損傷グリア特異的分泌蛋白PAPIIIの機能解析と受容体の同定

• 研究課題/領域番号: 16700326
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 神経化学・神経薬理学
• 研究機関: 旭川医科大学 (2005); 大阪市立大学 (2004)
• 研究代表者: 濤川 一彦 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (50312468)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,700千円 (直接経費: 3,700千円); 2005年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2004年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
• キーワード: 神経再生 / マクロファージ / ケモアトラクタント / Reg / PAP / アデノウィルス / 運動ニューロン / 遊走アッセイ / 神経損傷 / アデノウィルスベクター / siRNA

研究概要

中枢神経に再生能が欠如するのに対し、末梢神経は軸索損傷に対して抵抗性を持ち再生現象を示すが、その大きな原因として損傷周囲環境の違いが挙げられる。すなわち、中枢神経損傷部位周辺にはミエリン由来の再生阻害因子が豊富に存在し、神経再生が困難であるという事が明らかとされている。これに対して末梢神経損傷部位周辺では、損傷神経から放出される因子によって損傷部位にマクロファージ(Mφ)が遊走し、効率的に変性軸索やミエリンを貪食・除去した後、速やかに炎症が収まることによって神経再生が進行すると考えられている。また、Mφは様々な神経栄養因子を産生することにより、神経保護効果の側面を併せ持つ可能性も考えられる。我々は、末梢神経損傷応答性に発現誘導され、Mφの損傷部位へ遊走を促進させる因子として、Reg/PAPファミリーメンバーの1つPAPIIIを同定した。
まず我々は、PAPIIIが損傷末梢神経で発現誘導されることを明らかとした。PAPIIIの発現変動パターンを検討したところ、MCP-1やLIFといったMφの遊走因子と同様に軸索損傷後早期に誘導される。このことから、培養系でPAPIIIのMφに対する遊走活性を検討したところ、明らかな活性を示した。さらに、アデノウィルスベクターを用いてPAPIIIをラット損傷坐骨神経で過剰に発現させると、損傷部位へ遊走するMφ数の増大、さらに神経再生の促進が認められた。逆に、RNAiでPAPIIIをノックダウンしたラットでは、遊走Mφ数の減少、及び神経再生の遅延が認められた。以上のことから、損傷神経で誘導されるPAPIIIを起点としたMφの遊走が神経再生にとって重要なシグナルの1つであることを明らかとなった。
現在、アルカリフォスファターゼ-PAPIII融合タンパク質をプローブに用いマクロファージ発現ライブラリーをスクリーニングすることによって、PAPIII受容体を同定中である。

研究成果

• [雑誌論文] Annexin III implicated in the microglial response to motor nerve injury. (2006)
  • 著者名/発表者名: Konishi H, Namikawa K, Kiyama H
  • 雑誌名: Glia In press.
• [雑誌論文] Targeted gene therapy toward astrocytoma using a Cre/loxP-based adenovirus system. (2006)
  • 著者名/発表者名: Maeda M, Namikawa K, Kobayashi I, Ohba N, Takahara Y, Kadono C, Tanaka A, Kiyama H
  • 雑誌名: Brain Res In press.
• [雑誌論文] A newly modified SCG10 promoter and Cre/loxP-mediated gene amplification system achieve highly specific neuronal expression in animal brains. (2006)
  • 著者名/発表者名: Namikawa K, Murakami M, Okamoto T, Okato H, Kiyama H.
  • 雑誌名: Gene Therapy In press.
• [雑誌論文] Expression of Reg/PAP family members during motor nerve regeneration in rat. (2005)
  • 著者名/発表者名: Namikawa K, Fukushima M, Murakami K, Suzuki A, Takasawa S, Okamoto H, Kiyama H
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 332 ページ: 126-134
• [雑誌論文] Cell Type-Specific Intervention of Transforming Growth Factor beta/Smad Signaling Suppresses Collagen Gene Expression and Hepatic Fibrosis in Mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Inagaki Y, Kushida M, Higashi K, Itoh J, Higashiyama R, Hong YY, Kawada N, Namikawa K, Kiyama H, Bou-Gharios G, Watanabe T, Okazaki I, Ikeda K
  • 雑誌名: Gastroenterology 129(1) ページ: 259-268
• [雑誌論文] Vesicular acetylcholine transporter can be a morphological marker for the reinnervation to muscle of regenerating motor axons. (2004)
  • 著者名/発表者名: Maeda M, Ohba N, Nakagomi S, Suzuki Y, Kiryu-Seo S, Namikawa K, Kondoh W, Tanaka A, Kiyama H.
  • 雑誌名: Neurosci.Res. 48 ページ: 305-314
  • NAID: 10023898008
• [雑誌論文] Transient adenoviral gene transfer of Smad7 prevents injury-induced epithelial-mesenchymal transition of lens epithelium in mice. (2004)
  • 著者名/発表者名: Saika S, Ikeda K, Yamanaka O, Sato M, Muragaki Y, Ohnishi Y, Ooshima A, Nakajima Y, Namikawa K, Kiyama H, Flanders KC, Roberts AB.
  • 雑誌名: Lab Invest. 84(10) ページ: 1259-1270
• [雑誌論文] Differential regulation of the regulatory subunits for phosphatidylinositol 3- kinase in response to motor nerve injury. (2004)
  • 著者名/発表者名: Okamoto T, Namikawa K, Asano T, Takaoka K, Kiyama H.
  • 雑誌名: Mol Brain Res 131 ページ: 119-125