HBs抗原粒子をベクターとしたヒト肝細胞に対する遺伝子治療の開発

• 研究課題/領域番号: 16790785
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 東京歯科大学 (2005); 慶應義塾大学 (2004)
• 研究代表者: 宮田 量平 東京歯科大学, 歯学部, 助手 (20327571)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円); 2005年度: 900千円 (直接経費: 900千円); 2004年度: 2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
• キーワード: L粒子 / HBs抗原粒子 / HGF

研究概要

ヒト肝細胞癌に対して特異的に抗腫瘍効果を持つことのin vitroでの確認
正常ヒト肝細胞株と肝細胞癌株(HepG2,HepC3A,NuE)にHGF封入HBs抗原粒子を導入し,HGF,EGFP,FLAGの発現をELISA, Western blot,蛍光顕微鏡を用いて解析する.
対照として大腸癌株(WiDr,HT29)を使用しHGF封入HBs抗原粒子を導入し,HGFの活性部位の発現をELISA, Western blot等で解析する
HGFの抗腫瘍効果-肝再生の判定はMTT assayで行う.
HepC3Aでは抗腫瘍効果を認めたが対照の大腸癌株(WiDr)では抗腫瘍効果を認めなかった.
ヒト肝細胞癌に対して特異的に抗腫瘍効果を持つことのin vivoでの確認
肝細胞癌株(HepG2,HepC3A,NuE),大腸癌株(WiDr,HT29)をそれぞれマウスの皮下に移植し担癌マウスを作製.対照として正常ヒト肝組織移植ヌードマウスを作製.
HGFを封入したL粒子をマウスの尾静脈から静注し,経時的に腫瘍径を測定やHE染色で細胞形態やApoptotic Indexを検討し抗腫瘍効果を判定する.
肝再生はBrdU Labelling IndexやCell Growth Assay, propidium iodineを用いたCell Cycle Analysisなどを用いて判定する.HGF封入L粒子は肝細胞癌株(HepG2)で腫瘍径の縮小を認めたが,対照の大腸癌株(WiDr)では抗腫瘍効果を認めなかった.