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リンパ管関連疾患攻略に向けたヒトリンパ管内皮細胞の網羅的スクリーニング

研究課題

研究課題/領域番号 16659342
研究種目

萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 外科学一般
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

森川 康英  慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90124958)

研究分担者 星野 健  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70190197)
尾池 雄一  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (90312321)
森定 徹  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70317923)
藤野 明浩  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50306726)
研究期間 (年度) 2004 – 2005
研究課題ステータス 完了 (2005年度)
配分額 *注記
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
2005年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2004年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
キーワードリンパ管腫 / リンパ管内皮細胞 / 不死化 / RLGS / HUVEC / epigenetic / 転写因子 / 培養 / FACS / Podolanin / D2-40 / Prox1
研究概要

【ヒトリンパ管腫由来リンパ管内皮細胞】
平成17年には平成16年に確立した4株のヒトリンパ管皮由来初代培養リンパ管内皮細胞を用いてさらに細胞のcharacterizationを進めた。対照としてHUVEC、HDMECを用い、種々のリンパ管内皮、血管内皮マーカーの発現を比較検討した。さらにCell proliferation ELIZA BrdU assay, matrigeltube formation assayにより細胞の特性を検討した。
【ヒトリンパ管内皮由来リンパ管内皮細胞不死化】
しかしながら初代培養の増殖能の限界があるため、現在HPVを用い細胞の不死化を試みている。
【リンパ管内皮細胞のRLGS法によるepigeneticな特性の検討】
平成17年までに、得られたリンパ管内皮細胞4株中純度の高い3株、HUVEC2株、ヒト胎盤(ゲノムメチル化程度が低い)よりRLGSプロフィールを作成した。
リンパ管内皮細胞、HUVECより異なるスポットを38箇所同定し、そのうち6箇所を選択し大量DNAを用いて作成した胎盤プロフィールより、スポットを抽出しスポット内のDNA断片のクローニングを行った。
3箇所についてシークエンスに成功し、DNA断片のゲノム上の位置を確認、近傍の遺伝子を列挙した。得られた断片のうち1つはすでに知られている転写因子であった。
今後、他のスポットのクローニングを進めると同時に、列挙した近傍遺伝子の発現の状態をmRNA、蛋白レベルで確認し、リンパ管内皮・血管内皮細胞の分化との関連を検討する予定である。

報告書

(2件)
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2006 2005

すべて 雑誌論文 (2件)

  • [雑誌論文] Distribution of lymphatic vessels in mouse thymus : immunofluorescence analysis2006

    • 著者名/発表者名
      Odaka C
    • 雑誌名

      Cell Tissue Res. Mar 16(電子版先行公開)

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] アンジオポエチン様因子(Angpt1)の生物学的作用2005

    • 著者名/発表者名
      尾池雄一
    • 雑誌名

      生化学 77巻11号

      ページ: 1412-1417

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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