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特異的糖鎖分解酵素を用いた植物プロテオグリカンの情報伝達機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 16J05924
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 植物分子・生理科学
研究機関埼玉大学

研究代表者

吉見 圭永  埼玉大学, 理工学研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2016-04-22 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2017年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2016年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード植物細胞壁 / 細胞壁多糖 / アラビノガラクタン-プロテイン / エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼ / シロイヌナズナ / デキサメタゾン誘導発現系 / セルロース
研究実績の概要

アラビノガラクタン-プロテイン(AGP)は植物界に普遍的に存在する細胞外プロテオグリカンであり、様々な生理現象に関与している。AGPは複雑な糖鎖構造を持つため、糖鎖の分子機能は未だに不明な点が多く残されている。本研究では、微生物由来の特異的かつ強力なAG糖鎖分解酵素、エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼ(Il3GAL)を利用し、AG糖鎖の機能阻害が可能な植物の作出し、AG糖鎖の分子機能の解明を目指している。
平成28年度は、デキサメタゾン(DEX)によりIl3GALが発現し、AG糖鎖の分解を誘導するシロイヌナズナ、DEX::Il3GAL植物に加えて、Il3GALの活性部位に点突然変異を入れたDEX::Il3GAL-PM植物を作出した。これらの植物においてDEX処理におけるAG糖鎖分解活性の上昇やAG糖鎖の分解を確認した。さらにDEX::Il3GAL植物をDEX処理するとセルロース量が顕著に減少することを見出した。平成29年度は、AG糖鎖の分解により起こる表現型を走査型電子顕微鏡で観察を行った。DEX処理したDEX::Il3GAL植物の詳細な観察により、表皮細胞だけでなく様々な細胞で著しい細胞肥大が観察された。このような部分的な細胞肥大は、野生型植物やDEX::Il3GAL-PM植物では起こらなかった。細胞肥大はセルロースの合成が異常となり、細胞壁の強度が弱くなったためと考えられる。セルロースは表層微小管に沿って合成されるため、表層微小管を可視化し、経時的に観察を行った。DEX::Il3GAL植物をDEX処理すると48時間後から細胞が肥大しはじめ、表層微小管の密度や配向が変化していた。
本研究は、真菌由来の分解酵素を利用し、AG糖鎖の分解を誘導する新規アプローチを確立し、AGPが直接または表層微小管の変化を介してセルロースの合成量に影響していること明らかにした。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2017 実績報告書
  • 2016 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2017 2016

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 2件) 学会・シンポジウム開催 (1件)

  • [雑誌論文] Heterologous expression and characterization of an Arabidopsis β-l-arabinopyranosidase and α-d-galactosidases acting on β-l-arabinopyranosyl residues2017

    • 著者名/発表者名
      Imaizumi Chiemi、Tomatsu Harumi、Kitazawa Kiminari、Yoshimi Yoshihisa、Shibano Seiji、Kikuchi Kaoru、Yamaguchi Masatoshi、Kaneko Satoshi、Tsumuraya Yoichi、Kotake Toshihisa
    • 雑誌名

      Journal of Experimental Botany

      巻: 68 号: 16 ページ: 4651-4661

    • DOI

      10.1093/jxb/erx279

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Properties of two fungal endo-β-1,3-galactanases and their synergistic action with an exo-β-1,3-galactanase in degrading arabinogalactan-proteins2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshimi Yoshihisa、Yaguchi Kaori、Kaneko Satoshi、Tsumuraya Yoichi、Kotake Toshihisa
    • 雑誌名

      Carbohydrate Research

      巻: 453-454 ページ: 26-35

    • DOI

      10.1016/j.carres.2017.10.013

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A protease/peptidase from culture medium of Flammulina velutipes that acts on arabinogalactan-protein2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshimi, Y., Sugawara, Y., Hori, C., Igarashi, K., Kaneko, S., Tsumuraya, Y., and Kotake, T.
    • 雑誌名

      Biosci. Biotechnol. Biochem.

      巻: 81 号: 3 ページ: 475-481

    • DOI

      10.1080/09168451.2016.1258985

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 特異的分解酵素の発現によるAGP糖鎖の機能阻害2017

    • 著者名/発表者名
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、出崎能丈、澁谷直人、円谷陽一、小竹敬久
    • 学会等名
      第58回日本植物生理学会年会
    • 発表場所
      鹿児大学(鹿児島県、鹿児島市)
    • 年月日
      2017-03-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] In vivo degradation of type-II arbinogalactan using fungal exo-b-1,3-galactanase in plant.2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshihisa Yoshimi, Mami Yoshimura, Raijoh Yakuwa, Seiji Shibano, Yoichi Tsumuraya, Toshihisa Kotake
    • 学会等名
      6th International conference on Plant Cell Wall Biology
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 真菌由来エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼの発現による植物のII型アラビノガラクタンの分解2017

    • 著者名/発表者名
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、円谷陽一、小竹敬久
    • 学会等名
      日本植物学会第81回大会
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] 特異的なガラクタナーゼの誘導発現系を利用したAGPの生理機能の解析2016

    • 著者名/発表者名
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、出崎能丈、澁谷直人、円谷陽一、小竹敬久
    • 学会等名
      日本植物学会第80回大会
    • 発表場所
      沖縄コンベンションセンター(沖縄県、宜野湾市)
    • 年月日
      2016-09-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] In vivo degradation of sugar chains of arabinogalactan-proteins by microbial glycoside hydrolases in Arabidopsis.2016

    • 著者名/発表者名
      Yoshihisa Yoshimi, Mami Yoshimura, Raijoh Yakuwa, Seiji Shibano, Yoshitake Desaki, Naoto Shibuya, Yoichi Tsumuraya, Toshihisa Kotake
    • 学会等名
      XIV Cell Wall Meeting
    • 発表場所
      ギリシャ、クレタ島、ハニア
    • 年月日
      2016-06-12
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会・シンポジウム開催] 6th International Conference on Plant Cell Wall Biology2017

    • 関連する報告書
      2017 実績報告書

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公開日: 2016-05-17   更新日: 2024-03-26  

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