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複合型糖鎖生合成に必須なN-アセチルグルコサミン転移酵素IIの立体構造解析

研究課題

研究課題/領域番号 16H06847
研究種目

研究活動スタート支援

配分区分補助金
研究分野 応用生物化学
研究機関静岡大学

研究代表者

宮崎 剛亜  静岡大学, グリーン科学技術研究所, 助教 (30775721)

研究協力者 朴 龍洙  静岡大学, グリーン科学技術研究所, 教授
加藤 竜也  静岡大学, 農学部, 准教授
研究期間 (年度) 2016-08-26 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
2017年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード糖鎖 / 糖転移酵素 / 糖タンパク質 / N結合型糖鎖 / 複合型糖鎖 / カイコ / N結合型糖鎖 / X線結晶構造解析 / N-アセチルグルコサミン
研究成果の概要

本研究は、複合型糖鎖生合成に重要なN-アセチルグルコサミン転移酵素IIの構造と機能の相関を解明することを目的とし、ヒトおよびカイコ由来酵素を研究対象とした。それぞれを大腸菌またはカイコを宿主とした発現系を構築し、カイコで発現させた場合に優位に高い活性を有する組換え酵素を取得することができた。カイコ由来酵素はヒトと同等の基質特異性および活性を有していた。いずれの酵素も自身にN結合型糖鎖が付加した糖タンパク質であり、ヒトよりカイコ由来酵素の方が糖鎖が多く付加していたが、糖鎖を切断しても酵素活性が変化しないことから、糖鎖は酵素活性や構造安定性に重要でないことが示唆された。

報告書

(3件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 1件、 査読あり 4件、 謝辞記載あり 1件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (10件) (うち招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Heterologous expression, purification and characterization of human β-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase II using a silkworm-BmNPV bacmid system.2018

    • 著者名/発表者名
      Takatsugu Miyazaki, Tatsuya Kato, and Enoch Y. Park
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: 印刷中 号: 1 ページ: 15-22

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2018.01.011

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Paenibacillus sp. 598K 6-α-glucosyltransferase is essential for cycloisomaltooligosaccharide synthesis from α-(1→4)-glucan2017

    • 著者名/発表者名
      Hitomi Ichinose, Ryuichiro Suzuki, Takatsugu Miyazaki, Keitarou Kimura, Mitsuru Momma, Nobuhiro Suzuki, Zui Fujimoto, Atsuo Kimura, Kazumi Funane
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology

      巻: 101 号: 10 ページ: 4115-4128

    • DOI

      10.1007/s00253-017-8174-z

    • NAID

      120006771683

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] N-Glycan Modification of a Recombinant Protein via Coexpression of Human Glycosyltransferases in Silkworm Pupae2017

    • 著者名/発表者名
      Tatsuya Kato, Natsumi Kako, Kotaro Kikuta, Takatsugu Miyazaki, Sachiko Kondo, Hirokazu Yagi, Koichi Kato and Enoch Y. Park
    • 雑誌名

      Sci. Rep.

      巻: 7 号: 1 ページ: 1409-1409

    • DOI

      10.1038/s41598-017-01630-6

    • NAID

      120006228195

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Insulin-like peptide 3 expressed in the silkworm possesses intrinsic disulfide bonds and full biological activity2017

    • 著者名/発表者名
      Miyazaki Takatsugu、Ishizaki Masaaki、Dohra Hideo、Park Sungjo、Terzic Andre、Kato Tatsuya、Kohsaka Tetsuya、Park Enoch Y.
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 7 号: 1 ページ: 17339-17339

    • DOI

      10.1038/s41598-017-17707-1

    • NAID

      120006371042

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] 哺乳類内在性色素結合型シアノバクテリオクロムの分子機構2018

    • 著者名/発表者名
      伏見 圭司, 宮崎 剛亜, 山本 達郎, 竹田 百花, 桑崎 勇人, 中嶋 隆浩, 榎本 元, 池内 昌彦, 朴 龍洙, 佐藤 守俊, 成川 礼
    • 学会等名
      日本農芸化学会2018年度大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] カイコーバクミド遺伝子発現系を用いた熱帯熱マラリア原虫に対するワクチン開発の基盤構築2018

    • 著者名/発表者名
      稲垣 裕, 林谷 美貴子, 宮崎 剛亜, デオ ヴィピン クマル, Murhandarwati Elsa Heridiana, 加藤 竜也, 朴 龍洙
    • 学会等名
      日本農芸化学会2018年度大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] N結合型糖鎖プロセシング酵素と相同性を有する細菌由来酵素の構造と機能2018

    • 著者名/発表者名
      宮崎 剛亜
    • 学会等名
      第19回 静岡ライフサイエンスシンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] ヒト由来糖転移酵素の共発現によるカイコ発現エリスロポエチンのN型糖鎖構造改変2017

    • 著者名/発表者名
      堀場 早紀, 加子 夏未, 宮崎 剛亜, 加藤 竜也, 近藤 幸子, 加藤 晃一, 矢木 宏和, 朴 龍洙
    • 学会等名
      日本農芸化学会2017年度大会
    • 発表場所
      京都女子大学(京都府京都市)
    • 年月日
      2017-03-18
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] カイコ‐BmNPVバクミド発現系を用いたN-アセチルグルコサミン転移酵素IIの発現と性質の解析2017

    • 著者名/発表者名
      宮崎 剛亜, 加藤 竜也, 朴 龍洙
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] カイコで発現させたヒトエリスロポエチンの糖転移酵素共発現によるN型糖鎖構造改変2017

    • 著者名/発表者名
      堀場 早紀, 加子 夏未, 宮崎 剛亜, 加藤 竜也, 近藤 幸子, 矢木 宏和, 加藤 晃一, 朴 龍洙
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] カイコ由来N-acetylgalactosaminyltransferaseの基質特異性2017

    • 著者名/発表者名
      宮下 龍之介, 宮崎 剛亜, 加藤 竜也, 朴 龍洙
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] カイコ‐BmNPVバクミド発現系を用いた熱帯熱マラリア原虫抗原提示ウイルス様粒子の作製2017

    • 著者名/発表者名
      稲垣 裕, 朴 龍洙, 加藤 竜也, 宮崎 剛亜, Deo Vipin Kumar
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 哺乳類内在色素結合型シアノバクテリオクロムを基盤とした汎用的光遺伝学ツールの開発2017

    • 著者名/発表者名
      伏見 圭司, 竹田 百花, 山本 達郎, 宮崎 剛亜, 桑崎 勇人, 中嶋 隆浩, 榎本 元, 池内 昌彦, 朴 龍洙, 佐藤 守俊, 成川 礼
    • 学会等名
      藍藻の分子生物学2017
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] カイコ由来糖転移酵素 GnTII 及び GalT オルソログの機能解析2016

    • 著者名/発表者名
      宮下 龍之介, 宮崎 剛亜, 加藤 竜也, 朴 龍洙
    • 学会等名
      第68回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      富山国際会議場(富山県富山市)
    • 年月日
      2016-09-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書

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公開日: 2016-09-02   更新日: 2019-03-29  

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