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O-GlcNAc修飾プロテオームの迅速・効率的検出法の開発と機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 16790040
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 物理系薬学
研究機関国立医薬品食品衛生研究所

研究代表者

原園 景  国立医薬品食品衛生研究所, 生物薬品部, 主任研究員 (20280753)

研究期間 (年度) 2004 – 2006
研究課題ステータス 完了 (2006年度)
配分額 *注記
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2005年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2004年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
キーワード0-GlcNAc / Glycopeptide / LC / MS / ESI / O-GlcNAc
研究概要

セリン/スレオニン残基の0-N-アセチルグルコサミン(0-GlcNAc)修飾は、タンパク質の機能調節に関わる翻訳後修飾として近年注目を集めている。0-GlcNAc修飾されるアミノ酸残基は、リン酸化を受けるセリン/スレオニン残基と同じもしくはその近傍にあることから、0-GlcNAc化はそれ自身がタンパク質の機能を調節するとともに、リン酸化を抑制することで複雑にタンパク室の機能を調整していると考えられている。
0-GlcNAcが結合したペプチドを、GlcNAcと親和性のあるレクチンWGAにより濃縮しLC/MSにて検出した。MS/MSスペクトルにGlcNAc由来のm/z204のフラグメントイオンが強く検出され、MSデータをアミノ酸修飾としてGlcNAcを設定しデータベース検索することよりペプチドを同定することが出来た。しかしながら、質量分析装置を汚すのか、感度の低下が起きたりした。そこでより良い試料調製法を検討するとともに、高感度化および差異解析を行うため修飾等を検討中である

報告書

(3件)
  • 2006 実績報告書
  • 2005 実績報告書
  • 2004 実績報告書
  • 研究成果

    (4件)

すべて 2006 その他

すべて 雑誌論文 (4件)

  • [雑誌論文] N-linked oligosaccharide analysis of rat brain Thy-1 by liquid chromatography with graphitized carbon column/ion trap-Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry in positive and negative ion modes.2006

    • 著者名/発表者名
      Itoh S, Kawasaki N, Hashii N, Harazono, A Matsuishi Y, Hayakawa T, Kawanishi T
    • 雑誌名

      J Chromatogr A. 27

      ページ: 296-306

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Site-specific N-glycosylation analysis of human plasma ceruloplasmin using liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry.2006

    • 著者名/発表者名
      Harazono A, Kawasaki N, Itoh S, Hashii N, Ishii-Watabe A, Kawanishi T, Hayakawa T
    • 雑誌名

      Anal Biochem. 348

      ページ: 259-268

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Site-specific N-glycosylation analysis of human plasma ceruloplasmin using liquid chromatography with electrospray ionization tandem mass spectrometry.2006

    • 著者名/発表者名
      Harazono A, Kawasaki N, Itoh S, Hashii N, Ishii-Watabe A, Kawanishi T, Hayakawa T.
    • 雑誌名

      Analitical Biochemistry 348

      ページ: 259-268

    • 関連する報告書
      2005 実績報告書
  • [雑誌論文] Site-specific glycosylation analysis of human apolipoprotein B100 using high-perormance liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry.

    • 著者名/発表者名
      A.Harazono, N.Kawasaki, T.Kawanishi, T.Hayakawa
    • 雑誌名

      Glycobiology (in press)

    • 関連する報告書
      2004 実績報告書

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公開日: 2004-04-01   更新日: 2016-04-21  

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