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抗体磁性ナノ粒子と質量分析法の連結によるカルバペネム耐性菌迅速検査システムの構築

研究課題

研究課題/領域番号 16K08966
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 病態検査学
研究機関名古屋大学

研究代表者

川村 久美子  名古屋大学, 医学系研究科(保健), 准教授 (30335054)

研究分担者 石田 康行  中部大学, 応用生物学部, 教授 (70273266)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2018年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2017年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワード腸内細菌科菌種 / カルバペネマーゼ産生菌 / マトリックス支援レーザー脱イオン化質量分析法 / 磁性ナノ粒子 / 特異抗体 / 耐性菌迅速検査システム / マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析法 / 抗体磁性ナノ粒子 / 質量分析法 / カルバペネム耐性菌 / 迅速検査システム
研究成果の概要

4種類(IMP型、VIM型、NDM型、KPC型)のカルバペネマーゼを産生する大腸菌および肺炎桿菌を対象とした。抗体磁性ナノビーズ(Dynabeads M-280)による捕集系では、捕集前に1% Triton X-100と10mM 塩化カルシウムによる前処理を追加することで捕集の精度を高めることができた。検出系ではマトリックス試薬にα-CHCAを用いて条件を最適化することで、主ピークm/z:3000-11000に菌体そのものと同じ質量スペクトルを得た。さらに、臨床分離株45株を用いた解析では、44株を正確に検出同定することができた。以上のように本研究で新しい耐性菌迅速検査システムを構築した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本成果の学術的意義は、カルバペネマーゼの種類や亜型、また対象菌種に左右されることなくカルバペネマーゼ産生菌を検出できることである。さらに検出系のMALDI-TOF MSはランニングコストが安価で、処理能力が高いことから、すでに多くの検査室で汎用されており、今回提案した抗体磁性ナノビーズによる菌の捕集と連結させることも容易である。抗体磁性ナノビーズによる菌の捕集は特別なスキルを必要としない簡便な方法であるため、導入による検査室への負担はない。菌種同定の際に薬剤耐性菌情報を得ることができれば、治療効果の向上に貢献するという社会的意義を果たすのみならず、経費節減や業務量の軽減にもつながると思われる。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (30件)

すべて 2019 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 9件、 オープンアクセス 5件) 学会発表 (20件) (うち招待講演 1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Spread of seb-Positive Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus SCCmec Type II-ST764 Among Elderly Japanese in Nonacute Care Settings2019

    • 著者名/発表者名
      Kawamura K, Kitaoka K, Kimura K, Wachino J, Kondo T, IinumaY, Murakami N, Fujimoto S, Arakawa Y.
    • 雑誌名

      Microbial Drug Resistance

      巻: - 号: 6 ページ: 915-924

    • DOI

      10.1089/mdr.2018.0337

    • NAID

      120006650159

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] High prevalence of blaCTX-M-14 among genetically diverse Escherichia coli recovered from retail raw chicken meat portions in Japan.2018

    • 著者名/発表者名
      Hayashi W, Ohsaki Y, Taniguchi Y, Koide S, Kawamura K, Suzuki M, Kimura K, Wachino J, Nagano Y, Arakawa Y, Nogano N.
    • 雑誌名

      International Journal of Food Microbiology

      巻: 284 ページ: 98-104

    • DOI

      10.1016/j.ijfoodmicro.2018.08.003

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Prevalence of CTX-M-type extended-spectrum β-lactamase-producing Escherichia coli B2-O25-ST131 H30R among residents in nonactute care facilities in Japan.2018

    • 著者名/発表者名
      Kawamura K, Hayashi K, Matsuo Nao, Kitaoka, Kimura K, Wachino J, Kondo T, IinumaY, Murakami N, Fujimoto S, Arakawa Y.
    • 雑誌名

      Microbial Drug Resistance

      巻: - 号: 10 ページ: 1513-1520

    • DOI

      10.1089/mdr.2018.0068

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of <i>Escherichia coli</i> Producing CTX-M-1-Group Extended-Spectrum β-Lactamases from Pigs in Aichi Prefecture, Japan, between 2015 and 20162018

    • 著者名/発表者名
      Chihiro Norizuki, Kumiko Kawamura, Jun-ichi Wachino, Masahiro Suzuki, Noriyuki Nagano, Takaaki Kondo, Yoshichika Arakawa.
    • 雑誌名

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      巻: 71 号: 1 ページ: 33-38

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2017.206

    • NAID

      130006317356

    • ISSN
      1344-6304, 1884-2836
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] ESBL-producing Escherichia coli and its rapid rise among healthy people.2018

    • 著者名/発表者名
      Kumiko Kawamura, Noriyuki Nagano, Masahiro Suzuki, Jun-ichi Wachino, Kouji Kimura, Yoshichika Arakawa
    • 雑誌名

      Food Safety

      巻: 5 (4) ページ: 122-150

    • NAID

      130006292482

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] First Detection of an <i>Escherichia coli</i> Strain Harboring the <i>mcr-1</i> Gene in Retail Domestic Chicken Meat in Japan2017

    • 著者名/発表者名
      Yusuke Ohsaki, Wataru Hayashi, Satomi Saito, Shunsuke Osaka, Yui Taniguchi, Shota Koide, Kumiko Kawamura, Yukiko Nagano, Yoshichika Arakawa, Noriyuki Nagano
    • 雑誌名

      Japanese Journal of Infectious Diseases

      巻: 70 号: 5 ページ: 590-592

    • DOI

      10.7883/yoken.JJID.2016.572

    • NAID

      130006096729

    • ISSN
      1344-6304, 1884-2836
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Specific blaCTX-M-8/IncI1 Plasmid Transfer among Genetically Diverse Escherichia coli across Humans and Chickens.2017

    • 著者名/発表者名
      Chihiro Norizuki, Jun-ichi Wachino, Masahiro Suzuki, Noriyuki Nagano, Kumiko Kawamura, Yoshichika Arakawa
    • 雑誌名

      Antimicrob Agents Chemother

      巻: 印刷中 号: 6 ページ: 1-7

    • DOI

      10.1128/aac.00663-17

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Spread of CTX-Type Extended-Spectrum b-Lactamase-Producing Escherichia coli Isolates of Epidemic Clone B2-O25-ST131 Among Dogs and Cats in Japan2017

    • 著者名/発表者名
      Kumiko Kawamura, Tae Sugawara, Nao Matsuo, Kengo Hayashi, Chihiro Norizuki, Kiyoko Tamai, Takaaki Kondo,Yoshichika Arakawa
    • 雑誌名

      Microbial Drug Resistance

      巻: 印刷中 号: 8 ページ: 1059-1066

    • DOI

      10.1089/mdr.2016.0246

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Reduction in chlorhexidine efficacy against multi-drug resistant Acinetobacter baumannii international clone II2017

    • 著者名/発表者名
      Michiko Hayashi, Kumiko Kawamura, Mari Matsui, Masato Suzuki, Satowa Suzuki, Keigo Shibayama, Yoshichika Arakawa
    • 雑誌名

      Journal of Hospital Infection

      巻: 95(3) 号: 3 ページ: 318-323

    • DOI

      10.1016/j.jhin.2016.12.004

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 高齢者介護施設入所者等から分離された基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ(CTX-M-27)産生大腸菌が保有するプラスミドの網羅的解析2019

    • 著者名/発表者名
      川村久美子、藤本修平、村上啓雄、飯沼由嗣、荒川宜親
    • 学会等名
      第93回日本感染症学会総会 学術講演会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 在宅医療患者および高齢者施設入所者から分離された基質特異性拡張型 β-ラクタマーゼ(CTX-M-27)産生大腸菌が保有するプラスミドの解析2019

    • 著者名/発表者名
      松尾奈緒、林謙吾、藤本修平、村上啓雄、飯沼由嗣、荒川宜親、川村久美子
    • 学会等名
      第30回日本臨床微生物学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 次世代シーケンス解析によるKlebsiella pneumoniaeの遺伝学的解析2019

    • 著者名/発表者名
      飯島杏奈、鈴木匡弘、川村久美子、土井洋平、荒川宜親
    • 学会等名
      第30回日本臨床微生物学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 在宅医療患者および高齢者介護施設入所者から分離された基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ(CTX-M-27)産生大腸菌が保有するプラスミドの解析2018

    • 著者名/発表者名
      松尾奈緒、林謙吾、藤本修平、村上啓雄、飯沼由嗣、荒川宜親、川村久美子
    • 学会等名
      第47回薬剤耐性菌研究会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 基質特異性拡張型β-lactamase産生肺炎桿菌の次世代シークエンスによる網羅的解析2018

    • 著者名/発表者名
      野々垣里奈、飯島杏奈、鈴木匡弘、荒川宜親、川村久美子
    • 学会等名
      第47回薬剤耐性菌研究会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 次世代シークエンス解析によるKlebsiella pneumoniaeの遺伝的解析2018

    • 著者名/発表者名
      飯島杏奈、鈴木匡弘、川村久美子、土井洋平、荒川宜親
    • 学会等名
      第47回薬剤耐性菌研究会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 大腸菌ST131 H30R1に順応したIncF[F1:A2:B20]プラスミドがblaCTX-M-14の安定的保持に関与する2018

    • 著者名/発表者名
      林美智子、鈴木里和、松井真理、関塚剛史、山下明史、加藤健吾、川村久美子、柴山恵吾、黒田誠
    • 学会等名
      第91回 日本細菌学会総会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] Klebsiella pneumoniae臨床分離株の分子疫学解析2018

    • 著者名/発表者名
      飯島杏奈、鈴木匡弘、土井洋平、川村久美子、荒川宜親
    • 学会等名
      第29回日本臨床微生物学会総会 学術集会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 国産豚腸内容物から分離されたCTX-M-型基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ産生大腸菌の分子疫学解析2018

    • 著者名/発表者名
      法月千尋、和知野純一、鈴木匡弘、荒川宜親、川村久美子
    • 学会等名
      第29回日本臨床微生物学会総会 学術集会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 愛知県下3施設の在宅医療患者等における基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ産生大腸菌の保菌率と分子疫学解析2018

    • 著者名/発表者名
      林謙吾、川村久美子、松尾奈緒、飯沼由嗣、村上啓雄、藤本修平、荒川宜親
    • 学会等名
      第29回日本臨床微生物学会総会 学術集会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 国内のペットにおける大腸菌B2-O25-ST131 CTX-M型基質拡張型β-ラクタマーゼ産生株の拡散2017

    • 著者名/発表者名
      林謙吾, 法月千尋, 玉井清子, 荒川宜親, 川村久美子
    • 学会等名
      第28回 日本臨床微生物学会総会 学術集会
    • 発表場所
      長崎
    • 年月日
      2017-01-20
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 健常人および鶏肉間におけるCTX-M-8 ESBL遺伝子の水平伝播はIncI1/ST113により媒介される2017

    • 著者名/発表者名
      法月千尋、和知野純一、鈴木匡弘、川村久美子、荒川宜親
    • 学会等名
      第46回 薬剤耐性菌研究会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 在宅医療患者および介護施設入所者等における基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ産生大腸菌の保菌率と分子疫学解析2017

    • 著者名/発表者名
      林謙吾、川村久美子、北岡一樹、木村幸司、和知野純一、飯沼由嗣、 村上啓雄、藤本修平、荒川宜親
    • 学会等名
      第46回 薬剤耐性菌研究会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] ヒト、家畜、食品等より分離されたESBL産生菌の分子疫学的特徴2017

    • 著者名/発表者名
      川村久美子
    • 学会等名
      第54回 日本細菌学会中部支部総会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 健常人および鶏肉間におけるCTX-M-8 ESBL遺伝子の水平伝播はIncI1/ST113により媒介される2017

    • 著者名/発表者名
      法月千尋、和知野純一、鈴木匡弘、川村久美子、荒川宜親
    • 学会等名
      第54回 日本細菌学会中部支部総会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 在宅医療患者および介護施設入所者等における薬剤耐性菌の保菌率およびその分子疫学解析2017

    • 著者名/発表者名
      林 謙吾、川村久美子、北岡一樹、木村幸司、和知野純一、飯沼由嗣、 村上啓雄、藤本修平、荒川宜親
    • 学会等名
      第54回 日本細菌学会中部支部総会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 大腸菌由来CTX-M型β-ラクタマーゼ遺伝子保有IncI1プラスミドの系統ネットワーク解析2017

    • 著者名/発表者名
      鈴木匡弘、和知野純一、法月千尋、川村久美子、長野紀之、荒川宜親
    • 学会等名
      第54回 日本細菌学会中部支部総会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] アタッチメント式抗体磁性ビーズプローブ-MALDI-MSによる細菌の分類と消毒薬耐性の有無の簡易判別2017

    • 著者名/発表者名
      石田康行、岩間安奈、牧野朱里、川村久美子、角出泰造
    • 学会等名
      第22回高分子分析討論会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 国産豚から分離されたCTX-M-型基質拡張型β-ラクタマーゼ産生大腸菌の分子疫学解析2016

    • 著者名/発表者名
      法月千尋、川村久美子、和知野純一、鈴木匡弘、荒川宜親
    • 学会等名
      第45回薬剤耐性菌研究会
    • 発表場所
      広島
    • 年月日
      2016-10-21
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 国内のペットにおける大腸菌B2-O25-ST131 CTX-M型基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ産生大腸菌の拡散2016

    • 著者名/発表者名
      林謙吾、川村久美子、法月千尋、玉井清子、荒川宜親
    • 学会等名
      第45回薬剤耐性菌研究会
    • 発表場所
      広島
    • 年月日
      2016-10-21
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [図書] 感染と抗菌薬2017

    • 著者名/発表者名
      川村久美子、荒川宜親
    • 総ページ数
      7
    • 出版者
      ヴァン メディカル
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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