ゲノム編集において予期せぬリアレンジを抑制し確実に相同組換えを起こす手法の開発

• 研究課題/領域番号: 16K07093
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 荒木 喜美 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 教授 (90211705)
• 研究分担者: 荒木 正健 熊本大学, 生命資源研究・支援センター, 准教授 (80271609)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2017年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2018年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2017年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円); 2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: ゲノム編集 / マウスES細胞 / 相同組み換え / 相同組換え / 遺伝子改変マウス / 発生工学 / 遺伝子操作

研究実績の概要

遺伝子のノックインやノックアウトをマウス受精卵やマウスES細胞で行う場合、CRISPR/Casを用いたゲノム編集は、今やなくてはならないツールである。しかし、我々は、特にマウスES細胞において、相同組み換えを誘発するためにCRISPR/Cas　による2本鎖切断を行なった場合、目的とする相同組換え(HR)による変異導入に成功したアレルの対立アレルでは、PCRでは検出できず、サザンブロットでのみバンドのシフトとして検出される大きなリアレンジがかなりの頻度で生じていることを発見した。これはホモ変異導入に成功したと思っていても、実際には対立アレルは大きなリアレンジが起こっている状況であり、対象としている遺伝子以外にも何か変異を引き起こしている可能性がある。また、単純に、非相同末端結合(NHEJ)での微小な欠損や挿入による変異導入の場合でも、サザンブロットで複数バンドが出現するなど、リアレンジが検出された。我々は、このリアレンジは、マイクロホモロジーを利用した組換え(MMEJ)が原因と考えている。従来は、NHEJを抑制すれば相同組み換えが促進されるとされていたが、NHEJ抑制に加え、MMEJも抑制する必要があるのではないかと予想される。そこで、我々は、ES細胞において、相同組み換えによってbeta-gal遺伝子が正確に挿入された場合のみX-gal染色陽性となり、NHEJやMMEJが起こるとX-gal染色陰性となる系を開発した。この系を用い、正確に変異を導入出来る相同組換えを起こすシステムの確立を目指している。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ES細胞においては、通常、エレクトロポレーションでCas9とsgRNAの発現ベクターpX330とターゲティングベクターを同時に導入する手法を取っている。pX330を用いる系で、いくつかのNHEJやMMEJ阻害剤を検討したが、pX330プラスミドが存在する限り継続してCas9が発現するため、2本差切断活性が非常に強力で、完全に抑制できるくらいの高濃度では細胞毒性が強く作用してしまい、程よい条件を見出すことは困難であった。
そこで、2本鎖切断ではなく、片方の鎖のみを切断するCas9 D10A nickaseの利用を、我々の樹立した相同組み換え効率検出系を用いて検討した。その結果、２つのCas9 D10A nickase を組み合わせて用いる2本鎖切断においても、野生型Cas9に比べ効率は6分の１以下に低下してしまうことから、nickaseの活性はかなり低いことがわかった。また、１箇所だけnickを加えた場合には、ほとんど相同組み換えは起こらないが、２箇所以上同じストランドにnickを加えると、予想外に相同組み換えを誘発することがわかった。
受精卵における相同組み換えの系では、マイクロインジェクションでは、検討に時間を要するため、多くの受精卵を一度に扱うことのできるエレクトロポレーションの系を開発した。従来のエレクトロポレーション法では、発生率が低いことが多かったため、エレクトロポレーションの装置とその条件、さらに、機械とポレーションに用いるチャンバーの組み合わせも検討し、最適の組み合わせを見出した。この条件では、体外受精後そのまま移植したのと変わらないくらいの効率で産仔を得ることができ、さらに、単なるNHEJによる変異作出においては、６割以上の効率でホモ変異を得ることができる。今後、この条件を用いて、受精卵での相同組み換えの系を検討する。

今後の研究の推進方策

リアレンジを引き起こしにくいCas9 D10A nickaseを用い、通常では低い相同組み換え誘導活性を、様々な工夫で上げていくことが課題となる。２箇所以上同じストランドにnickを加えると、Cas9 D10A nickaseを組み合わせて用いる2本鎖切断の時よりも効率よく相同組み換えを誘発することがわかったが、では、何箇所が最も効率が良いのかはまだ決定できていない。また、複数箇所のnickを加えるためには導入するプラスミドの数を増やすことになるので、エレクトロポレーションの条件も数多くのプラスミドを同時に導入できるような条件が必要になる。さらに、加える薬剤も、NHEJ、やMMEJを抑制する薬剤というよりも、nickでは起きにくい相同組み換えをいかに効率よく促進できるかという視点で薬剤を選択する必要がある。さらに、受精卵の系では、今まで効率が良くないという理由のため、Cas9 D10A nickaseはほとんど使われてこなかった。しかし、今回我々が樹立したシステムでは、非常に変異導入効率が良いため、Cas9 D10A nickaseタンパクを用いて変異を導入できる可能性があり、成功すれば、効率的な制約からファウンダー解析には向かないが、より安全・確実に変異マウス系統を樹立できるシステムになる。特に、コンディショナルアレルのように、比較的近接した２箇所に相同組み換えを導入する場合などにNHEJの起こりにくいnickaseの利用は有効であると期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Deletion of GIRK2 subunit containing GIRK channels of neurons expressing dopamine transporter decrease immobility time on forced swimming in mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Honda Ikutaro、Araki Kimi、Honda Sokichi、Soeda Fumio、Shin Min-Chul、Misumi Shogo、Yamamura Ken-ichi、Takahama Kazuo
  • 雑誌名: Ncurosci. Lett. 巻: 665 ページ: 140-146
  • DOI: 10.1016/j.neulet.2017.11.028
  • 査読あり
• [雑誌論文] LPA5 signaling is involved in multiple sclerosis-mediated neuropathic pain in the cuprizone mouse model. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsukahara Ryoko、Yamamoto Shinji、Yoshikawa Keisuke、Gotoh Mari、Tsukahara Tamotsu、Neyama Hiroyuki、Ishii Satoshi、Akahoshi Noriyuki、Yanagida Keisuke、Sumida Hayakazu、Araki Masatake、Araki Kimi、Yamamura Ken-ichi、Murakami-Murofushi Kimiko、Ueda Hiroshi
  • 雑誌名: J. Pharmacol. Sci. 巻: 136 ページ: 93-96
  • DOI: 10.1016/j.jphs.2018.01.001
  • 査読あり / オープンアクセスとしている
• [雑誌論文] Amyloid deposition in a mouse model humanized at the transthyretin and retinol-binding protein 4 loci (2018)
  • 著者名/発表者名: Li Xiangshun、Lyu Yanyi、Shen Jingling、Mu Yanshuang、Qiang Lixia、Liu Li、Araki Kimi、Imbimbo Bruno P.、Yamamura Ken-ichi、Jin Shoude、Li Zhenghua
  • 雑誌名: Lab Invest. 巻: 98 ページ: 512-524
  • DOI: 10.1038/s41374-017-0019-y
  • 説明: in press
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Rescue of retinal morphology and function in a humanized mouse at the mouse retinol-binding protein locus. (2017)
  • 著者名/発表者名: Liu, L., Suzuki, T., Shen, J., Wakana, S., Araki, K., Yamamura, K., Lei, L. and Li, Z.
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 97 ページ: 395-408
  • DOI: 10.1038/labinvest.2016.156
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] ANGPTL2 expression in the intestinal stem cell niche controls epithelial regeneration and homeostasis. (2017)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi H, Endo M, Kawane K, Kadomatsu T, Terada K, Morinaga J, Araki K, Miyata K, Oike Y,
  • 雑誌名: EMBO J. 巻: 36 ページ: 409-424
  • DOI: 10.15252/embj.201695690
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Soluble IL6R expressed by myeloid cells reduces tumor-specific Th1 differentiation and drives tumor progression (2017)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto H, Fujieda K, Hirayama M, Ikeda T, Yuno A, Matsumura K, Fukuma D, Araki K, Mizuta H, Nakayama H, Senju S, Nishimura Y
  • 雑誌名: Cancer Res 巻: 14 ページ: 2279-2291
  • DOI: 10.1158/0008-5472.can-16-2446
  • 査読あり / オープンアクセスとしている
• [雑誌論文] Development of an efficient screening system to identify novel bone metabolism-related genes using the exchangeable gene trap mutagenesis mouse models. (2017)
  • 著者名/発表者名: Syuji Kurogi, Tomohisa Sekimoto, Taro Funamoto, Tomomi Ohta, Shihoko Nakamura, Takuya Nagai, Mai Nakahara, Kumiko Yoshinobu, Kimi Araki, Masatake Araki, Etsuo Chosa
  • 雑誌名: Sci Rop 巻: 7 ページ: 40692-40692
  • DOI: 10.1038/srep40692
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] MiR-142 Is Required for Staphylococcus aureus Clearance at Skin Wound Sites via Small GTPase-Mediated Regulation of the Neutrophil Actin Cytoskeleton (2017)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Kim SE, Yano H, Matsumoto G, Ohuchida R, Ishikura Y, Araki M, Araki K, Park S, Komatsu T, Hayashi H, Ikematsu K, Tanaka K, Hirano A, Martin P, Shimokawa I, Mori R
  • 雑誌名: J. Invest. Dermatol. 巻: 137 ページ: 931-940
  • DOI: 10.1016/j.jid.2016.11.018
  • NAID: 40021436657
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Endothelial CD99 supports arrest of mouse neutrophils in venules and binds to neutrophil PILRs (2017)
  • 著者名/発表者名: Goswami Debashree、Marz Sigrid、Li Yu-Tung、Artz Annette、Schafer Kerstin、Seelige Ruth、Pacheco-Blanco Mariana、Jing Ding、Bixel Maria Gabriele、Araki Masatake、Araki Kimi、Yamamura Ken-Ichi、Vestweber Dietmar
  • 雑誌名: Blood. 巻: 129 ページ: 1811-1822
  • DOI: 10.1182/blood-2016-08-733394
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Accumulation of HLA-DR4 in colonic epithelial cells causes severe colitis in homozygous HLA-DR4 transgenic mice. (2017)
  • 著者名/発表者名: Irie Atsushi、Imamura Takahisa、Michibata Yayoi、Kubo Ttatsuko、Takeda Naoki、Shibuya Isao、Sogo Shinji、Araki Kimi、Nishimura Yasuharu
  • 雑誌名: Inflamm. Bowel Dis. 巻: 23 ページ: 2121-2133
  • DOI: 10.1097/mib.0000000000001282
  • 査読あり / オープンアクセスとしている
• [雑誌論文] WDR11‐mediated Hedgehog signalling defects underlie a new ciliopathy related to Kallmann syndrome (2017)
  • 著者名/発表者名: Kim Yeon‐Joo、Osborn Daniel PS、Lee Ji‐Young、Araki Masatake、Araki Kimi、Mohun Timothy、K?ns?koski Johanna、Brandstack Nina、Kim Hyun‐Taek、Miralles Francesc、Kim Cheol‐Hee、Brown Nigel A、Kim Hyung‐Goo、Martinez‐Barbera Juan Pedro、Ataliotis Paris、Raivio Taneli、Layman Lawrence C、Kim Soo‐Hyun
  • 雑誌名: EMBO reports 巻: 19 ページ: 269-289
  • DOI: 10.15252/embr.201744632
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Severe ocular phenotypes in Rbp4-deficient mice in the C57BL/6 genetic background (2016)
  • 著者名/発表者名: Shen, J., Shi, D., Suzuki, T., Xia, Z., Zhang, H., Araki, K., Wakana, S., Takeda, N., Yamamura, K., Jin, S. and Li. Z.
  • 雑誌名: Laboratory Investigation 巻: in press ページ: 1-12
  • DOI: 10.1038/labinvest.2016.39
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The importance of basonuclin 2 in adult mice and its relation to basonuclin 1. (2016)
  • 著者名/発表者名: Vanhoutteghem A, Delhomme B, Hervé F, Nondier I, Petit JM, Araki M, Araki K, Djian P.
  • 雑誌名: Mech. Dev. 巻: Feb 29 ページ: 1-21
  • DOI: 10.1016/j.mod.2016.02.002
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Rad18 confers hematopoietic progenitor cell DNA damage tolerance independently of the Fanconi Anemia pathway in vivo. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yang, Y., Poe, J. C., Yang, L., Fedoriw, A., Desai, S., Magnuson, T., Li, Z., Fedoriw, Y., Araki, K., Gao, Y., Tateishi, S., Sarantopoulos, S. and Vaziri, C.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 巻: February 15 ページ: 1-15
  • DOI: 10.1093/nar/gkw072
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] Cathepsin D in pancreatic acinar cells is implicated in cathepsin B and L degradation, but not in autophagic activity (2016)
  • 著者名/発表者名: Mehanna, S, Suzuki, C., Shibata, M., Sunabori, T., Imanaka, T., Araki, K., Yamamura, K., Uchiyama, Y. and Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 469 ページ: 405-11
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.12.002
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Mutation of the key residue for extraribosomal function of ribosomal protein S19 cause increased grooming behaviors in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Jun Chen, Taku Kaitsuka, Rika Fujino, Kimi Araki, Kazuhito Tomizawa, Tetsuro Yamamoto
  • 雑誌名: Neuroscience Letters 巻: 629 ページ: 221-226
  • DOI: 10.1016/j.neulet.2016.07.022
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Two transgenic mouse models for beta subunit components of succinate-CoA ligase yielding pleiotropic metabolic alterations. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kacso, G., Ravasz, D., Doczi, J., Nemeth, B., Madgar, O., Saada, A., Ilin, P., Miller, C., Ostergaard, E., Iordanov, I., Adams, D., Vargedo, Z., Araki, M., Araki, K., Nakahara, M., Ito, H., Gal, A., Molnar, M., Nagy, Z., Patocs, A., Adam-Vizi, V., and Chinopoulos C.
  • 雑誌名: Biochemical J. 巻: 473 ページ: 3463-3485
  • 査読あり / 国際共著/国際学会である
• [雑誌論文] The roles of the secreted phospholipase A2 gene family in immunology (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanigawa H, Miyata K, Tian Z, Aoi J, Kadomatsu T, Fukushima S, Ogata A, Takeda N, Zhao J, Zhu S, Terada K, Endo M, Morinaga J, Sugizaki T, Sato M, Morioka MS, Manabe I, Mashimo Y, Hata A, Taketomi Y, Yamamoto K, Murakami M, Araki K, Jinnin M, Ihn H, Oike Y
  • 雑誌名: Scientific Reports. 巻: 6 ページ: 1-12
  • DOI: 10.1038/srep34690
  • NAID: 120006534970
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Protein kinase D regulates positive selection of CD4＋ thymocytes through phosphorylation of SHP-1. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa E, Kosako H, Yasuda T, Ohmuraya M, Araki K, Kurosaki T, Saito T, Yamasaki S
  • 雑誌名: Nat. Commun. 巻: 7 ページ: 12756-12756
  • DOI: 10.1038/ncomms12756
  • NAID: 120006535062
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Mtu1-mediated thiouridine formation of mitochondrial tRNAs is required for mitochondrial translation and is involved in reversible infantile liver (2016)
  • 著者名/発表者名: Wu, Y., Wei, F. Y., Kawarada, L., Suzuki, T., Araki, K., Komohara, Y., Fujimura, A., Kaitsuka, T., Takeya, M., Oike, Y., Suzuki, T., Tomizawa, K.
  • 雑誌名: PLoS Genet. 巻: 12
  • DOI: 10.1371/journal.pgen.1006355
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Novel method to rescue a lethal phenotype through integration of target gene onto the X-chromosome. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakata, K. Araki, K. Nakano, H. Nishina, T. Komazawa-Sakon, S. Murai, S. Lee, G. E. Hashimoto, D. Suzuki, C. Uchiyama, Y. Notohara, K. Gukovskaya, A. S. Gukovsky, I. Yamamura, K. I. Baba, H. Ohmuraya, M.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 6 ページ: 37200-37200
  • DOI: 10.1038/srep37200
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 国際共著/国際学会である / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Short form FLICE-inhibitory protein promotes TNFalpha-induced necroptosis in fibroblasts derived from CFLARs transgenic mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shindo, R. Yamazaki, S. Ohmuraya, M. Araki, K. Nakano, H.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 480 ページ: 23-28
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.10.015
  • 査読あり / オープンアクセスとしている / 謝辞記載あり
• [学会発表] Generation of genome edited mice by electroporation with high efficiency and high survival rate. (2018)
  • 著者名/発表者名: Michihiko SUGIMOTO, Daisuke ARIYASU, Kei-ichiro ISHIGURO, Shingo ITO, Kimi ARAKI.
  • 学会等名: 平成29年度先端モデル動物支援プラットフォーム「成果発表会」
• [学会発表] 染色体特異的にクラスターを形成しているトラップ領域（CSCT）の解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 荒木 正健、武田 伊世、大賀 敏範、江頭 聡、中原 舞、吉信 公美子、荒木 喜美
  • 学会等名: 第64回日本実験動物学会総会
• [学会発表] An easy and high efficient technique for mouse genome manipulation by electroporation (2017)
  • 著者名/発表者名: Michihiko Sugimoto, Daisuke Ariyasu, Kei-ichiro Ishiguro, Shingo Ito, Kimi Araki.
  • 学会等名: AMMRA & AMPC meeting
  • 国際共著/国際学会である
• [学会発表] 遺伝子改変マウス作製の落とし穴 ~落ちて後悔しないために~ (2017)
  • 著者名/発表者名: 荒木 喜美
  • 学会等名: 平成29年度先端モデル動物支援プラットフォーム若手支援技術講習会
• [学会発表] エレクトロポレーションを用いた簡便・高効率マウスゲノム操作技術 (2017)
  • 著者名/発表者名: 杉本道彦、有安大典、石黒啓一郎、伊藤慎悟、荒木喜美
  • 学会等名: 日本遺伝学会第89回大会
• [学会発表] 染色体特異的にクラスターを形成しているトラップ領域：CSCT13は、マウス初期発生過程において重要な役割を演じていることが示唆された (2017)
  • 著者名/発表者名: 荒木 正健、武田 伊世、中原 舞、吉信 公美子、 荒木 喜美
  • 学会等名: 日本遺伝学会第89回大会
• [学会発表] 常染色体優性遺伝性GH1遺伝子異常症モデルマウスのGH分泌不全は、Ghrhr mRNAの低下による (2017)
  • 著者名/発表者名: 有安 大典、久保 英美香、芝田 晋介、長谷川 行洋、長谷川 奉延、荒木 喜美
  • 学会等名: 第51回日本小児内分泌学会学術集会
• [学会発表] 可変型遺伝子トラップクローンデータベース『EGTC』の開発及び解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 荒木 正健、吉信 公美子、中原 舞、山村 研一、荒木 喜美
  • 学会等名: トーゴーの日シンポジウム
• [学会発表] エレクトロポレーション法によるCRISPR/Cas9ゲノム編集マウス作製時における高効率化と生存率向上の試み (2017)
  • 著者名/発表者名: 杉本道彦、有安大典、石黒啓一郎、伊藤慎悟、荒木喜美
  • 学会等名: 第40回日本分子生物学会年会
• [学会発表] 生体内におけるLincRNA-p21の発現解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 古畑 理樹, 今坂 舞, 伊東 春香, 荒木 正健, 吉信 公美子, 山村 研一, 荒木 喜美
  • 学会等名: 第40回日本分子生物学会年会
• [学会発表] 常染色体優性遺伝性GH1遺伝子異常症の発症機序に関する検討 ー遺伝子置換システムを用いたヒト化GHマウスの作出と解析ー (2017)
  • 著者名/発表者名: 久保 英実香、有安 大典、芝田 晋介、荒木 喜美
  • 学会等名: 第40回日本分子生物学会年会
• [学会発表] 哺乳類ミトコンドリアtRNAに存在する5-メチルシチジンの機能解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 北川 翔，中野 沙緒里，鈴木 健夫，荒木 喜美，荒木 正健，鈴木 勉
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] p53により誘導されるLincRNA-p21の生体内発現解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 古畑 理樹，中原 舞，伊東 春香，木戸 悠次郎，大村谷 昌樹，荒木 正健，吉信 公美子，山村 研一，荒木 喜美
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] Gene-trap mutagenesis is useful for analysis of long intergenic non-coding RNA genes in vivo. (2016)
  • 著者名/発表者名: (14).Mai, Nakahara., Kumiko, Yoshinobu., Riki, Furuhata., Yujiro, Kido., Michihiko, Sugimoto., Ken-ichi, Yamamura., Masatake, Araki., and Kimi, Araki.
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] 常染色体優性遺伝性GH1遺伝子異常症の発症機序に関する検討－遺伝子置換システムを用いたヒト化GHマウスの作出－ (2016)
  • 著者名/発表者名: 久保 英実香，有安 大典，荒木 喜美
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] 常染色体優性遺伝性GH1遺伝子異常症の発症機序に関する検討－ヒト化GHマウスを用いたin vivo解析－ (2016)
  • 著者名/発表者名: 有安 大典，久保 英実香，芝田 晋介，荒木 喜美
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市（パシフィコ横浜）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] CRISPR-Cas9を用いた遺伝子改変マウス作製 (2016)
  • 著者名/発表者名: 荒木 喜美
  • 学会等名: 第48回日本臨床分子形態学会総会・学術集会
  • 発表場所: 熊本県熊本市（くまもと県民交流館パレア）
  • 年月日: 2016-09-23
  • 招待講演
• [学会発表] CRISPR-Cas9とゲノム編集で解き明かす尾部退行症候群の発症メカニズム (2016)
  • 著者名/発表者名: 仙波 圭，大場 隆，片渕 秀隆，飯田 有俊，池川 志郎，荒木 正健，荒木 喜美
  • 学会等名: 第48回日本臨床分子形態学会総会・学術集会
  • 発表場所: 熊本県熊本市（くまもと県民交流館パレア）
  • 年月日: 2016-09-23
• [学会発表] Cre-driverマウスラインの樹立と解析（Cre-mER T2におけるタモキシフェンの投与方法について） (2016)
  • 著者名/発表者名: 国場 訓，江藤 聡，荒木 美幸，森田 彩香，來海 葉子，山村 研一，吉信 公美子，荒木 喜美，荒木 正健
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 静岡県三島市（日本大学）
  • 年月日: 2016-09-07
• [学会発表] p53により誘導されるLincRNA-p21の生体内発現解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 古畑 理樹，中原 舞，伊東 春香，荒木 正健，吉信 公美子，山村 研一，荒木 喜美
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 静岡県三島市（日本大学）
  • 年月日: 2016-09-07
• [学会発表] 染色体特異的にクラスターを形成しているトラップ領域（CSCT13）の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 荒木 正健，武田 伊世，大賀 俊範，江藤 聡，中原 舞，吉信 公美子，荒木 喜美
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 静岡県三島市（日本大学）
  • 年月日: 2016-09-07
• [学会発表] CSCT2領域（3.1Mbp）欠損マウスラインの樹立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大賀 俊範，武田 伊世，江藤 聡，中原 舞，吉信 公美子，荒木 喜美，荒木 正健
  • 学会等名: 日本遺伝学会第88回大会
  • 発表場所: 静岡県三島市（日本大学）
  • 年月日: 2016-09-07
• [学会発表] Gene-trap mutagenesis is useful for analysis of long intergenic non-coding RNA genes in vivo (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakahara, M., Yoshinobu, K., Ito, H., Furuhata, R., Yamamura, K., Araki, M., Araki, K.
  • 学会等名: The 2016 AMMRA & AMPC meeting
  • 発表場所: 神奈川県足柄下郡箱根町ホテルおかだ
  • 年月日: 2016-05-20
  • 国際共著/国際学会である
• [備考] 熊本大学 生命資源研究・支援センター 疾患モデル分野
  • URL: http://irda-genetics.kuma-u.jp/