E型肝炎ウイルス感受性・非感受性細胞を用いたウイルス増殖機構の解明

• 研究課題/領域番号: 16K08825
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 石井 孝司 国立感染症研究所, 品質保証・管理部, 部長 (40280763)
• 研究協力者: 塩田 智之
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2018年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2017年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: E型肝炎ウイルス / 複製機構 / 病原性 / 阻害剤 / ウィルス / 感染症 / 微生物 / 細胞・組織 / たん白質

研究成果の概要

E型肝炎ウイルス（HEV）を培養細胞系で増殖させる系は確立されたが、ウイルスの増殖は非常に遅く、ウイルスの病原性やトロピズムを解明する上で、効率のよいHEVの増殖系を確立することが望まれている。本研究では、HEVの構造蛋白領域をレポーター遺伝子に置き換えたレプリコンの樹立に成功し、このHEVレプリコンの複製増殖系を用いて化合物ライブラリのスクリーニングを行い、複数の阻害活性を有する化合物を同定した。培養細胞へのHEV感染後に上記の薬剤を作用させたところ、HEV増殖抑制作用を示すことが知られているリバビリンと同程度あるいはそれよりも強いウイルス増殖抑制活性を示す化合物を見出すことができた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

近年の研究から、E型肝炎は希少な輸入感染症ではなく、我が国においても常に流行の危険は存在すると考えられ、日本でも予防、治療研究への真剣な取り組みが必要になってきていると言える。HEVは慢性化しないため、薬剤としては急性期にウイルス増殖を阻害する薬剤が強く望まれる。構築したHEVレプリコンを用いてHEV増殖阻害剤のスクリーニングを行った化合物ライブラリには、すでに実用化されている薬剤のライブラリも存在するため、見出された化合物はすぐに急性E型肝炎治療薬として応用できる可能性がある。また、これらの阻害剤の阻害メカニズムの解析は、HEVの病原性の解析に重要な手がかりとなる可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Detection of Subgenotype IA and IIIA Hepatitis A Viruses in Rivers Flowing through Metro Manila, the Philippines (2019)
  • 著者名/発表者名: Bai Huimin、Shiota Tomoyuki、Yoshizaki Sayaka、Saito-Obata Mariko、Malbas, Jr Fedelino F.、Lupisan Socorro P.、Oshitani Hitoshi、Takeda Naokazu、Muramatsu Masamichi、Wakita Takaji、Ishii Koji、Li Tian-Cheng
  • 雑誌名: Japanese Journal of Infectious Diseases 巻: 72 号: 1 ページ: 53-55
  • DOI: 10.7883/yoken.JJID.2018.148
  • NAID: 130007577801
  • ISSN: 1344-6304, 1884-2836
  • 年月日: 2019-01-31
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] A Cluster of Hepatitis A Infections Presumed to be Related to Asari Clams and Investigation of the Spread of Viral Contamination from Asari Clams (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsukada R., Ono S., Kobayashi H., Wada Y., Nishizawa K., Fujii M., Takeuchi M., Kuroiwa K., Kobayashi Y., Ishii K. and Nakazawa H.
  • 雑誌名: Japanese Journal of Infectious Diseases 巻: 72 号: 1 ページ: 44-48
  • DOI: 10.7883/yoken.JJID.2018.279
  • NAID: 130007577808
  • ISSN: 1344-6304, 1884-2836
  • 年月日: 2019-01-31
• [雑誌論文] Epidermal growth factor receptor is a host entry cofactor triggering hepatitis B virus internalization (2019)
  • 著者名/発表者名: M. Iwamoto, W. Saso, R. Sugiyama, K. Ishii, M. Ohki, S. Nagamori, R. Suzuki, H. Aizaki, A. Ryo, J-H Yun, S-Y Park, N. Ohtani, M. Muramatsu, S. Iwami, Y. Tanaka, C. Sureau, T. Wakita and K. Watashi
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 巻: 116 号: 17 ページ: 8487-8492
  • DOI: 10.1073/pnas.1811064116
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] High prevalence of hepatitis E virus infection among domestic pigs in Ibaraki Prefecture, Japan. (2019)
  • 著者名/発表者名: Motoya T., Umezawa M., Goto K., Doi I., Nagata N., Ikeda Y., Sakuta A., Sasaki N. and Ishii K.
  • 雑誌名: BMC Veterinary Research 巻: 15 号: 1 ページ: 219-219
  • DOI: 10.1186/s12917-019-1816-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple antiviral activities of the antimalarial and anti-hepatitis C drug candidates N-89 and N-251 (2018)
  • 著者名/発表者名: Ueda Youki、Gu Weilin、Dansako Hiromichi、Kim Hye-Sook、Yoshizaki Sayaka、Okumura Nobuaki、Ishikawa Tomohiro、Nishitsuji Hironori、Kato Fumihiro、Hishiki Takayuki、Satoh Shinya、Ishii Koji、Masuda Michiaki、Shimotohno Kunitada、Ikeda Masanori、Kato Nobuyuki
  • 雑誌名: Biochemistry and Biophysics Reports 巻: 15 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1016/j.bbrep.2018.05.007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Equine-like G3 rotavirus strains as predominant strains among children in Indonesia in 2015?2016 (2018)
  • 著者名/発表者名: Utsumi Takako、Wahyuni Rury Mega、Doan Yen Hai、Dinana Zayyin、Soegijanto Soegeng、Fujii Yoshiki、Juniastuti、Yamani Laura Navika、Matsui Chieko、Deng Lin、Abe Takayuki、Soetjipto、Lusida Maria Inge、Ishii Koji、Shimizu Hiroyuki、Katayama Kazuhiko、Shoji Ikuo
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 61 ページ: 224-228
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2018.03.027
  • NAID: 120006541938
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Evaluation of Heating Conditions for Inactivation of Hepatitis E Virus Genotypes 3 and 4. (2018)
  • 著者名/発表者名: IMAGAWA T, SUGIYAMA R, SHIOTA T, LI TC, YOSHIZAKI S, WAKITA T, AND ISHII K.
  • 雑誌名: Journal of Food Protection 巻: 81(6) 号: 6 ページ: 947-952
  • DOI: 10.4315/0362-028x.jfp-17-290
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] ステロイドパルス療法を施行した遺伝子型IIIAのA型急性肝炎の1例 (2018)
  • 著者名/発表者名: 堂免和文、田中博文、小野原伸也、石井孝司、高橋和明、下田慎治
  • 雑誌名: 肝臓 巻: 59 ページ: 481-487
  • 査読あり
• [雑誌論文] A型肝炎の最新の動向 (2018)
  • 著者名/発表者名: 神田達郎、松本直樹、中村仁美、山名陽一郎、水谷 卓、高橋 央、金子朋弘、有間修平、金澤芯依、上村慎也、樋口晃久、楡井和重、山上裕晃、松岡俊一、石井孝司、森山光彦
  • 雑誌名: 消化器・肝臓内科 巻: 4 ページ: 135-140
• [雑誌論文] Interferon sensitivity-determining region of hepatitis C virus influences virus production and interferon signaling (2017)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama R., Murayama A., Nitta S., Yamada N., Tasaka-Fujita M., Masaki T., Aly H. H., Shiina M., Ryo A., Ishii K., Wakita T. and Kato T.
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9 号: 5 ページ: 5627-5640
  • DOI: 10.18632/oncotarget.23562
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Immunogenicity of aluminum-adsorbed hepatitis A vaccine (Havrix) administered as a third dose after primary doses of Japanese aluminum-free hepatitis A vaccine (Aimmugen) for Japanese travelers to endemic countries (2017)
  • 著者名/発表者名: Fukushima S., Kiyohara T., Ishii K., Nakano T. and Hamada A.
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 35 号: 47 ページ: 6412-6415
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2017.10.002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Genetic and physicochemical analyses of a novel ferret hepatitis E virus, and clinical signs of infection after birth (2017)
  • 著者名/発表者名: Li T.C., Yoshizaki S., Kataoka M., Ami Y., Suzaki Y., Doan Y.H., Haga K., Ishii K., Takeda N. and Wakita T.
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 25 ページ: 153-159
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2017.03.026
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] B型肝炎疫学の最新状況 (2017)
  • 著者名/発表者名: 相崎英樹、Zheng Xin、石井孝司、脇田隆字、砂川富正、大石和徳、吉岡健太郎
  • 雑誌名: 消化器・肝臓内科 巻: 1 ページ: 390-397
• [雑誌論文] A型肝炎のウイルス学 (2017)
  • 著者名/発表者名: 結城（平井）明香、石井孝司
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 巻: 262 ページ: 1257-1263
• [雑誌論文] An Outbreak of Acute Hepatitis Caused by Genotype IB Hepatitis A Viruses Contaminating the Water Supply in Thailand (2017)
  • 著者名/発表者名: Ruchusatsawat K., Wongpiyabovorn J., Kawidam C., Thiemsing L., Sangkitporn S., Yoshizaki S., Tatsumi M., Takeda N. and Ishii K.
  • 雑誌名: Intervirology 巻: 59 号: 4 ページ: 197-203
  • DOI: 10.1159/000455856
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Induction of humoural and cellular immunity by immunisation with HCV particle vaccine in a non-human primate model (2016)
  • 著者名/発表者名: Yokokawa H., Higashino A., Suzuki S., Moriyama M., Nakamura N., Suzuki T., Suzuki R., Ishii K., Kobiyama K., Ishii KJ., Wakita T., Akari H. and Kato T.
  • 雑誌名: Gut 巻: in press 号: 2 ページ: 372-379
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2016-312208
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Clinical features and transmission pattern of hepatitis A: an experience from a hepatitis A outbreak caused by two co-circulating genotypes in Sri Lanka (2016)
  • 著者名/発表者名: Dahanayaka N., Kiyohara T., Agampodi S., Samaraweera P., Kulasooriya G., Ranasinghe J., Semage S., Yoshizaki S., Wakita T. and Ishii K.
  • 雑誌名: American Journal of Tropical Medicine and Hygine 巻: 95 号: 4 ページ: 908-914
  • DOI: 10.4269/ajtmh.16-0221
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Chronic Hepatitis E Infection in a Persistently Immunosuppressed Patient Unable to Be Eliminated after Ribavirin Therapy (2016)
  • 著者名/発表者名: Miyoshi M., Kakinuma S., Tanabe Y., Ishii K., Li T.C., Wakita T,, Tsuura Y., Watanabe H., Asahina Y., Watanabe M. and Ikeda T.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 55 号: 19 ページ: 2811-2817
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.55.7025
  • NAID: 130005605876
  • ISSN: 0918-2918, 1349-7235
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Ferret Hepatitis E Virus Infection Induces Acute Hepatitis and Persistent Infection in Ferrets (2016)
  • 著者名/発表者名: Li Tiancheng, Yang T, Sayaka Yoshizaki, Kataoka M, Ami Y, Suzaki Y, Kishida N, Shirakura M, Imai M, Asanuma H, Takeda N, Wakita T
  • 雑誌名: Vet Microbiol 巻: 183 ページ: 30-36
  • DOI: 10.1016/j.vetmic.2015.11.014
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] E型肝炎の増加と今後の対策 (2016)
  • 著者名/発表者名: 石井孝司
  • 雑誌名: 検査と技術 巻: 44 ページ: 1138-1141
• [雑誌論文] The high prevalence of hepatitis E virus infection in wild boars in Ibaraki Prefecture, Japan (2015)
  • 著者名/発表者名: Motoya T., Nagata N., Komori H., Doi I., Kurosawa M., Keta T., Sasaki N and Ishii K.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 77 号: 12 ページ: 1705-1709
  • DOI: 10.1292/jvms.15-0173
  • NAID: 130005115323
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] Identification of host kinases that regulate hepatitis B virus internalization. (2018)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto M., Saso W., Sugiyama R., Ishii K., Suzuki R., Aizaki H., Ryo A., Ohtani N., Muramatsu M., Iwami S., Tanaka Y., Wakita T. and Watashi K.
  • 学会等名: The 66th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
  • 国際学会
• [学会発表] A型肝炎ワクチン接種後のサロゲートマーカーに関する検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 福島慎二、清原知子、石井孝司、中野貴司、濱田篤郎
  • 学会等名: 第２２回日本ワクチン学会
• [学会発表] カニクイザルでのH7N9 鳥インフルエンザHAタンパク質発現組換えワクシニアワクチンの発症防御効果の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 山地賢三郎、安井文彦、伊藤 靖、鈴木紗織、本田智子、山本直樹、真田崇弘、石垣宏仁、石井孝司、小笠原一誠、小原道法
  • 学会等名: 第２２回日本ワクチン学会
• [学会発表] 豚におけるE型肝炎ウイルスの感染実態について (2018)
  • 著者名/発表者名: 本谷 匠、梅澤昌弘、後藤慶子、土井育子、永田紀子、石井孝司
  • 学会等名: 平成３０年度関東・東京合同地区獣医師大会・三学会
• [学会発表] 抗マラリア及び抗HCV薬候補N-89とN-251が有する幅広い抗ウイルス活性 (2018)
  • 著者名/発表者名: 上田優輝、Gu Weilin、團迫浩方、金 惠淑、吉崎佐矢香、奥村暢章、石川知弘、西辻裕紀、加藤文博、日紫喜隆行、佐藤伸哉、石井孝司、増田道明、下遠野邦忠、池田正徳、加藤宣之
  • 学会等名: 第２８回抗ウイルス療法学会学術集会
• [学会発表] Prevalence of hepatitis E virus in pigs in Japan. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishii K., Yoshizaki S., Li T.C. and Wakita T.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
• [学会発表] Investigation of heat conditions to inactivate hepatitis E virus. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama R., Imagawa T., Shiota T., Li T.C., Yoshizaki S., Wakita T. and Ishii K.
  • 学会等名: The 65th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
• [学会発表] A型肝炎の血清疫学 (2017)
  • 著者名/発表者名: 清原知子、石井孝司、脇田隆字、佐竹正博
  • 学会等名: 第２１回日本ワクチン学会
• [学会発表] E型肝炎の最近の動向と対策 (2017)
  • 著者名/発表者名: 石井孝司
  • 学会等名: 平成２９年度岩手県獣医師会公衆衛生部会
  • 招待講演
• [学会発表] Epidemiological and genetic analyses of recent hepatitis A virus infection in Japan (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishii K.
  • 学会等名: The 10th China-Japan-Korea Forum for Communicable Disease Control and Prevention
  • 発表場所: Beijing, China
  • 年月日: 2016-12-19
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] A型肝炎とE型肝炎の動向と対策 (2016)
  • 著者名/発表者名: 石井孝司
  • 学会等名: 平成２８年度新潟県臨床検査技師会研修会
  • 発表場所: 新潟市
  • 年月日: 2016-12-10
  • 招待講演
• [学会発表] Epidemiology and molecular genetic analysis of hepatitis A in Japan (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishii K.
  • 学会等名: 中日合作交流成果報告会
  • 発表場所: Guangzhou, China
  • 年月日: 2016-12-06
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 日本におけるＡ型肝炎、Ｅ型肝炎の最近の話題 (2016)
  • 著者名/発表者名: 石井孝司
  • 学会等名: 平成２８年度静岡県獣医師会公衆衛生部会
  • 発表場所: 静岡市
  • 年月日: 2016-10-29
  • 招待講演
• [学会発表] Molecular characterization of the hepatitis E virus receptor candidate. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shiota T., Li T.C., Yoshizaki S., Nishimura Y., Shimizu H., Shimojima M., Saijo M., Wakita T. and Ishii K.
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 2016-10-23
  • 国際学会
• [学会発表] Heat inactivation of Hepatitis E virus. (2016)
  • 著者名/発表者名: Imagawa T., Li T.C., Shiota T.,Yoshizaki S., Ishii K. and Wakita T.
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the Japanese Society for Virology
  • 発表場所: Sapporo, Japan
  • 年月日: 2016-10-23
  • 国際学会
• [学会発表] ワクチニアウイルスDIs株を母体としたインフルエンザHA組換えワクチンのカニクイザルでの発症防御効果の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 宗片圭祐、安井文彦、伊藤 靖、石井孝司、喜田 宏、小笠原一誠、小原道法
  • 学会等名: 第２０回日本ワクチン学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2016-10-22
• [学会発表] Characterization of the hepatitis E virus receptor candidate. (2016)
  • 著者名/発表者名: Shiota T., Li T.C., Yoshizaki S., Nishimura Y., Shimizu H., Shimojima M., Saijo M., Wakita T. and Ishii K.
  • 学会等名: 23rd International Meeting on HCV and Related Viruses
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 2016-10-11
  • 国際学会