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超高速・超解像1蛍光分子局在顕微鏡法による、接着斑の動的群島機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 16H04775
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 生物物理学
研究機関京都大学

研究代表者

藤原 敬宏  京都大学, 高等研究院, 特定准教授 (80423060)

研究協力者 楠見 明弘  
角山 貴昭  
白居 祐希  
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
15,340千円 (直接経費: 11,800千円、間接経費: 3,540千円)
2018年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2017年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2016年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
キーワード接着斑 / アクチン骨格 / 拡散運動 / 1分子計測 / 超解像 / 1分子計測
研究成果の概要

接着斑は、幹細胞の分化やガン細胞の浸潤にともなう細胞運動において、細胞の力発生の足場という極めて重要な役割を担うミクロンサイズの細胞膜機能ドメインである。我々の開発した超高速1蛍光分子追跡技術と、それを応用したPALM超解像観察を組み合わせ、「接着斑動的群島機構」、すなわち、(1) 接着斑は、アクチン膜骨格の網目を足場として、拡散で構成分子が動的に交換する100ナノメートル程度の島を単位とし、それらが多数集まることで形成されている、(2) 構成分子は、群島の隙間の網目を飛び移る拡散運動で出入りをおこなっている、ことを示した。この機構が接着斑全体の効率的な形成と分解を可能にしていると考えられる。

研究成果の学術的意義や社会的意義

(1) 我々が開発してきた超高速1蛍光分子追跡/PALM超解像技術は、コマーシャルの高感度カメラを利用した技術と比較して10倍以上高速であり、刻々と状態が変化する生細胞観察において、今後、さらに重要性が高まると期待される。
(2) 本研究で注目した接着斑の他にも、ポドソーム、タイトジャンクション、アドヒーレンスジャンクション、シナプスなど、様々な細胞機能の制御を担う接着構造が存在する。本研究で得た「動的群島機構」の概念は、細胞接着の制御という基本的で極めて重要な課題に、「サブミリ秒-数分の時間スケール/1分子-ミクロンサイズの空間スケールにわたる」、「動的な」知見をもたらすものである。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2019 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 3件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 6件、 招待講演 5件)

  • [雑誌論文] Super-long single-molecule tracking reveals dynamic-anchorage-induced integrin function.2018

    • 著者名/発表者名
      Takaaki A. Tsunoyama, Yusuke Watanabe, Junri Goto, Kazuma Naito, Rinshi S. Kasai, Kenichi G. N. Suzuki, Takahiro K. Fujiwara, Akihiro Kusumi.
    • 雑誌名

      Nature Chemical Biology

      巻: 14 号: 5 ページ: 497-506

    • DOI

      10.1038/s41589-018-0032-5

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dynamic Contact Guidance of Myoblasts by Feature Size and Reversible Switching of Substrate Topography: Orchestration of Cell Shape, Orientation, and Nematic Ordering of Actin Cytoskeletons.2018

    • 著者名/発表者名
      Linke, P.; Suzuki, R.; Yamamoto, A.; Nakahata, M.; Kengaku, M.; Fujiwara, T.; Ohzono, T.* & Tanaka, M.*
    • 雑誌名

      Langmuir

      巻: special issue 号: 23 ページ: 7538-7551

    • DOI

      10.1021/acs.langmuir.8b02972

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Dynamic Meso-Scale Anchorage of GPI-Anchored Receptors in the Plasma Membrane: Prion Protein vs. Thy12017

    • 著者名/発表者名
      Nemoto YL, Morris, RJ, Hijikata H, Tsunoyama TA, Shibata ACE, Kasai RS, Kusumi A, Fujiwara TK
    • 雑誌名

      Cell Biochemistry and Biophysics

      巻: 75 号: 3-4 ページ: 399-412

    • DOI

      10.1007/s12013-017-0808-3

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Cortical actin nodes: Their dynamics and recruitment of podosomal proteins as revealed by super-resolution and single-molecule microscopy2017

    • 著者名/発表者名
      Y.M. Shirai, T.A. Tsunoyama, N. Hiramoto-Yamaki, K.M. Hirosawa, A.C.E. Shibata, K. Kondo, A. Tsurumune, F. Ishidate, A. Kusumi, and T.K. Fujiwara
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 12 号: 11 ページ: 1-35

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0188778

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] Actin-induced compartmentalization of the channels between the focal-adhesion-protein islands as revealed by simultaneous ultrafast PALM and single-molecule tracking2019

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      16th International Membrane Research Forum
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Ultrafast single fluorescent-molecule imaging reveals hop diffusion within focal adhesion: actin-induced compartmentalization of the channels between the focal-adhesion-protein islands2018

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      Cold Spring Harbor Laboratory meeting on Single Biomolecules
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Revealing mesoscopic organization and function of the plasma membrane by developing high-speed single-molecule microscopy2017

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      Bangalore Microscopy Course 2017, 2017年9月17日-24日, Bangalore, India
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Plasma membrane compartmentalization and function as revealed by high-speed single-molecule microscopy2016

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      Single Molecule Workshop: Theory Meets Experiment
    • 発表場所
      Telluride, USA
    • 年月日
      2016-07-12
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Mesoscopic organization and function of the plasma membrane: an ultrafast single-molecule imaging study2016

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      The 2016 Gordon Research Conference on Single Molecule Approaches to Biology, Single-Molecule Microscopy: Life at a Higher Resolution
    • 発表場所
      Hong Kong, China
    • 年月日
      2016-07-03
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Revealing mesoscopic organization of the plasma membrane by developing high-speed single-molecule localization and tracking techniques2016

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Fujiwara
    • 学会等名
      Spectroscopical Society of Japan International Symposium: Advanced spectroscopy and imaging with nano-scale resolution
    • 発表場所
      Osaka, Japan
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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