| 研究課題/領域番号 |
16780220
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
臨床獣医学
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
加納 塁 日本大学, 生物資源科学部, 講師 (00318388)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2005年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2004年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 犬 / 抗体療法 / クローニング / リンパ腫 / 白血病 / アミノ酸配列 / CD20 / 特異抗体 / イヌ / TLR / CpG-DNA / 遺伝子発現 / RT-PCR |
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| 研究概要 |
イヌのB細胞型リンパ球の抗体療法を検討するため、イヌのCD20抗原のクローニングを行い、正常リンパ球、B細胞型リンパ腫細胞、T細胞型リンパ腫細胞におけるCD20抗原の遺伝子発現についてRT-PCRにて解析を行った。
クローニングしたイヌのCD20遺伝子は1278bpで、297のアミノ酸残基をコードしていた。解析した遺伝子の塩基配列と、ヒト・マウスの遺伝子との相同性を確認した。Genbankに登録されているヒトCD20ゲノム(エキソン)との相同性が81.0%、マウスCD20mRNAとは71.8%と高い相同性を示したため、今回解析した遺伝子はイヌのCD20であると判断できた。
解析した遺伝子の塩基配列より、CD20のアミノ酸配列を同定した。同定したイヌのCD20アミノ酸配列は配列Fi.1に示した。
このアミノ酸配列とヒト・マウスの遺伝子との相同性を確認した。Genbankに登録されているヒトCD20のアミノ酸配列との相同性が72.8%、マウスでは68.2%と高い相同性を示したため、今回解析した遺伝子はイヌのCD20であると判断できた。
またヒトCD20膜外領域のアミノ酸配列とそれに相当すると考えられるイヌCD20のアミノ酸配列の相同性は66.6%であった。
イヌのリンパ系細胞における本遺伝子発現は、犬の正常リンパ球およびB細胞型リンパ腫細胞には認められたが、T細胞型リンパ腫細胞には発現が認められず、B細胞に特異的に発現していることが示唆された。このことから、抗CD20抗体を作成すれば、特異的にイヌのB細胞を認識すると考えられた。
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