鶏初期胚の無殻培養系を用いた食の安全性・機能性の新評価システムの開発

• 研究課題/領域番号: 16613002
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 食の安全
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 鈴木 文昭 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (90115410)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,900千円); 2005年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円); 2004年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: ニワトリ / 初期胚 / 食の安全 / 機能評価 / RT-PCR / レニン・アンジオテンシン / プロレニン受容体 / 血管新生 / レニン・アンジオテンシン系

研究概要

初年度に於いては、まず1)ニワトリ受精卵の無殻培養(シャーレ内)系の胚発生過程における胚、卵黄血管系、尿漿膜血管系、網細血管(血管新生)等を肉眼および実体顕微鏡を通した画像として経時的に記録し、上記測定対象の変化量を市販の解析ソフトを用いた画像処理で数量化するシステムを構築した。併せて、観察面のみを除去した有殻培養系での胚発生過程における上記パラメータの数量化システムも構築し、無殻培養系システムと比較した。
最終年度は、上記2つの培養系において、すでに確立した方法を用いて、血管系の肉眼方向からの投射面積の数量化を試みた。「肉眼レベル」および「実体顕微鏡レベル」において撮影した画像を市販の画像処理ソフトウエアで対象部分のみを切り出し、該当部分の面積は、面積既知部分を対照として市販の画像解析ソフトで求めた。その結果、胚上部側のみを無殻にした培養系システムが安定し胚発生が観察でき、より安定な血管系の観察を可能にすることが判明した。一方、食の安全性の評価として鋭敏な卵黄血管系におけるレニン・アンジオテンシン系(血管新生の引き金)の生化学的動態の測定法についても検討した。特に各パラメータのmRNAのRT-PCR法による定量法確立した。即ち、血管形成に関連する因子のmRMAの定量法を確立し、低濃度の血管新生阻害剤添加によってそれらmRNA濃度が低下することが確認でき、「食の安全性評価システム」としての高感度としての評価基盤が強化できた。

研究成果

• [雑誌論文] Roles of His9 (P2 subsite) and His13 (P3' subsite) in angiotensinogen for catalytic reaction of renin. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nabi AH, Uddin M Nasir, Nakagawa T, Orihashi T, Ebihara A, Iwasawa A, Nakamura Y, Suzuki F
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 16 ページ: 103-107
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Serum prorenin levels and diabetic retinopathy in type 2 diabetes : new method to measure serum level of prorenin using antibody activating direct kinetic assay. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokota H, Mori F, Kai K, Nagaoka T, Izumi N, Takahashi A, Hikichi T, Yoshida A, Suzuki F, Ishida Y
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 89 ページ: 871-873
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Angiotensin III as well as angiotensin II regulates water flow through aquaporins in a clam worms. (2005)
  • 著者名/発表者名: Satou R., Nakagawa, T., Ido H., Tomonatsu M., Suzuki F., Nakamura Y.
  • 雑誌名: BioSci. Biotechnol. Biochem. 69・7 ページ: 182-186
  • NAID: 130000030259
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Angiotensin II and III upregulate body fluid volume of the clam worm Perinereis Sp. via angiotensin II receptors in differnet manners (2005)
  • 著者名/発表者名: Satou R., Nakagawa T., Ido H., Tomomatsu M., Suzuki F., Nakamura Y.
  • 雑誌名: Peptide 26 ページ: 2452-2457
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Laughter Therapy Modulates the Parameters of Renin-Angiotensin System in Patients with type 2 Diabetes (2005)
  • 著者名/発表者名: Uddin M.Nasir, Iwanaga S., Urayama O., Hayashi K., Nabi A.H.M.Nurun, Hayashi H., Kawai K., Sultana A., Murakami K., Suzuki F.
  • 雑誌名: Int. J. Mol. Med. 16 ページ: 1077-1081
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Renin-angiotensin system in the vascular endothelial cells during early chick embryogenesis (2005)
  • 著者名/発表者名: Takakura A., Nakata T., Watanabe K., Kishi, Y., Suzuki F.
  • 雑誌名: 生化学 77・8 ページ: 1034-1034
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Roles of His9 (P2 subsite) and His13 (P3' subsite) in angiotensinogen for catalytic reaction of renin. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nabi AH, Uddin M Nasir, Nakagawa T, Orihashi T, Ebihara A, Iwasawa A, Nakamura Y, Suzuki F.
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 16 ページ: 103-107
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Serum prorenin levels and diabetic retinopathy in type 2 diabetes: new method to measure serum level of prorenin using antibody activating direct kinetic assay. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokota H, Mori F, Kai K, Nagaoka T, Izumi N, Takahashi A, Hikichi T, Yoshida A, Suzuki F, Ishida Y.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol. 69(7) ページ: 182-186
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Angiotensin III as well as angiotensin II regulates water flow through aquaporins in a clam worms. (2005)
  • 著者名/発表者名: Satou R., Nakagawa, T., Ido H., Tomonatsu M., Suzuki F., Nakamura Y.
  • 雑誌名: BioSci.Biotechnol.Biochem. 60(7) ページ: 182-186
  • NAID: 130000030259
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Angiotensin II and III upregulate body fluid volume of the clam worm Perinereis Sp. via angiotensin II receptors in differnet manners. (2005)
  • 著者名/発表者名: Satou R., Nakagawa T., Ido H., Tomomatsu M., Suzuki F., Nakamura Y.
  • 雑誌名: Peptide 26 ページ: 2452-2457
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Laughter Therapy Modulates the Parameters of Renin-Angiotensin System in Patients with type 2 Diabetes. (2005)
  • 著者名/発表者名: Uddin M.Nasir, Iwanaga S., Urayama O., Hayashi K., Nabi A.H.M.Nurun, Hayashi H., Kawai K., Sultana A., Murakami K., Suzuki F.
  • 雑誌名: Int.J.Mol.Med. 16 ページ: 1077-1081
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Renin-angiotensin system in the vascular endothelial cells during early chick embryogenesis (2005)
  • 著者名/発表者名: Takakura A., Nakata T., Watanabe K., Kishi, Y., Suzuki F.
  • 雑誌名: Seikagaku 77(8) ページ: 1034-1034
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Serum prorenin levels and diabetic retinopathy in type 2 diabetes : new method to measure serum level of prorenin using antibody activating direct kinetic assay. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokota H, Mori F, Kai K, Nagaoka T, Izumi N, Takahashi A, Hikichi T, Yoshida A, Suzuki F, Ishida Y.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 89 ページ: 871-873
• [雑誌論文] Angiotensin III as well as angiotensin II regulates water flow through aquaporins in a clam worms. (2005)
  • 著者名/発表者名: Satou R., Nakagawa, T., Ido H., Tomonatsu M., Suzuki F., Nakamura Y.
  • 雑誌名: BioSci.Biotechnol.Biochem. 69・7 ページ: 182-186
  • NAID: 130000030259
• [雑誌論文] Laughter Therapy Modulates the Parameters of Renin-Angiotensin System in Patients with type 2 Diabetes (2005)
  • 著者名/発表者名: Uddin M.Nasir, Iwanaga S., Urayama O., Hayashi K., Nabi A.H.M.Nurun, Hayashi H., Kawai K., Sultana A., Murakami K, Suzuki F.
  • 雑誌名: Int.J.Mol.Med. 16 ページ: 1077-1081
• [雑誌論文] Renin-angiotensin system in the vascular endothelial cells during early chick embryogenesis (2005)
  • 著者名/発表者名: Takakura A.Nakata T., Watanabe K., Kishi, Y., Suzuki F.
  • 雑誌名: 生化学 77・8 ページ: 1034-1034
• [雑誌論文] Sex difference and possible relationship to microvascular complications of serum prorenin levels in type 2 diabetic patients, measured by a novel antibody-activating direct enzyme kinetic assay. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kawazu S., Minagawa, S., Yazawa, M., Tsuchida, A., Ihara, C., Hosaka, D., Ohmura, E., Imai, Y., Suzuki, F., Tanaka, H., Ishida, Y.
  • 雑誌名: J Diabetes Complications 18・5 ページ: 275-281
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inhibition of diabetic nephropathy by a decoy peptide corresponding to the "handle" region for nonproteolytic activation of prorenin. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ichihara A., Hayashi, M., Kaneshiro, Y., Suzuki, F., Nakagawa, T., Tada, Y., Koura, Y., Nishimura, A., Okada, H., Uddin, M.N., AHM, N.Nabi, Ishida, Y., Inagami, T., Saruta, T
  • 雑誌名: J. Clin. Invest 114 ページ: 1128-1135
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Sex difference and possible relationship to microvascular complications of serum prorenin levels in type 2 diabetic patients, measured by a novel antibody-activating direct enzyme kinetic assay. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kawazu S., Minagawa, S., Yazawa, M., Tsuchida, A., Ihara, C., Hosaka, D., Ohmura, E., Imai, Y., Suzuki, F., Tanaka, H., Ishida, Y.
  • 雑誌名: J Diabetes Complcations 18(5) ページ: 275-281
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Inhibition of diabetic nephropathy by a decoy peptide corresponding to the "handle" region for nonproteolytic activation of prorenin. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ichihara A., Hayashi, M., Kaneshiro, Y., Suzuki, F., Nakagawa, T., Tada, Y., Koura, Y., Nishimura, A., Okada, H., Uddin, M.N., AHM, N.Nabi, Ishida, Y., Inagami, T., Saruta, T.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 114 ページ: 1128-1135
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Sex difference and possible relationship to microvascular complications of serum prorenin levels in type 2 diabetic patients, measured by a novel antibody-activating direct enzyme kinetic assay. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kawazu S, Minagawa S, Yazawa M, Tsuchida A, Ihara C, Hosaka D, Ohmura E, Imai Y. Suzuki F, Tanaka H, Ishida Y.
  • 雑誌名: J Diabetes Complications. 18・5 ページ: 275-281
• [雑誌論文] Inhibition of diabetic nephropathy by a decoy peptide corresponding to the "handle" region for nonproteolytic activation of prorenin (2004)
  • 著者名/発表者名: Ichihara A., Hayashi, M., Kaneshiro, Y., Suzuki, F., Nakagawa, T., Tada, Y., Koura, Y., Nishimura, A., et al.
  • 雑誌名: J.Clin.Invest. 114 ページ: 1128-1135
• [図書] Renin. in "Handbook of Proteolytic Enzymes, (2nd ed,)"vol 1,pp54-61(ed. Barrett, A.J. et al.) (2004)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, F., Murakami, K., Nakamura, Y., Inagami, K
  • 総ページ数: 1047
  • 出版者: Elsevier Academic Press