• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

魚類グランザイムによる細胞傷害機構解明とそれに基づく水産用ワクチン評価法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 16J01101
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 水圏生命科学
研究機関国立研究開発法人水産研究・教育機構 (2017)
日本大学 (2016)

研究代表者

松浦 雄太  国立研究開発法人水産研究・教育機構, 増養殖研究所, 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2016-04-22 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2017年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2016年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワードセリンプロテアーゼ / 細胞傷害 / 貪食細胞 / 細胞性免疫 / ギンブナ / グランザイム / ワクチン検定法 / 酵素 / 細胞傷害機構
研究実績の概要

本研究では、昨年度の研究成果により見出した細胞傷害に関わるグランザイム様酵素のさらなる機能解析を行った。本酵素の組織分布を調べるため、本酵素に対するモノクローナル抗体を作製し、凍結組織切片を用いた蛍光免疫染色を行なった。その結果、腎臓にて造血された貪食細胞が本酵素の産生源となり、鰓や皮膚など外界に接する組織に移動していることが示唆された。次に、本酵素の発現制御機構を調べるため、トール様受容体(TLR)リガンドによる刺激実験を行い、本酵素の発現を制御するTLR経路を調べた。その結果、TLR2,3,4それぞれに対するリガンドによりその発現が増強されることが判明した。よって、本酵素は外界から侵入した抗原や病原体に対する免疫応答に関わっていることが推測され、ワクチンによる免疫賦活効果を確認する指標として利用可能と考えられた。
次に、国内養殖業における重要魚種において本酵素を指標とした水産用ワクチン評価法を開発するため、これら魚種における本酵素のホモログ遺伝子探索を試みた。しかし、ブリ、カンパチ、マダイ、ヒラメのESTデータベースを用いた相同性検索並びに系統樹解析の結果、これら魚種においてホモログ遺伝子は存在しなかった。また、酵素活性測定実験を行った結果、本酵素活性はコイ科魚類以外の魚種では検出されなかった。よって、本酵素はコイ科魚類に特有の酵素であることが示唆され、コイ科魚類以外の魚種では本酵素活性を指標とした細胞性免疫機能測定法の実施が困難であることが判明した。今後はコイ科魚類以外の魚種にも存在する細胞傷害関連分子を探索し、それを指標とした手法の検討が必要である。
本研究により見出したコイ科魚類特有の酵素はこれまで未報告であり学術的に興味深い。今後、本酵素による免疫機構(細胞傷害機構)が解明されれば、進化の過程でコイ科魚類が独自に産み出した生体防御機構を解き明かすことにつながる。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 2件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 3件)

  • [雑誌論文] Percentage Dynamics of CD4-1<sup>+</sup> and CD8&alpha;<sup>+</sup> T Cells in Different Tissues at Various Developmental Stages in Ginbuna Crucian Carp <i>Carassius auratus langsdorfii</i>2018

    • 著者名/発表者名
      Mohamed A. Khallaf、 Shino Ogawa、Hideaki Toda、Yuta Matsuura、Ryuichiro Miyazawa、Teruyuki Nakanishi
    • 雑誌名

      魚病研究

      巻: 53 号: 1 ページ: 10-18

    • DOI

      10.3147/jsfp.53.10

    • NAID

      130006619197

    • ISSN
      0388-788X, 1881-7335
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Stimulatory effects of heat-killed Enterococcus faecalis on cell-mediated immunity in fish2017

    • 著者名/発表者名
      Yuta Matsuura、Miho Takasaki、Ryuichiro Miyazawa、Teruyuki Nakanishi
    • 雑誌名

      Dev. Comp. Immunol.

      巻: 74 ページ: 1-9

    • DOI

      10.1016/j.dci.2017.03.029

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A simple and non-invasive method for analyzing local immune responses in vivo using fish fin.2017

    • 著者名/発表者名
      Matsuura Y, N. Takaoka, R. Miyazawa, T. Nakanishi
    • 雑誌名

      Dev. Comp. Immunol.

      巻: 74 ページ: 136-143

    • DOI

      10.1016/j.dci.2017.04.016

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cross-reactivity of monoclonal antibodies against CD4-1 and CD8α of ginbuna crucian carp with lymphocytes of zebrafish and other cyprinid species2017

    • 著者名/発表者名
      Miyazawa, R., Y. Matsuura, Y. Shibasaki, S. Imamura, T. Nakanishi
    • 雑誌名

      Dev. Comp. Immunol.

      巻: 印刷中 ページ: 15-23

    • DOI

      10.1016/j.dci.2016.12.002

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Stimulatory effects of heat-killed Enterococcus faecalis on cell-mediated immunity in fish2017

    • 著者名/発表者名
      Matsuura, Y., Takasaki, M., Miyazawa, R. and Nakanishi, T.
    • 雑誌名

      Dev. Comp. Immunol.

      巻: 印刷中

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Purification and characterization of a fish granzymeA involved in cell-mediated immunity.2016

    • 著者名/発表者名
      Matsuura Y, T. Yabu, H. Shiba, T. Moritomo, T. Nakanishi
    • 雑誌名

      Dev Comp Immunol.

      巻: 60 ページ: 33-40

    • DOI

      10.1016/j.dci.2016.02.011

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Effects of IFN<gamma> administration on allograft rejection in ginbuna crucian carp2016

    • 著者名/発表者名
      Shibasaki Y, C. Hatanaka, Y. Matsuura, R. Miyazawa, T. Yabu, T. Moritomo, T. Nakanishi
    • 雑誌名

      Dev. Comp. Immunol.

      巻: 62 ページ: 108-115

    • DOI

      10.1016/j.dci.2016.04.021

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 魚類白血球の細胞傷害機構に関与するセリンプロテアーゼの同定並びに組織局在解析2018

    • 著者名/発表者名
      松浦雄太、松山知正、藪健史、宮澤龍一郎、司馬肇、中西照幸
    • 学会等名
      平成30年度日本水産学会春季大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 加熱殺菌Enterococcus faecalisによる細胞性免疫機能賦活作用の検討2017

    • 著者名/発表者名
      松浦雄太 高崎美帆 中西照幸
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会春季大会
    • 発表場所
      日本大学 生物資源科学部(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2017-03-11
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 魚類の鰭膜を利用した、好中球の機能をin vivoにて測定する新規手法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      高岡尚起 松浦雄太 宮澤龍一郎 中西照幸
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会春季大会
    • 発表場所
      日本大学 生物資源科学部(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2017-03-11
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 抗ギンブナCD4-1及びCD8αモノクローナル抗体のコイ科魚類リンパ球との交差反応性及びエピトープ解析2017

    • 著者名/発表者名
      宮澤龍一郎 Navaneethaiyer Umasuthan 松浦雄太 中西照幸
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会春季大会
    • 発表場所
      日本大学 生物資源科学部(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2017-03-11
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ギンブナ腎臓におけるCD3εの特有な発現機構の解明2017

    • 著者名/発表者名
      宮澤龍一郎 村田 憲史 黒瀬めぐみ 松浦雄太 中西 照幸
    • 学会等名
      平成29年度日本魚病学会春季大会
    • 発表場所
      日本大学 生物資源科学部(神奈川県藤沢市)
    • 年月日
      2017-03-11
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 魚類白血球の細胞傷害機構に関与するセリンプロテアーゼの同定2017

    • 著者名/発表者名
      松浦雄太、藪健史、宮澤龍一郎、司馬肇、中西照幸
    • 学会等名
      日本比較免疫学会第29回学術集会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] Stimulatory effects of heat-killed Enterococcus faecalis on cell-mediated immunity in fish2017

    • 著者名/発表者名
      Yuta Matsuura、Miho Takasaki、Ryuichiro Miyazawa、Teruyuki Nakanishi
    • 学会等名
      11th Vaccine congress
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 魚類白血球の細胞傷害機構に関与するセリンプロテアーゼの精製とその特性解析2017

    • 著者名/発表者名
      松浦雄太、藪健史、宮澤龍一郎、司馬肇、中西照幸
    • 学会等名
      第90回日本生化学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] ギンブナ白血球における、NK様活性をもつ細胞の同定2016

    • 著者名/発表者名
      高祖愛里 松浦雄太 中西照幸
    • 学会等名
      平成28年度日本比較免疫学会、第28回学術集会
    • 発表場所
      東京医科歯科大学(東京都千代田区)
    • 年月日
      2016-08-18
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Purification and characterization of a fish granzyme A involved in cell-mediated immunity2016

    • 著者名/発表者名
      Matsuura, Y., Yabu, T., Shiba, H., Moritomo, T. and Nakanishi, T.
    • 学会等名
      2nd international conference of fish & shellfish immunology
    • 発表場所
      ポートランド(アメリカ合衆国)
    • 年月日
      2016-06-26
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Effects of IFNγ administration on allograft rejection in ginbuna crucian carp2016

    • 著者名/発表者名
      Shibasaki, Y., Hatanaka, C., Matsuura, Y., Miyazawa, R., Yabu, T. and Nakanishi, T.
    • 学会等名
      2nd international conference of fish & shellfish immunology
    • 発表場所
      ポートランド(アメリカ合衆国)
    • 年月日
      2016-06-26
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会

URL: 

公開日: 2016-05-17   更新日: 2024-03-26  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi