悪性腫瘍細胞のアポトーシスと核内蛋白の動向からみた病態の解明

• 研究課題/領域番号: 16791145
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 病態科学系歯学・歯科放射線学
• 研究機関: 九州歯科大学
• 研究代表者: 鬼頭 慎司 九州歯科大学, 歯学部, 助手 (80347682)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2006
• 研究課題ステータス: 完了 (2006年度)
• 配分額: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円); 2006年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2005年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2004年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
• キーワード: 悪性腫瘍細胞 / アポトーシス / nucleolin / UV照射 / AgNORs / 核内蛋白 / 抗癌剤 / オカダ酸 / ニュークレオリン / ニュークレオフォスミン

研究概要

核内蛋白の動向からみた口腔顎顔面領域の悪性腫瘍細胞におけるアポトーシスの誘導経路について検討を重ねてきている。
CDDP、MMC、PXRといった頭頚部領域で用いられる各種抗癌剤、オカダ酸などの蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤、さらにはUV照射が口腔癌を中心とした悪性腫瘍細胞にアポトーシスを誘導することをDRAラダーフォーメーションとHoechst33342を用いた染色により示した。
アポトーシスの誘導に伴い正常細胞では核小体相当部位で強力にドット状に反応するAgNORsは分解され、その局在を変えた結果、核小体相当部位での強力な反応は消失した。さらにはNORs構成蛋白の)一つであるニュークレオリンは免疫蛍光抗体染色によりAgNORsと同様な変化を示した。ニュークレオフォスミンについても同様の細胞内局在の変化を示した。鍍銀染色を用いたウエスタンブロッティング変法、抗ニュークレオリン抗体を用いたウエスタンプロッティングでは110kDaの蛋白がアポトーシス誘導に伴い95kDaと80kDaの蛋白に今解された。これはウエスタンブロラティング変法と抗ニュークレオリン抗体を用いたウエスタンプロッティングにおける分解が完全に一致することから、ニュークレオリンの動向がアポトーシスの指標となりうるものであり、悪性腫瘍の予後判定につながるという面においても非常に意義のある結果となっている。ニュークレオリンの変化が遺伝子レベルで調節されているかどうかを調べる為、半定量PCR法によって調べたが、アポトーシス誘導に伴い、明らかなmRNAレベルの変化は認められなかった。この変化は翻訳後レベルで行われていると考えられる。現在、RNAiを用いた実験系を構築中であり、各種細胞における至適トランスフェクション条件が判明してきている。ニュークレオリンとの関連蛋白を中心に、核内蛋白のアポトーシス実行機構との関わりについてさらに検討中である。

研究成果

• [雑誌論文] Correlation between the incidence of central nodal necrosis in cervical lymph node metastasis and the extent of differentiation in oral squamous cell carcinoma. (2006)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y, Kurokawa H, Tanaka T, Yamashita Y, Kito S, Okabe S, Takahashi T, Ohba T
  • 雑誌名: Dentomaxillofac Radiol 35 ページ: 18-23
• [雑誌論文] Utility of diffusion-weighted images using fast asymmetric spin-echo sequences for detection of abscess formation in the head and neck region. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kito S, Morimoto Y, Tanaka T, Tominaga K, Habu M, Kurokawa H, Yamashita Y, Matsumoto S, Shinohara Y, Okabe S, Matsufuji Y, Takahashi T, Fukuda J, Ohba T
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 101 ページ: 233-240
• [雑誌論文] Can the presence of carotid artery calcification on panoramic radiographs predict the risk of vascular diseases among 80-year-olds? (2006)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Morimoto Y, Ansai T, Okabe S, Yamada K, Taguchi A, Awano S, Kito S, Takata Y, Takehara T, Ohba T
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 101 ページ: 777-783
  • NAID: 130007022060
• [雑誌論文] Clinical significance and variation of the advanced calcified stylohyoid complex detected by panoramic radiographs among 80-year-old subjects. (2006)
  • 著者名/発表者名: Okabe S, Morimoto Y Ansai T, Yamada K, Tanaka T, Awano S, Kito S, Takata Y, Takehara T, Ohba T
  • 雑誌名: Dentomaxillofac Radiol 35 ページ: 191-199
  • NAID: 120006735365
• [雑誌論文] Dynamic MR sialography as a new diagnostic technique for patients with Sjogren syndrome. (2006)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y, Habu M, Tomoyose T, Ono K, Tanaka T, Yoshioka I, Tominaga K, Yamashita Y, Ansai T, Kito S, Okabe S, Takahashi T, Takehara T, Fukuda J, Inenaga K, Ohba T
  • 雑誌名: Oral Dis 12 ページ: 408-414
• [雑誌論文] Utility of diffusion-weighted images using fast asymmetric spin-echo sequences for detection of abscess formation in the head and neck resion. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kito S.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 101 ページ: 231-238
• [雑誌論文] Correlation between the incidence of central nodal necrosis in cervical lymph node metastasis and the extent of differentiation in oral squamous cell carcinoma. (2006)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y.
  • 雑誌名: Dentomaxillofacial Radiology 35 ページ: 18-23
• [雑誌論文] Three-dimensional identification of hemangiomas and feeding arteries in head and neck resion using combined phase-contrast MR angiography and fast asymmetric spin-echo sequences. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 100 ページ: 609-613
• [雑誌論文] The functional evaluation of salivary glands using dynamic MR sialography following citric acid stimulation : a pleliminary study. (2005)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 100 ページ: 357-364
• [雑誌論文] Cleavage of nucleolin and AgNOR proteins during apoptosis induced by anti-cancer drugs in human salivary gland cells. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kitob S.
  • 雑誌名: Journal of Oral Pathology & Medicine 34 ページ: 478-485
• [雑誌論文] Utility of magnetic resonance cisternography using three-dimensional fast asymmetric spin- echo sequences with multiplanar reconstruction : the evaluation of sites of neurovascular compression of the trigeminal nerve. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T.
  • 雑誌名: Oral Surg.Oral Med.Oral Pathol.Oral Radiol.Endod. 100 ページ: 215-225
• [雑誌論文] Instability of background fat intensity suppression using fat-saturated (FS) MR imaging techniques according to region and reconstruction procedure in patients with oral cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Oncology 40 ページ: 332-340
• [雑誌論文] Inflammatory paradental cyst (IPC) in the mandibular premolar region in children (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 97 ページ: 286-293
• [雑誌論文] Significance of frequency-selective fat saturation T2-weighted MR images for the detection of bone marrow edema in the mandibular condyle (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: J Craniomandibular Practice 22 ページ: 115-123
• [雑誌論文] Clinical application of MR sialographic 3D-reconstruction imaging and MR virtual endoscopy for salivary gland duct analysis (2004)
  • 著者名/発表者名: Morimoto Y. et al.
  • 雑誌名: J Oral Maxillofacial Surgery 62 ページ: 1236-1244