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ヒト側頭骨病理標本からレーザーキャプチャー・ダイセクションによる難聴遺伝子の抽出

研究課題

研究課題/領域番号 16659462
研究種目

萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 耳鼻咽喉科学
研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

喜多村 健  東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (90010470)

研究分担者 古宇田 寛子  東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 助手 (80334423)
八島 隆敏  東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助手 (50372438)
研究期間 (年度) 2004 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2006年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2005年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
2004年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワード遺伝子 / ゲノム / 細胞・組織 / 神経科学 / 脳・神経 / バイオテクノロジー
研究概要

難聴の病態を解析するために、難聴発症の原因が明瞭である難聴遺伝子変異の定量解析と内耳組織病理の相関を検討した。本年度に対象とした症例は、非症候群性遺伝性難聴であるミトコンドリアDNA7511変異である。対象症例のセロイジン包埋側頭骨標本の切片上でレーザーを用いて、蝸牛有毛細胞、血管条、ラセン神経節細胞を数個ずつ採取した。採取した細胞からpure gene kitにてDNAを抽出しTaqMan PCRにて定量的PCRを施行した。当該遺伝子変異は、TaqMan PCRにて増幅可能なプライナー設計が不能と判明した。ミトコンドリアDNA3243変異であるMELAS症例の側頭骨病理においては、遺伝子変異の定量解析と病理変化の相関を既に報告している(Laryngoscope,2003)。本年度は、同じミトコンドリアDNA3243変異であるMELAS症例の側頭骨病理を新たに採取・DNAを抽出し、定量的PCRを施行して、遺伝子変異量と病理変化の相関を解析中である。
ヒト側頭骨を、病理解剖時に採取・凍結保存し、RNA later溶液中にて骨迷路を削り、蝸牛・前庭の膜迷路を採取して、RNAを抽出した。TaqMan probeを用いたりアルタイムPCR法により、COCH、SLC26A4、CDH23、ATP2B2のmRNAの定量を行った。ヒト側頭骨を前期高齢者(65歳以上75歳未満)と超高齢者(90歳以上)の2群に分類して、両者間のmRNAの差を解析中である。

報告書

(3件)
  • 2006 実績報告書
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (16件)

すべて 2007 2006 2005 2004 その他

すべて 雑誌論文 (16件)

  • [雑誌論文] Cross-coupling in a body-translating reaction : interaural optokinetic stimulation reflects a gravitational cue.2007

    • 著者名/発表者名
      Tsutsumi T
    • 雑誌名

      Acta Oto-Laryngologica 127

      ページ: 273-279

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Vlgrl is required for proper stereocilia maturation of cochlear hair cells.2007

    • 著者名/発表者名
      Yagi H
    • 雑誌名

      Genes Cells 12

      ページ: 235-250

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] SIX1 mutation associated with enlargement of the vestibular aqueduct in a patient with Branchio-Oto syndrome.2006

    • 著者名/発表者名
      Ito T
    • 雑誌名

      Laryngoscope 116

      ページ: 796-799

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Acute sensorineural hearing loss and vertigo in a young adult with congenital plasminogen disorder.2006

    • 著者名/発表者名
      Ishida T
    • 雑誌名

      Auris Nasus Larynx 33

      ページ: 187-190

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Multiple quantitative trait loci modify cochlear hair cell degeneration in the Beethoven (Tmcl^<Bth>)mouse model of progressive hearing loss DFNA36.2006

    • 著者名/発表者名
      Noguchi Y
    • 雑誌名

      Genetics 173

      ページ: 2111-2119

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] 総論 遺伝子解析の現状と展望.2006

    • 著者名/発表者名
      喜多村 健
    • 雑誌名

      JOHNS 22

      ページ: 1677-1680

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Detection of mitochondrial DNA from human inner ear using real-time polymerase chain reaction and laser microdissection.2005

    • 著者名/発表者名
      Kimura Y, Kouda H, Eishi Y, Kobayashi D Suzuki Y, Ishige I, Iino Y, Kitamura K
    • 雑誌名

      Acta Oto-laryngol 125

      ページ: 697-701

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] A mutation in Wolfram syndrome type 1 gene in a Japanese family with autosomal dominant low-frequency sensorineural hearing loss.2005

    • 著者名/発表者名
      Noguchi Y, Yashima T, Hatanaka A, Uzawa M, Yasunami M, Kimura A, Kitamura K
    • 雑誌名

      Acta Otolaryngol 125

      ページ: 1189-1194

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] A clinical, genetic, and neuropathologic study in a family with 16q-linked ADCA type III.2005

    • 著者名/発表者名
      Owada K, Ishikawa K, Toru S, Ishida G, Gomyoda M, Tao O, Noguchi Y, Kitamura K, Kondo I, Noguchi E, Arinami T, Mizusawa H
    • 雑誌名

      Neurology 65

      ページ: 629-632

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Detection of mitochondrial DNA from human inner ear using real-time polymerase chain reaction and laser microdissection.2005

    • 著者名/発表者名
      Kimura Y, Kouda H, Eishi Y, Kobayashi D, Suzuki Y, Ishige I, Iino Y, Kitamura K
    • 雑誌名

      Acta Otolaryngologica 125

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Six1 controls patterning of the mouse otic vesicle.2004

    • 著者名/発表者名
      Ozaki H, Nakamura K, et al.
    • 雑誌名

      Development 131

      ページ: 551-562

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] A clinical and genetic study in a large cohort of patients with spinocerebellar ataxia type 6.2004

    • 著者名/発表者名
      Takahashi H, Ishikawa K, Tsutsumi T, Fujigasaki H, et al.
    • 雑誌名

      J Hum Genet 49

      ページ: 256-264

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] A comparison of acute low-tone sensorineural hearing loss versus Meniere's disease in electrocochleography.2004

    • 著者名/発表者名
      Noguchi Y, Nishida H, Tokano H, Kawashima Y, Kitamura K
    • 雑誌名

      Ann Otol Rhinol Laryngol 113

      ページ: 194-199

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Audiovestibular findings in patients with mitochondrial A1555G mutation.2004

    • 著者名/発表者名
      Noguchi Y, Yashima T, Ito T, Sumi T, Tsuzuku T, Kitamura K
    • 雑誌名

      Laryngoscope 114

      ページ: 344-348

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] Molecular analysis of the temporal bone with laser capture microdissection (LCM) and TaqMan PCR.2004

    • 著者名/発表者名
      Koda H, Kimura Y, Takahashi K, Iino Y, Kitamura K
    • 雑誌名

      Association for Research in Otolaryngolgoy Abstract

      ページ: 145-146

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書
  • [雑誌論文] SIX1 mutation associated with enlargement of the vestibular aqueduct in a patient with Branchio-Oto syndrome.

    • 著者名/発表者名
      Ito T, Noguchi Y, Yashima T, Kitamura K
    • 雑誌名

      Laryngoscope (in press)

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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