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ゲノム分子生物学による生存可能な病原性細菌の直接計数法の研究開発

研究課題

研究課題/領域番号 16K06559
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 土木環境システム
研究機関八戸工業高等専門学校

研究代表者

矢口 淳一  八戸工業高等専門学校, その他部局等, 教授 (80342450)

研究分担者 山本 歩  八戸工業高等専門学校, その他部局等, 准教授 (60523800)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2019年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2018年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2017年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2016年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワードアンプリコンシーケンス解析 / PMA / rRNA / 病原性細菌 / RT-PCR / β多様性解析 / 次世代シーケンサー / PCR / ろ過濃縮 / 細菌叢 / RNA / rRNA / 大腸菌 / 環境 / 土木環境システム / 細菌 / 感染症 / バイオテクノロジー
研究成果の概要

本研究では次世代シーケンサーによる生理的活性のある細菌の細菌叢解析のため、アンプリコンシーケンス解析においてPCR, PMA-PCR,RT-PCRを比較した。先ず、熱処理した排水サンプルに培養した大腸菌と糞便性連鎖球菌を添加して3つのPCR法と2段階で増幅を行うPMA-nestedPCRで細菌叢を解析したところ、RT-PCRのみほぼ添加量を反映した細菌叢が得られた。次に生活排水、その処理水、河川水と消化汚泥に3つのPCR法を適用して細菌叢解析を行ったところ、4つのサンプルとも手法によってβ多様性が大きく異なり、分析手法によって活性のある細菌叢に顕著な違いがあることが知られた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究は、大腸菌など指標生物に基づく糞便汚染の評価法を革新するスタートの研究と位置付けることができ、研究開発した生理的活性のある細菌群のみを菌叢解析する手法によって、活性を維持している病原性細菌の水環境中での挙動を把握することができ、感染リスクの評価と汚染源対策を通じてリスクマネジメントに大きく貢献できる。開発した手法を2つの下水処理場に適用して病原性細菌の挙動解析を行ったところ、Mycobacterium属の細菌が塩素消毒後も活性を維持して残存していることが分かった。

報告書

(5件)
  • 2019 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2018 実施状況報告書
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2020 2019 2018

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (7件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] 表紙2019

    • 著者名/発表者名
      日脇陸生、矢口淳一
    • 雑誌名

      八戸工業高等専門学校紀要

      巻: 53 号: 0 ページ: Cover1

    • DOI

      10.24704/hnctech.53.0_Cover1

    • NAID

      130007633982

    • ISSN
      0385-4124, 2433-2003
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 下水処理プロセスにおける生理的活性のある細菌群の挙動解析2020

    • 著者名/発表者名
      矢口淳一  成田健志 Nur Dianna binti Ibraham
    • 学会等名
      令和元年度土木学会東北支部技術研究発表会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 排水処理プロセスにおける活性のある病原性細菌の挙動について2020

    • 著者名/発表者名
      矢口淳一  成田健志 Nur Dianna binti Ibraham
    • 学会等名
      第54回日本水環境学会年会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] Enumeration of Viable Escherichia coli in Wastewater and River Water Utilizing RNA-Based RT-qPCR Method2019

    • 著者名/発表者名
      Junichi Yaguchi, Narita Kenshi, Satomi Nagamori
    • 学会等名
      The 8th IWA-ASPIRE Conference & Exhibition 2019
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 効果的な生理的活性のある細菌の網羅的解析2019

    • 著者名/発表者名
      日脇陸生、山本 歩、矢口淳一
    • 学会等名
      第53回日本水環境学会年会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] PMAxx試薬による生理的活性のある細菌の分別効果2019

    • 著者名/発表者名
      成田健志、高島 慧周、矢口淳一
    • 学会等名
      平成30年度土木学会東北支部技術研究発表会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 次世代シーケンサーを用いた生理的活性のある細菌の網羅的解析2018

    • 著者名/発表者名
      日脇陸生、山本 歩、矢口淳一
    • 学会等名
      第55回環境フォーラム(土木学会)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] rRNAを利用した生存可能な大腸菌の計数について2018

    • 著者名/発表者名
      長森 郷仁, 成田 健志, 矢口 淳一
    • 学会等名
      第52回日本水環境学会年会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2021-02-19  

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