| 研究課題/領域番号 |
16K09623
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
草場 哲郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60367365)
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| 研究分担者 |
上 大介 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80415588)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2018年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2017年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2016年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
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| キーワード | 腎臓 / 遺伝子改変 / CRISPR/Cas9 / in vivo gene editing / CRISPR Cas9 / Cre LoxP |
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| 研究成果の概要 |
本研究ではCRISPR/Cas9システムを用いた腎臓におけるin vivoでの後天的な遺伝子改変方法の確立を試みた。Cas9発現マウスに対して、AAVを腎盂内に投与後に超音波照射法を併用し、がん抑制遺伝子であるLkb1、p53を機能消失させ、癌促進遺伝子であるKRASを持続活性化することで発癌を誘導する遺伝子改変を行ったところ、腎内に複数の異型細胞の集簇が見られた。しかしながら本方法による遺伝子改変効率は低く、今後はその改善が課題と考えられる。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
腎臓病の進展には多くの因子、機序が関わっており、遺伝子治療によりその因子を腎臓だけで制御することを目的に研究を行った。近年開発された新しい遺伝子改変法であるCRISPR/Cas9という方法を用いて、生体腎での遺伝子改変を行うことを試みた。マウスの腎臓に遺伝子改変により癌の発生を誘導するウィルスを注入し、細胞内への取り込みの効率を上昇させる目的で超音波照射を併用した。注入5か月後の腎組織では、核の高度異型を伴う細胞の集簇が腎実質内に散見され、遺伝子改変され腫瘍化したものと考えられた。今後は腎不全治療への応用するために、より効率の高い遺伝子導入、遺伝子改変法を確立する必要がある。
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