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Ctf18-RFC/Polε複合体による新生DNAでのPCNAの協調的配置機構

研究課題

研究課題/領域番号 16H04743
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 分子生物学
研究機関九州大学

研究代表者

釣本 敏樹  九州大学, 理学研究院, 教授 (30163885)

研究分担者 大橋 英治  九州大学, 理学研究院, 助教 (90378951)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
17,550千円 (直接経費: 13,500千円、間接経費: 4,050千円)
2018年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2017年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2016年度: 7,410千円 (直接経費: 5,700千円、間接経費: 1,710千円)
キーワードDNA複製 / 複製フォーク / DNAポリメラーゼ / PCNA / DNAポリメラ―ゼ
研究成果の概要

ヒト染色体複製時のリーディング鎖でのPCNA装着機構を明らかにするために、精製した第2のPCNA装着因子Ctf18-RFCとリーディング鎖DNAポリメラーゼPolεを使ってPCNA 装着とDNA合成様式の関係を解析した。その結果、この複合体は (Polε-PCNAによる安定な合成→合成の停止とPCNAの解離→Ctf18-RFCによるPCNAの装着→Polε-PCNA-Ctf18-RFCによるDNA合成の再開)というサイクルを持ち、この機構によって安定で長いリーディング鎖合成を行うことを示した。さらにこの結果からリーディング鎖DNAでもPCNAを能動的に装着する機構があることを明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

真核生物染色体複製のDNA伸長の従来のモデルでは明らかになっていなかったリーディング鎖側への複製クランプPCNAの装着機構について、第2のPCNA装着因子Ctf18-RFCが能動的に機能することを明らかにした。さらにこの因子とリーディング鎖合成DNAポリメラーゼPolεが複合体を形成し、常時DNA合成状況をモニターして、合成が停止するたびに速やかにPCNAを装着するしくみがあることを新たに示した。以上は安定な染色体複製を行うためのより実態に近い機構を明らかにしたものと考える。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 研究成果

    (32件)

すべて 2019 2018 2017 2016 その他

すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (11件) (うち国際共著 4件、 査読あり 11件、 オープンアクセス 10件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (14件) (うち国際学会 6件、 招待講演 9件) 図書 (3件) 備考 (2件)

  • [国際共同研究] Jagiellonian University(Poland)

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [国際共同研究] Medical Research Council(英国)

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [雑誌論文] Differential genomic destabilisation in human cells with pathogenic MSH2 mutations introduced by genome editing2019

    • 著者名/発表者名
      Genki Hayashida, Seijiro Shioi, Kyoko Hidaka, Ryosuke Fujikane, Masumi Hidaka, Toshiki Tsurimoto, Teruhisa Tsuzuki, Shinya Oda, Yoshimichi Nakatsu
    • 雑誌名

      Exp Cell Res

      巻: 377 号: 1-2 ページ: 24-35

    • DOI

      10.1016/j.yexcr.2019.02.020

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Inhibition of DNA replication by an anti-PCNA aptamer/PCNA complex2018

    • 著者名/発表者名
      Kowalska E, Bartnicki F, Fujisawa R, Bonarek P, Hermanowicz P, Tsurimoto T, Muszy´nska K, Strzalka W.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res

      巻: 46 号: 1 ページ: 25-41

    • DOI

      10.1093/nar/gkx1184

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] The dominant role of proofreading exonuclease activity of replicative polymerase ε in cellular tolerance to cytarabine (Ara-C).2017

    • 著者名/発表者名
      Tsuda M, Terada K, Ooka M, Kobayashi K, Sasanuma H, Fujisawa R, Tsurimoto T, Yamamoto J, Iwai S, Kadoda K, Akagawa R, Huang SN, Pommier Y, Sale JE, Takeda S, Hirota K.
    • 雑誌名

      Oncotarget

      巻: in press 号: 20 ページ: 33457-33474

    • DOI

      10.18632/oncotarget.16508

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書 2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Human CTF18-RFC clamp-loader complexed with non-synthesising DNA polymerase ε efficiently loads the PCNA sliding clamp.2017

    • 著者名/発表者名
      Fujisawa R, Ohashi E, Hirota K, Tsurimoto T
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res.

      巻: 印刷中 号: 8 ページ: 4550-4563

    • DOI

      10.1093/nar/gkx096

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書 2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Functions of Multiple Clamp and Clamp-Loader Complexes in Eukaryotic DNA Replication2017

    • 著者名/発表者名
      Ohashi Eiji、Tsurimoto Toshiki
    • 雑誌名

      Adv Exp Med and Biol

      巻: 1042 ページ: 135-162

    • DOI

      10.1007/978-981-10-6955-0_7

    • ISBN
      9789811069543, 9789811069550
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Multiple regulatory roles of Rad9 C-tail in DNA damage responses2017

    • 著者名/発表者名
      Ohashi E
    • 雑誌名

      J Rare Dis Res Treat

      巻: 2 ページ: 12-21

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] MutSα maintains the mismatch repair capability by inhibiting PCNA unloading2016

    • 著者名/発表者名
      Kawasoe, Y., Tsurimoto, T., Nakagawa, T., Masukata, H., Takahashi, TS.
    • 雑誌名

      eLIFE

      巻: 12;5

    • DOI

      10.7554/elife.15155

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Claspin recruits Cdc7 kinase for initiation of DNA replication in human cells.2016

    • 著者名/発表者名
      Yang CC, Suzuki M, Yamakawa S, Uno S, Ishii A, Yamazaki S, Fukatsu R, Fujisawa R, Sakimura K, Tsurimoto T, Masai H.
    • 雑誌名

      Nat Commun.

      巻: 7 号: 1 ページ: 12135-12135

    • DOI

      10.1038/ncomms12135

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] In vivo evidence for translesion synthesis by the replicative DNA polymerase δ.2016

    • 著者名/発表者名
      Hirota K, Tsuda M, Mohiuddin, Tsurimoto T, Cohen IS, Livneh Z, Kobayashi K, Narita T, Nishihara K, Murai J, Iwai S, Guilbaud G, Sale JE, Takeda S.
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Res

      巻: 44(15) ページ: 7242-50

    • DOI

      10.1093/nar/gkw439

    • NAID

      120006338056

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Conserved interaction of Ctf18-RFC with DNA polymerase ε is critical for maintenance of genome stability in saccharomyces cerevisiae.2016

    • 著者名/発表者名
      Okimoto H, Tanaka S, Araki H, Ohashi E, Tsurimoto T.
    • 雑誌名

      Genes Cells.

      巻: in press 号: 5 ページ: 482-491

    • DOI

      10.1111/gtc.12356

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Rapid purification and characterization of mutant origin recognition complexes in Saccharomyces cerevisiae2016

    • 著者名/発表者名
      Kawakami, H. (corresponding author), Ohashi, E., Tsurimoto, T., and Katayama, T.
    • 雑誌名

      Front. Microbiol.

      巻: 7 ページ: 521-521

    • DOI

      10.3389/fmicb.2016.00521

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Roles of PCNA and clamp loaders for leading and lagging DNA synthesis2018

    • 著者名/発表者名
      Toshiki Tsurimoto
    • 学会等名
      OKAZAKI Fragment Memorial Symposium: Celebrating the 50th anniversary of the discontinuous DNA replication model
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Rad9 C-terminal tail intramolecularly binds to the Rad9-Hus1-Rad1 checkpoint clamp and regulates the binding of DNA damage response proteins2018

    • 著者名/発表者名
      Eiji Ohashi, Naoya Iwata, Kensuke Tatsukawa, Toshiki Tsurimoto
    • 学会等名
      3R & 3C Symposium
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 複製染色体でのPCNAの動態制御2018

    • 著者名/発表者名
      釣本敏樹 藤澤 遼 河添好孝 大橋英治 高橋達郎
    • 学会等名
      第12回エピジェネティクス研究会年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Rad9 C末端による9-1-1クランプへの蛋白質結合の制御2017

    • 著者名/発表者名
      大橋 英治、岩田 直也、釣本 敏樹
    • 学会等名
      第34回染色体ワークショップ・第15回核ダイナミクス研究会合同
    • 発表場所
      木更津市
    • 年月日
      2017-01-11
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Intramolecular binding of Rad9 C-terminal tail to Rad9-Hus1-Rad1 core ring structure regulates the binding of DNA damage response proteins.2017

    • 著者名/発表者名
      Eiji Ohashi, Naoya Iwata, Kensuke Tatsukawa, Toshiki Tsurimoto
    • 学会等名
      Cold Spring Harbor Laboratory Meeting “Eukaryotic DNA Replication & Genome Maintenance”
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] CTF18-RFC complexed with DNA polymerase ε actively loads PCNA to maintain the efficient DNA synthesis2017

    • 著者名/発表者名
      Tsurimoto T, Fujisawa R, Ohashi E
    • 学会等名
      Cold Spring Harbor Laboratory Meeting “Eukaryotic DNA Replication & Genome Maintenance”
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] DNA複製とPCNAダイナミクス2017

    • 著者名/発表者名
      釣本 敏樹 藤澤 遼 大橋英治 高橋達郎
    • 学会等名
      Consortium of Biological Sciences 2017 (第40回日本分子生物学会年会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Rad9-Hus1-Rad1クランプのRad9 C-tailを介したDNA複製ストレス応答の制御機構2017

    • 著者名/発表者名
      大橋英治、岩田直也、達川絢介、釣本敏樹
    • 学会等名
      Consortium of Biological Sciences 2017 (第40回日本分子生物学会年会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] チェックポイントクランプ9-1-1におけるPCNA様リング構造とRad9 C-tail間の分子内結合領域の解析2017

    • 著者名/発表者名
      達川 絢介、岩田 直也、大橋 英治、釣本 敏樹
    • 学会等名
      Consortium of Biological Sciences 2017 (第40回日本分子生物学会年会)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 9-1-1チェックポイントクランプの分子内結合によるp21と9-1-1の結合制御2017

    • 著者名/発表者名
      大橋英治、岩田直也、達川絢介、釣本敏樹
    • 学会等名
      第24回 DNA複製・組換え・修復ワークショップ
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] PCNA結合蛋白質のRad9-Hus1-Rad1リングとの結合メカニズム2016

    • 著者名/発表者名
      大橋英治、岩田直也、釣本敏樹
    • 学会等名
      第39回日本分子生物学会年会シンポジウム
    • 発表場所
      横浜市
    • 年月日
      2016-12-02
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Polεを足場にしたCtf18-RFCによる動的PCNAローディング2016

    • 著者名/発表者名
      釣本 敏樹 藤澤 遼 大橋英治
    • 学会等名
      第39回日本分子生物学会年会シンポジウム
    • 発表場所
      横浜市
    • 年月日
      2016-11-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Ctf18-RFC bound to Polε loads PCNA efficiently.2016

    • 著者名/発表者名
      Fujisawa R, Ohashi E, Hirota K, Tsurimoto T
    • 学会等名
      The 10th 3R Symposium
    • 発表場所
      Matsue, Japan
    • 年月日
      2016-11-13
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Intramolecular folding of Rad9 C-terminal tail in the Rad9-Hus1-Rad1 checkpoint clamp regulates its interaction with DNA damage response proteins.2016

    • 著者名/発表者名
      Ohashi E, Iwata N, Tsurimoto T
    • 学会等名
      The 10th 3R Symposium
    • 発表場所
      Matsue, Japan
    • 年月日
      2016-11-13
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [図書] 原核生物ゲノムと真核生物の細胞小器官ゲノム ゲノム4日本語版 第8章 監訳 石川冬木 原著 Genomes 4th edition BrownTA2018

    • 著者名/発表者名
      釣本敏樹
    • 総ページ数
      28
    • 出版者
      メディカルサイエンスインターナショナル
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [図書] Functions of multiple clamp and clamp-loader complexes in eukaryotic DNA replication in "DNA Replication: From Old Principles to New Discovery” Advances in Experimental Medicine and Biology,2017

    • 著者名/発表者名
      Ohashi E and Tsurimoto T.
    • 出版者
      Springer
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [図書] 分子遺伝学 「遺伝学(遺伝子から見た生物)鷲谷いずみ、桂勳 編」2017

    • 著者名/発表者名
      釣本敏樹
    • 総ページ数
      32
    • 出版者
      培風館
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [備考] 染色体機能学研究室複製グループ

    • URL

      http://seibutsu.biology.kyushu-u.ac.jp/~chromosome/

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [備考] 染色体機能学研究室複製グル―プ

    • URL

      http://seibutsu.biology.kyushu-u.ac.jp/~chromosome/

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書

URL: 

公開日: 2016-04-21   更新日: 2022-06-10  

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