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キャピラリーアレー型アフィニティー電気泳動による糖タンパク質糖鎖の迅速分析

研究課題

研究課題/領域番号 16K08209
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 物理系薬学
研究機関近畿大学

研究代表者

鈴木 茂生  近畿大学, 薬学部, 教授 (00154542)

研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2018年度: 390千円 (直接経費: 300千円、間接経費: 90千円)
2017年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円)
2016年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
キーワード糖タンパク質糖鎖分析 / レクチン / エキソグリコシダーゼ / キャピラリー電気泳動 / 糖タンパク質性製剤 / 糖タンパク質糖鎖解析 / アフィニティー解析 / 網羅的解析 / アフィニティーキャピラリー電気泳動 / インキャピラリー酵素反応 / 逐次反応型キャピラリー電気泳動 / 濃縮キャピラリー電気泳動 / インキャピラリー化学反応 / ハイスループット分析 / 糖鎖解析デバイス / 糖タンパク質糖鎖 / 自動分析 / 糖タンパク質性医薬品 / アフィニティー電気泳動 / 糖鎖プロファイル解析
研究成果の概要

糖タンパク質糖鎖は生体内で様々な調整機能や生物学的機能発現に関与している。しかし糖鎖の種類は多く、含量の幅も広いので、その糖鎖プロファイルの微細な変化を定量的に捉える必要がある。我々はレクチンやエキソグリコシダーゼを用いた糖タンパク質糖鎖の部分導入アフィニティーキャピラリー電気泳動法を開発した。測定操作としては、通常のキャピラリー電気泳動において先ずレクチンあるいはエキソグリコシダーゼ溶液を次いで電気泳動移動度の速い糖タンパク質糖鎖蛍光性誘導体を導入し、電気泳動を行う。レクチンやエキソグリコシダーゼの種類によって構造情報が得られる上、これら酵素を逐次導入することで糖鎖の配列解析が可能となった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

現在、糖タンパク質性医薬品が数多く上市され、既にジェネリック製剤の投入時期を迎えた。過去に糖タンパク質製剤の糖鎖を十分に管理せず、重篤な事故を起こしたこともあり、人体に危険な非ヒト型糖鎖について、量が極めて微量であっても精度よく定量できる簡便な管理方法が求められている。本法はこのような目的にもっとも適していると考える。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (28件)

すべて 2019 2018 2017 2016 その他

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 9件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (18件) (うち国際学会 2件、 招待講演 2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Simultaneous Determination of Inorganic Anions and Cations in Water and Biological Samples by Capillary Electrophoresis with a Capacitive Coupled Contactless Conductivity Detector Using Capillary Filling Method2019

    • 著者名/発表者名
      YAMAMOTO Sachio、FUJIWARA Haruka、MARUYAMA Katsushi、TANAKA Yoshihide、KINOSHITA Mitsuhiro、SUZUKI Shigeo
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 35 号: 3 ページ: 295-300

    • DOI

      10.2116/analsci.18P422

    • NAID

      130007608358

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 年月日
      2019-03-10
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] High-performance liquid chromatographic separation of 8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid labeled N -glycans using a functional tetrazole hydrophilic interaction liquid chromatography column2018

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto Sachio、Kinoshita Mitsuhiro、Ikegami Toru、Suzuki Shigeo
    • 雑誌名

      Journal of Chromatography A

      巻: 1566 ページ: 44-50

    • DOI

      10.1016/j.chroma.2018.06.050

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] On-line microchip electrophoresis-mediated preconcentration of cationic compounds utilizing cationic polyacrylamide gels fabricated by in situ photopolymerization2018

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto Sachio、Okada Fuka、Kinoshita Mitsuhiro、Suzuki Shigeo
    • 雑誌名

      The Analyst

      巻: 143 号: 18 ページ: 4429-4435

    • DOI

      10.1039/c8an01159a

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] インキャピラリー酵素反応電気泳動による抗体医薬品等の糖タンパク質糖鎖の高感度解析2018

    • 著者名/発表者名
      鈴木茂生
    • 雑誌名

      電気泳動

      巻: 62

    • NAID

      130007393787

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Plug-plug Kinetic Capillary Electrophoresis for In-capillary Exoglycosidase Digestion as a Profiling Tool for the Analysis of Glycoprotein Glycans2017

    • 著者名/発表者名
      Maki Yamagami, Yurie Matsui, Takao Hayakawa, Sachio Yamamoto, Mitsuhiro Kinoshita, Shigeo Suzuki
    • 雑誌名

      Journal of Chromatography A

      巻: 1496 ページ: 157-162

    • DOI

      10.1016/j.chroma.2017.03.019

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Online cleanup liquid chromatography for the analysis of glycoprotein-derived oligosaccharides labeled with 7-amino-4-methylcoumarin2017

    • 著者名/発表者名
      Yoshie Nagatomo, Shinichi Hashimoto, Yuka Kishimoto, Takao Hayakawa, Sachio Yamamoto, Mitsuhiro Kinoshita, Shigeo Suzuki
    • 雑誌名

      Chromatography

      巻: 38 ページ: 23-30

    • NAID

      130005439673

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Combination of SDS-PAGE and intact mass analysis for rapid determination of heterogeneities in monoclonal antibody therapeutics.2017

    • 著者名/発表者名
      Yamada H, Matsumura C, Yamada K, Teshima K, Hiroshima T, Kinoshita M, Suzuki S, Kakehi K
    • 雑誌名

      Electrophoresis

      巻: 38(9-10) 号: 9-10 ページ: 1344-1352

    • DOI

      10.1002/elps.201700014

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Current landscape of protein glycosylation analysis and recentprogress toward a novel paradigm of glycoscience research2016

    • 著者名/発表者名
      Sachio Yamamoto, Mitsuhiro Kinoshita, Shigeo Suzuki
    • 雑誌名

      Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

      巻: 130 ページ: 273-300

    • DOI

      10.1016/j.jpba.2016.07.015

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Capillary electrochromatography using monoamine- andtriamine-bonded silica nanoparticles as pseudostationary phases2016

    • 著者名/発表者名
      Yuto Takeda, Yuka Hayashi, Naonori Utamura, Chise Takamoto, Mitsuhiro Kinoshita,Sachio Yamamoto, Takao Hayakawa, Shigeo Suzuki
    • 雑誌名

      Journal of Chromatography A

      巻: 1427 ページ: 170-176

    • DOI

      10.1016/j.chroma.2015.11.085

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 8-Aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid標識化ガン細胞由来糖鎖の新規構造解析法の開発2018

    • 著者名/発表者名
      中住智典,山本佐知雄,木下充弘,鈴木茂生
    • 学会等名
      第38回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 全自動マイクロチップ電気泳動装置を用いる次世代糖鎖プロファイリング法の開発2018

    • 著者名/発表者名
      木下充弘,山本万莉,山本佐知雄,鈴木茂生
    • 学会等名
      第38回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 部分導入アフィニティーキャピラリー電気泳動、HPLC、MSを組み合わせた8-Aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid標識化ガン細胞由来糖鎖の網羅的解析2018

    • 著者名/発表者名
      山本佐知雄, 中住智典, 宮脇直久, 須田暁, 木下充弘, 鈴木茂生
    • 学会等名
      第29回クロマトグラフィー科学会議
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 抗体医薬の定常領域配列に着目した迅速糖鎖プロファイリング2018

    • 著者名/発表者名
      河崎拓也、山本佐知雄、鈴木茂生、木下充弘
    • 学会等名
      第68回 日本薬学会近畿支部総会・大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 8-Aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid標識化ガン細胞由来糖鎖の構造解析2018

    • 著者名/発表者名
      中住智典、山本佐知雄、木下充弘、鈴木茂生
    • 学会等名
      第68回 日本薬学会近畿支部総会・大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 二官能性蛍光試薬による糖タンパク質糖鎖の標識化並びに糖鎖ーレクチン相互作用解析への応用2018

    • 著者名/発表者名
      鈴木茂生,神村和希,安井瑞紀,井上裕也,藤井孝泰,山本佐知雄,木下充弘,藤巻真
    • 学会等名
      第31回 バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Application of Partial Filling Affinity Capillary Electrophoresis Using Lectins and Exoglycosidases for the Characterization of Glycoprotein-derived Oligosaccharides2018

    • 著者名/発表者名
      Shigeo Suzuki
    • 学会等名
      Sino-Japanese Joint Symposium on Separation Sciences
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] 糖タンパク質糖鎖の二官能性蛍光色素標識法の開発と糖鎖-レクチン相互作用解析への応用2018

    • 著者名/発表者名
      鈴木 茂生, 神村 和希, 安井 瑞紀, 井上 裕也, 藤井 孝泰, 山本 佐知雄, 木下 充弘
    • 学会等名
      日本分析化学会第78回分析化学討論会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 酵素固定化アクリルアミドゲルチップを用いる糖タ ンパク質糖鎖調製法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      山本 佐知雄 , 植田 麻希 , 葛西 優貴 , 木下 充弘 , 鈴木 茂生
    • 学会等名
      日本薬学会第137年会
    • 発表場所
      東北大学川内北キャンパス(仙台)
    • 年月日
      2017-03-24
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 部分導入キャピラリー電気泳動による糖タンパク質糖鎖のin‐capillaryエキソグリコシダーゼ消化2017

    • 著者名/発表者名
      鈴木茂生, 山上眞, 松井友理恵, 木下充弘, 山本佐知雄
    • 学会等名
      バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] In-capillary lectin-binding and exoglycosidase digestion capillary electrophoresis for profiling glycoprotein glycans.2017

    • 著者名/発表者名
      5.Shigeo Suzuki, Sachio Yamamoto, Mitsuhiro Kinoshita
    • 学会等名
      46th International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Technique
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] キャピラリー電気泳動を用いた糖タンパク質糖鎖の高感度解析技術の開発2017

    • 著者名/発表者名
      鈴木茂生
    • 学会等名
      第37回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 部分導入キャピラリー電気泳動法を用いるガン細胞由来糖鎖の解析2017

    • 著者名/発表者名
      山本佐知雄, 中住智典, 木下充弘, 鈴木茂生
    • 学会等名
      分析化学会第66年会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] HILIC および逆相モードに共通した蛍光標識糖タンパク質糖鎖のオンライン精製 HPLC 法の開発2016

    • 著者名/発表者名
      岸本 有加,岡田 風花,木下 充弘,山本 佐知雄,鈴木 茂生
    • 学会等名
      クロマトグラフィー科学会議
    • 発表場所
      慶應義塾大学薬学部(東京)
    • 年月日
      2016-11-16
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] エキソグリコシダーゼ消化部分導入キャピラリー電気泳動による糖タンパク質糖鎖解 析2016

    • 著者名/発表者名
      山上 眞,松井友理恵,木下充弘,山本佐知雄,鈴木茂生
    • 学会等名
      第36回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 発表場所
      徳島大学 常三島キャンパス(徳島)
    • 年月日
      2016-11-09
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ェニルボロン酸添加 MEKC による(S)-(+)-4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(3- aminopyrrolidin-1-yl)-2,1,3-benzoxadiazol 標識化 D-,L-糖の光学分離2016

    • 著者名/発表者名
      本佐知雄,田又洋子,瀬島佳保里,木下充弘,鈴木茂生
    • 学会等名
      第36回キャピラリー電気泳動シンポジウム
    • 発表場所
      徳島大学 常三島キャンパス(徳島)
    • 年月日
      2016-11-09
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 酵素固定化アクリルアミドゲルチップを用いる糖タンパク質糖鎖調製法の開発2016

    • 著者名/発表者名
      山本 佐知雄 ・ 植田 麻希 ・ 中村 朋子 ・ 木下 充弘 ・ 鈴木 茂生
    • 学会等名
      日本分析化学会第65年会
    • 発表場所
      北海道大学工学部(札幌)
    • 年月日
      2016-09-14
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 糖タンパク質由来糖鎖の蛍光標識化とオンライン精製HPLC2016

    • 著者名/発表者名
      鈴木 茂生 ・ 岸本 有加 ・ 橋本 真一 ・ 岡田 風花
    • 学会等名
      日本分析化学会第65年会
    • 発表場所
      北海道大学工学部(札幌)
    • 年月日
      2016-09-14
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [備考] 近畿大学薬学部薬品分析学研究室

    • URL

      https://www.phar.kindai.ac.jp/analche2/index.html

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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