| 研究課題/領域番号 |
16K14016
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| 研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
分析化学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
小澤 岳昌 東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 教授 (40302806)
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| 連携研究者 |
吉村 英哲 東京大学, 大学院理学系研究科, 助教 (90464205)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2017年度)
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| 配分額 *注記 |
3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2017年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2016年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
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| キーワード | イメージング / 蛍光 / ルシフェラーゼ / 酵素 / 生細胞 |
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| 研究成果の概要 |
特定の一細胞内酵素活性を絶対定量する技術開発を目的として，培養細胞内で遺伝子発現する発光タンパク質（ルシフェラーゼ）に焦点をあて，刺激を加えた時のルシフェラーゼの絶対定量法の確立を目指した．先ず，細胞内ミトコンドリアに局在するBakタンパク質に蛍光タンパク質（mEos3）を連結し，細胞外刺激に伴うBakクラスター形成を確認した．このクラスターに含まれるBak分子数を，mEos3の超解像蛍光イメージング技術を改良することにより計測可能にした．本計測は固定細胞のみならず，生細胞でも可能であることを立証した．mEos3の分子数から，ルシフェラーゼ1分子の活性を評価することが可能となる．
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