| 研究課題/領域番号 |
16790393
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
消化器内科学
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
北村 直人 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30306691)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
2006年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2005年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2004年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | BAMBI / follistatin / 肝臓 / 線維化 / activin / fibrosis / hepatocyt / apoptosis / 肝線維化 |
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| 研究概要 |
我々はDimetylnitrosamine(DMN)による肝障害ラットにおいて、follistatinの静脈投与の繰り返しにより線維化の抑制に成功した。その機序の解明にあたり、follistatinにより、肝細胞のアポトーシスが抑制されていることを証明した。線維化におけるTGF-β・activinのシグナル伝達を解析するため、DMNによる急性肝障害ラットより肝細胞・伊東細胞・クッパー細胞を分離し、それぞれからのTGF-β・activinの発現の変化を調べた。また、肝細胞・伊東細胞を分離培養し、activin・TGF-beta fbllistatinを添加培養し、細胞の活性化とactivin・TGF-betaの発現を解析した。これらから、肝臓の線維化では肝細胞から分泌されるactivinが重要な役割を果たしているという結果を得て、これらの研究成果を国際肝臓学会議にて報告した。Follistatinを安定して、かつ安価に供給するため、ヒトfbllistatinのprimerを設計し、RACE(rapid amplification of cDNA ends)法の原理を用いて、760kDの全長に近いPCR産物を得ている。完全長cDNAが得られれば、発現プラスミドを構築する予定である。また、50kD程度の小さな蛋白であるBAMBI(BMP and ctivin membrane-bind inhibitor)もactivinシグナルを抑制することから、follistatin同様に肝の線維化の抑制が可能と推測した。BAMBIのprimerを設計し、そのPCR産物をTAクローニング法によりサブクローニングした。現在、得られた蛋白について、activinおよびsmad2,3を用いて免疫沈降法により、合成物とactivinとの結合能の評価を予定している。
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