研究課題/領域番号 |
16H03291
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研究種目 |
基盤研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
ケミカルバイオロジー
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研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
間 久直 大阪大学, 工学研究科, 准教授 (70437375)
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研究協力者 |
岩出 彩花
井口 泰成
橋谷 帆稀
木村 公一
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研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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配分額 *注記 |
19,110千円 (直接経費: 14,700千円、間接経費: 4,410千円)
2018年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2017年度: 6,890千円 (直接経費: 5,300千円、間接経費: 1,590千円)
2016年度: 8,060千円 (直接経費: 6,200千円、間接経費: 1,860千円)
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キーワード | 膜タンパク質 / 赤外線レーザー / レーザーイオン化質量分析 / 液体クロマトグラフィー / 生体分子計測 |
研究成果の概要 |
液体クロマトグラフィー(liquid chromatography; LC)と質量分析(mass spectrometry; MS)を組み合わせたLC/MSによる膜タンパク質の高速な分析の実現を目指し、赤外線レーザーイオン化技術を開発した。赤外線レーザーイオン化を用いて10種のペプチド混合試料のLC/MSに成功した。イオン源を大気圧の約70%に減圧することで信号強度が約1.8倍に向上した。赤外線レーザーで脱離した試料にエレクトロスプレーで電荷を付与すると、信号強度を1桁以上高められ、LC/MSで一般的に用いられるエレクトロスプレーイオン化よりも界面活性剤等の添加物に耐性が高いことが示された。
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研究成果の学術的意義や社会的意義 |
生体内分子の分析で広く用いられている現状のLC/MSでは、水に対して難溶性である膜タンパク質の分析が極めて困難である。この主要因として膜タンパク質の可溶化に用いられる界面活性剤や尿素などの変性剤によるLC後のイオン化の妨害が挙げられる。本研究課題で開発した赤外線レーザーを用いた新規イオン化技術を用いると、LCの溶出液から膜タンパク質を直接イオン化させることも可能であると考えられ、LCとMSをオンラインで接続したLC/MSによる膜タンパク質の高速な分析の実現によって、プロテオミクスや新規医薬品開発におけるブレークスルーが期待できる。
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