転写因子MafAを指標に膵島β細胞の血糖感知システムの実体にせまる

• 研究課題/領域番号: 16689019
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 内分泌学
• 研究機関: 奈良先端科学技術大学院大学
• 研究代表者: 片岡 浩介 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 助教授 (20262074)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 17,940千円 (直接経費: 13,800千円、間接経費: 4,140千円); 2006年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円); 2005年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円); 2004年度: 6,240千円 (直接経費: 4,800千円、間接経費: 1,440千円)
• キーワード: 転写制御因子 / シグナル伝達 / 遺伝子発現制御 / 遺伝子発現

研究概要

膵島β細胞でのみ発現するインスリン遺伝子の転写はグルコース(血糖値)に応答して上昇するが、細胞がグルコースの濃度を感知するメカニズムはよくわかっていない。本研究課題では、膵島β細胞に特異的に発現する転写制御因子MafAの活性が、グルコース濃度によって変化するメカニズムを生化学的に解析することにより、膵島β細胞の血糖感知システムの実体が何であるのかをつきとめることを目的としている。
前年度までに、MafAタンパク質はβ細胞由来細胞株の核内で高度にリン酸化を受けており、これらのリン酸化は、細胞外液のグルコース濃度の変化に応じたMafAタンパク質の分解制御(タンパク質の安定性)に必須であることをあきらかにしてきた。さらに、MafAタンパク質はプロテアソーム系を介して分解を受けることをあきらかにした。本年度はまず、MafAタンパク質が、通常のプロテアソームによる分解に必要なユビキチン化をおそらく受けないことをあきらかにし、一般的ではない特殊なタンパク質分解経路を介して分解されることをあきらかにした。一方で、ユビキチン様のタンパク質SUMO(small ubiquitin-like modifier)によってβ細胞内のMafAの32番目のリジン残基(32Lys)が共有結合により修飾されていることを見いだした。32Lysの変異体を作製することによって、SUMO修飾によってMafAタンパク質のDNA結合能やタンパク質安定性はほとんど変化しないが、転写活性化能は抑制されることを見いだした。SUMO化修飾を受けない変異型MafAタンパク質は、インスリン遺伝子プロモーターの活性化能のみならず、他のMaf関連タンパク質の標的遺伝子の転写活性化能や、inviVOにおける内在性標的遺伝子(水晶体におけるδクリスタリン遺伝子など)の発現誘導能も亢進していることをあきらかにし、SUMO化によるMafAタンパク質活性調節のメカニズムを解明した。

研究成果

• [雑誌論文] MafA controls genes implicated in insulin biosynthesis and secretion. (2007)
  • 著者名/発表者名: Wang, H.
  • 雑誌名: Diabetologia 50 ページ: 348-358
• [雑誌論文] The VP2/VP3 minor capsid protein of SV40 promotes the in vitro assembly of the major capsid protein VP1 into particles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kawano, MA.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 281 ページ: 10164-10173
• [雑誌論文] Synergistic activation of the insulin gene promoter by the β-cell enriched transcription factors MafA, Beta2, and Pdx1. (2005)
  • 著者名/発表者名: Aramata, S.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Acta 1730 ページ: 41-46
• [雑誌論文] Selective ligand purification using high-performance affinity beads. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ohtsu, Y.
  • 雑誌名: Anal.Biochem. 338 ページ: 245-252
• [雑誌論文] Differentially expressed Maf family transcription factors, c-Maf and MafA, activate glucagon and insulin gene expression in pancreatic islet α- and β-cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kataoka, K.
  • 雑誌名: Journal of Molecular Endocrinology 32 ページ: 9-20
• [雑誌論文] Isolation and characterization of an alternatively spliced variant of transcription factor Islet-1. (2003)
  • 著者名/発表者名: Ando, K.
  • 雑誌名: Journal of Molecular Endocrinology 31 ページ: 419-425
• [雑誌論文] L-Maf regulates p27kip1 expression during chick lens fiber differentiation.
  • 著者名/発表者名: Reza, HM.
  • 雑誌名: Differentiation (in press)
• [雑誌論文] Multiple mechanisms and functions of Maf transcription factors in the regulation of tissue-specific genes.
  • 著者名/発表者名: Kataoka, K.
  • 雑誌名: J. Biochem. (in press)