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microRNAの画期的な迅速、高感度検出法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 16K14027
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 分析化学
研究機関防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究施設、病院並びに防衛

研究代表者

武井 史恵  防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究施設、病院並びに防衛, 医学教育部, 准教授 (30252711)

連携研究者 中谷 和彦  大阪大学, 産業科学研究所, 教授 (70237303)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2017年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2016年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワードPCR / reverse transcription / fluorescence molecule / miRNA / 蛍光分子 / マイクロRNA / RT-PCR / ヘアピンプローブPCR / HP-PCR / バイオテクノロジー / 有機化学 / 遺伝子
研究成果の概要

本提案ではPCRを基盤とした簡便、高感度なmiRNA検出法の開発を主目的とし、HP-PCR法を使ったmiRNA検出法の開発に関する研究を行なった。microRNAの特徴はその長さであり、長くても25塩基程度しかない。10塩基程度のPCRのプライマーの5’末端に15塩基程度のDNAタグををつけたプライマーを使うと逆転写、PCR共に効率的に進行し、微量のmicroRNAでも検出できることが明らかとなった。またこのタグは、miRNAの蛍光検出にも大きな役割を果たしており、画期的な検出法が開発できた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

microRNA(miRNA)は21-25塩基長の1本鎖RNA分子であり、真核生物において遺伝子の転写後発現調節に関与する。現在ヒトのmiRNAは2500種類以上知られており、様々な疾患や病気に関わっていることが明らかにされている。本提案では、PCRを基盤とした簡便、高感度なmiRNA検出法の開発を目的とし、研究を行なった結果、特殊な技術、試薬がなくても、誰もがmiRNAを検出できる画期的な方法の開発に成功した。今後、miRNAの検出分野において大きな役割を果たすと考えられる。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 7件、 招待講演 1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] PCR under Low Ionic Concentration Buffer Conditions2018

    • 著者名/発表者名
      Takei, F. ; Akiyama, M. ; Nobusawa, K. ; Sabani, Norhayati Binti ; Han, H. ; Nakatani, K. ; Yamashita, I.
    • 雑誌名

      Chemistryselect

      巻: 3 号: 3 ページ: 973-976

    • DOI

      10.1002/slct.201702542

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書 2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fluorescence turn-on hairpin-probe PCR2018

    • 著者名/発表者名
      Takei, F.; Nakatani, K.
    • 雑誌名

      Chem. Commun.

      巻: 53 号: 8 ページ: 1393-1396

    • DOI

      10.1039/c6cc08947j

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Synthesis and photo-physical properties of fluorescence molecular probe for turn-ON type detection of cytosine bulge DNA2016

    • 著者名/発表者名
      Verma, R.; Takei, F.; Nakatani, K.
    • 雑誌名

      Org. Lett.

      巻: 18 号: 13 ページ: 3170-3173

    • DOI

      10.1021/acs.orglett.6b01378

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] Development of novel miRNA detection system using PCR with C-Bulge probe and fluorescence molecule2018

    • 著者名/発表者名
      Fumie Takei, Misaki Akiyama, Asako Murata,Akiko Sugai, Kazuhiko Nakatani, Ichiro Yamashita
    • 学会等名
      第45回国際核酸化学シンポジウム(ISNAC 2018)/日本核酸化学会第2回年会 ISNAC2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] A novel miRNA detection system using PCR with DNA probe and fluorescence molecule.2018

    • 著者名/発表者名
      Fumie Takei, Misaki Akiyama, Asako Murata,Akiko Sugai, Kazuhiko Nakatani, Ichiro Yamashita
    • 学会等名
      IWSBN2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 低塩濃度におけるアレル特異的PCR法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      武井史恵,秋山美咲,信澤和幸, Norhayati Binti Sabani, 韓 煥文, 中谷和彦, 山下一郎
    • 学会等名
      第64回応用物理学会春季学術講演会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2017-03-14
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Polymerase Chain Reaction (PCR) under low ionic strength2017

    • 著者名/発表者名
      H. Han, F. Takei, M. Akiyama, K. Nobusawa, N. B. Sabani, K. Nakatani, I. Yamashita
    • 学会等名
      第64回応用物理学会春季学術講演会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2017-03-14
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] The PCR amplification limit under low ionic conditions2017

    • 著者名/発表者名
      Huan-wen Han,Kazuyuki Nobusawa, Fumie Takei, Norhayati Binti Sabani, Ichiro Yamashita, Kazuhiko Nakatani
    • 学会等名
      9th International Conference on Molecular Electronics and Bioelectronics (M&BE9)
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] PCR primer detection via molecular recognition by surface modified molecular ligand2017

    • 著者名/発表者名
      Kazuyuki Nobusawa, Fumie Takei, Norhayati Binti Sabani, Huan-wen Han, Ichiro Yamashita, Kazuhiko Nakatani
    • 学会等名
      9th International Conference on Molecular Electronics and Bioelectronics (M&BE9)
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Development of a SNP typing in the low ionic PCR condition2017

    • 著者名/発表者名
      Fumie Takei, Misaki Akiyama, Kazuyuki Nobusawa, Norhayati Binti Sabani, Huanwen Han, Kazuhiko Nakatani, Ichiro Yamashita
    • 学会等名
      9th International Conference on Molecular Electronics and Bioelectronics (M&BE9)
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] A new idea of PCR progress monitoring by Electrochemical Impedance Spectroscopy (EIS): combination of ligands and hairpin primer2017

    • 著者名/発表者名
      Huanwen Han, Norhayati Binti Sabani, Kazuyuki Nobusawa, Fumie Takei, Kazuhiko Nakatani, Ichiro Yamashita
    • 学会等名
      IWSBN2017
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Design of ligand for sensing: the combination of hairpin primer DANP ligand.2017

    • 著者名/発表者名
      Fumie Takei, Misaki Akiyama, Kazuyuki Nobusawa, Norhayati Binti Sabani, Kazuhiko Nakatani, Ichiro Yamashita,
    • 学会等名
      IWSBN2017
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 1つの蛍光分子とDNAの特殊構造によって開発されたDNA増幅反応2017

    • 著者名/発表者名
      武井史恵
    • 学会等名
      第30回産研技術室講演会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Development of the allele specific PCR under the low ion PCR condition,2 Kazuhiko Nakatani,2 Ichiro Yamashita2016

    • 著者名/発表者名
      F. Takei, M. Akiyama, K. Nobusawa, N. B. Sabani, K. Nakatani, I. Yamashita
    • 学会等名
      The 43rd International Symposium on Nucleic Acids Chemistry
    • 発表場所
      熊本大学
    • 年月日
      2016-09-27
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [産業財産権] miRNA用プライマー及び該プライマーを用いた核酸増幅反応法2018

    • 発明者名
      武井 史恵
    • 権利者名
      武井 史恵
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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