に評価した。その結果コントロール群と比較して経時的に有意に創傷治癒促進効果が確認された。また周囲の健常皮膚からの創傷治癒効果を除外するため、移植直前にシリコンチャンバーを潰瘍周囲に装着したモデルにおいても同様の結果が得られた。
最後に、創傷治癒機転が潜在的に不良な糖尿病モデル動物を用い、同様の治癒効果が得られるかを検討するため、糖尿病マウス(db/dbマウス)の鼠径部皮下脂肪組織からASCを獲得し、細胞培養を行うことなくアテロコラーゲンスポンジに1個あたり1x10^6個播種し、同一個体の糖尿病マウスの背部皮膚欠損創に移植した。その結果、移植後7および14日ともに創傷の上皮化率(面積比)は実験群において有意に優っており、組織学的にも肉芽組織の厚さおよび毛細血管密度が有意差をもって増加していた。
以上よりASC含浸ハイブリッド型コラーゲンスポンジは難治性皮膚潰瘍に対し創傷治癒促進効果を有する可能性が示唆された。
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