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1細胞RNAシークエンスを用いたヒト精子幹細胞ニッチの遺伝子発現解析

研究課題

研究課題/領域番号 16K11067
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 泌尿器科学
研究機関名古屋市立大学

研究代表者

守時 良演  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (50595395)

研究分担者 安井 孝周  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (40326153)
林 祐太郎  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (40238134)
水野 健太郎  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (70448710)
西尾 英紀  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (10621063)
中根 明宏  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (70464568)
神沢 英幸  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (00551277)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2018年度: 390千円 (直接経費: 300千円、間接経費: 90千円)
2017年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2016年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
キーワード精子幹細胞 / RNA-sequence / 停留精巣 / 造精機能障害 / 幹細胞ニッチ / 1細胞RNA-sequence
研究成果の概要

[停留精巣モデルマウスの開発]近年のげっ歯類の精子幹細胞研究は、ほとんどがマウスをモデルとして用いている。そのため、ヒト停留精巣の前に、マウスの停留精巣モデルでRNA-sequenceを行うこととした。最終的には経腹腔アプローチ若年の停留精巣を作成できた。これを用いて停留精巣の萎縮過程の精巣を用いた解析が可能になった。
[微量なmRNAの増幅]1細胞mRNAからcDNAを合成し増幅することを主に行ってきた。最終的に1細胞あたり20copy以上のmRNAは安定的に増幅可能となった。しかしRNA-sequenceを安定的に運用するには残念ながら至っていない。

研究成果の学術的意義や社会的意義

ヒト停留精巣では手術時の精子幹細胞数が、将来の妊孕性と相関している。しかし幼少期になぜ精子幹細胞数が著明に減少するかは明らかではない。私たちのグループはラット停留精巣モデルを開発したが、これまでは精巣全体での大規模解析に留まっている。その理由は、精子幹細胞が精巣の中で0.2~0.3%と非常に少なく、機能的な解析が極めて困難であるためである。精子幹細胞の研究は、妊孕性の改善など臨床に直結するにも関わらず、研究は遅れている。私たちは近年開発された1細胞RNA-seqを用いれば、サンプル量が限られるヒト精巣においても、精子幹細胞維持のメカニズムが解明できるのではないかと考えた。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2019 2017

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Testicular teratoma demanded in‐depth pathological exploration to rule out malignancy: A pediatric case report2019

    • 著者名/発表者名
      Yoshinobu Moritoki Kentaro Mizuno Taiki Kato Shuzo Hamamoto Hideo Hattori Yasuhiko Ito Shinji Saitoh Takahiro Yasui Yutaro Hayashi
    • 雑誌名

      IJU case reports

      巻: 02 March

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 精子幹細胞維持に関与するmiR-135aの同定と機能解析2017

    • 著者名/発表者名
      守時 良演、水野 健太郎、西尾 英紀、加藤 大貴、田口 和己、岡田 淳志、内木 拓、戸澤 啓一、林 祐太郎、安井 孝周
    • 学会等名
      第26回泌尿器科分子・細胞研究会
    • 発表場所
      全労済ソレイユ(大分県大分市)
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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