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代謝工学による6ナイロンモノマーの微生物生産

研究課題

研究課題/領域番号 16K14493
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関兵庫県立大学

研究代表者

根来 誠司  兵庫県立大学, 工学研究科, 教授 (90156159)

研究協力者 武尾 正弘  
加藤 太一郎  
竹原 一起  
藤井 翼  
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円)
2018年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2017年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
キーワードナイロン / 代謝工学 / 6アミノヘキサン酸 / 6-アミノヘキサン酸 / アジピン酸 / アミノトランスフェラーゼ / ピリドキサルリン酸 / 4-アミノ酪酸 / 6-アミノヘキサン酸 / 代謝経路 / Arthrobacter / 廃棄物再資源化 / 環境材料 / バイオテクノロジー
研究成果の概要

国内外でポリマーの再資源化やモノマーのバイオ生産が重要視されている。Arthrobacter sp. KI72株はナイロンオリゴマー分解酵素NylA/NylB/NylCにより、6-アミノヘキサン酸(Ahx)オリゴマーをAhxまで分解する。Ahxはアミノトランスフェラーゼ(NylD)によりアジピン酸セミアルデヒドに変換され、その後、デヒドロゲナーゼ(NylE)によりアジピン酸へと代謝されること、ⅱ)NylDについては2種、NylEについては20種の類似遺伝子が認められること、ⅲ)NylD1,NylE1を共役させた反応系により、Ahxは約90%の変換率でアジピン酸へ変換されることを明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究は、繊維・プラスチックとして広く用いられているナイロンについて、6ナイロンの構成単位である6-アミノヘキサン酸の微生物代謝経路の解明、関連酵素群の取得と機能改良について、検討を行ったものである。特に、6-アミノヘキサン酸の代謝については、以前の研究例がなかったが、モノマー代謝の初段階に関与する2種類の酵素(アミノ基転移酵素と脱水素酵素)を用いて、6-アミノヘキサン酸が、90%以上の収率でアジピン酸へ変換できることが明らかとなった。本研究からNylA-E酵素群を統合的に用いることで、高収率で、6ナイロンを、66ナイロン原料であるアジピン酸まで変換可能である可能性を示すことができた。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (27件)

すべて 2018 2017 2016

すべて 雑誌論文 (7件) (うち国際共著 2件、 査読あり 7件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (20件) (うち国際学会 2件、 招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Stability and subunit assembly of nylon hydrolase: structural basis of correct subunit assembly, aggregation, and intracellular degradation of the precursor protein2018

    • 著者名/発表者名
      Seiji Negoro, Naoki Shibata, Young-Ho Lee, Ikki Takehara, Ryo Kinugasa, Keisuke Nagai, Yusuke Tanaka, Dai-ichiro Kato, Masahiro Takeo, Yuji Goto and Yoshiki Higuchi
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 8 号: 1 ページ: 9725-9725

    • DOI

      10.1038/s41598-018-27860-w

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Characterization of the 3-methyl-4-nitrophenol degradation pathway and genes of Pseudomonas sp. strain TSN1.2018

    • 著者名/発表者名
      Takeo M, Yamamoto K, Sonoyama M, Miyanaga K, Kanbara N, Honda K, Kato DI, Negoro S.
    • 雑誌名

      J Biosci Bioeng

      巻: 126 号: 3 ページ: 355-362

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2018.04.001

    • NAID

      40021667183

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Biosynthetic Pathway and Genes of Chitin/Chitosan-Like Bioflocculant in the Genus Citrobacter.2018

    • 著者名/発表者名
      Takeo M, Kimura K, Mayilraj S, Inoue T, Tada S, Miyamoto K, Kashiwa M, Ikemoto K, Baranwal P, Kato D, Negoro S.
    • 雑誌名

      Polymers (Basel).

      巻: 10 号: 3 ページ: 237-237

    • DOI

      10.3390/polym10030237

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Metabolic pathway of 6-aminohexanoate in the nylon oligomer-degrading bacterium Arthrobacter sp. KI72: identification of the enzymes responsible for the conversion of 6-aminohexanoate to adipate2018

    • 著者名/発表者名
      Takehara I, Fujii T, Tanimoto Y, Kato DI, Takeo M, Negoro S
    • 雑誌名

      Appl Microbiol Biotechnol

      巻: 102 号: 2 ページ: 801-814

    • DOI

      10.1007/s00253-017-8657-y

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書 2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Draft genome sequence of the nylon oligomer-degrading bacterium Arthrobacter sp. strain KI722017

    • 著者名/発表者名
      Takehara I, Kato D, Takeo M, Negoro S
    • 雑誌名

      Genome A

      巻: 217 号: 17 ページ: 17-17

    • DOI

      10.1128/genomea.00217-17

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書 2016 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Biosynthesis-inspired deracemizative production of d-luciferin by combining luciferase and thioesterase2017

    • 著者名/発表者名
      Maeda J, Kato DI, Okuda M, Takeo M, Negoro S, Arima K, Ito Y, Niwa K
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta

      巻: 1861 号: 8 ページ: 2112-2118

    • DOI

      10.1016/j.bbagen.2017.04.010

    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mutations affecting the internal equilibrium of the reaction catalyzed by 6-aminohexanoate-dimer hydrolase2016

    • 著者名/発表者名
      Negoro S, Kawashima Y, Shibata N, Kobayashi T, Baba T, Lee YH, Kamiya K, Shigeta Y, Nagai K, Takehara I, Kato D, Takeo M, Higuchi Y
    • 雑誌名

      FEBS Lett

      巻: 590 ページ: 3133-3143

    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Protein stability and subunit assembly of nylon hydrolase; structural basis discriminating correct subunit assembly, aggregation, and intracellular degradation of precursor protein2018

    • 著者名/発表者名
      S. Negoro
    • 学会等名
      World Congress on Applied Microbiology 2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Enzymes responsible for the degradation of nylons and related compounds2018

    • 著者名/発表者名
      S. Negoro
    • 学会等名
      Petrochemistry and Natural Resources 2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] ナイロンオリゴマー分解菌Arthrobacter の2 種類の6-アミノヘキサン酸アミノトランスフェラーゼ NylD1・NylD2 の機能解析2018

    • 著者名/発表者名
      藤井 翼, 竹原 一起, 橋本 悠, 武尾 正弘, 根来 誠司
    • 学会等名
      第70回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] ノニルフェノール酸化酵素遺伝子を用いたビスフェノールS の完全無機化の取り組み2018

    • 著者名/発表者名
      武尾 正弘, 近成 直斗, 栗岡 純平, 猪野 椋太, 根来 誠司
    • 学会等名
      第70回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 遺伝子破壊によるCitrobacter 属細菌のキトサン様バイオ凝集剤高生産株の育種2018

    • 著者名/発表者名
      金尾 圭太, 柏 雅美, 木村 和幸, 宮本 弘毅,山口 翔太, バランワル プリヤンカ, 根来 誠司, 武尾 正弘
    • 学会等名
      第70回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] エチレングリコール中におけるナイロン加水分解酵素の構造と酵素活性に対する変異効果2018

    • 著者名/発表者名
      生越大輔、綛野太貴、岡崎秀明、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      第80回酵素工学研究会講演会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] 6-アミノヘキサン酸アミノトランスフェラーゼの速度論解析と類縁酵素の立体構造を基盤とした触媒機構モデル2018

    • 著者名/発表者名
      藤井 翼、赤木 心、岸本彰伍、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      第80回酵素工学研究会講演会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Arthrobacter sp.KI72におけるナイロンモノマー代謝に関する遺伝子クローニングと代謝経路の同定2018

    • 著者名/発表者名
      藤井 翼、竹原一起、橋本 悠、加藤太一郎、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      2018年度日本農芸化学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] エチレングリコール中におけるナイロン加水分解酵素の構造と機能相関2018

    • 著者名/発表者名
      岡崎秀明、生越大輔、戸田 光、麦田悠紀、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      2018年度日本農芸化学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] エチレングリコール中におけるナイロン加水分解酵素の構造と機能相関2017

    • 著者名/発表者名
      生越大輔, 岡崎秀明, 伊東雅人, 竹原一起, 武尾正弘, 根来誠司
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] ナイロン加水分解酵素の構造安定化機構の解析2017

    • 著者名/発表者名
      岡崎秀明, 生越大輔, 伊東雅人, 戸田 光, 竹原一起, 武尾正弘, 重田育照, 根来誠司
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] Arthrobacter sp. KI72 におけるナイロンモノマー代謝系の同定と酵素の特徴2017

    • 著者名/発表者名
      竹原一起, 藤井 翼, 加藤太一郎, 武尾正弘, 根来誠司
    • 学会等名
      第69回日本生物工学会大会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 有機溶媒中におけるナイロン加水分解酵素の構造と機能相関2017

    • 著者名/発表者名
      生越大輔、岡崎秀明、伊東雅人、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      2017年酵素・補酵素研究会講演会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] Arthrobacter sp.KI72 におけるナイロンモノマー代謝系の同定と酵素の特徴2017

    • 著者名/発表者名
      藤井 翼、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      2017年酵素・補酵素研究会講演会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 分子動力学計算を用いたナイロン加水分解酵素の熱安定化機構解析2016

    • 著者名/発表者名
      大塚裕斗、伊東雅人、衣笠 凌、羽田圭吾、竹原一起、馬場剛史、重田育照、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      酵素工学研究会第76回講演会
    • 発表場所
      東京大学 (東京都)
    • 年月日
      2016-10-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ナイロンの酵素的モノマー化手法の開発2016

    • 著者名/発表者名
      生越大輔、岡崎秀明、伊東雅人、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      酵素工学研究会第76回講演会
    • 発表場所
      東京大学 (東京都)
    • 年月日
      2016-10-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] Arthrobacter sp. KI72 におけるナイロンモノマー代謝系の同定と酵素の特徴2016

    • 著者名/発表者名
      藤井 翼、竹原一起、谷本悠樹、加藤太一郎、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      酵素工学研究会第76回講演会
    • 発表場所
      東京大学 (東京都)
    • 年月日
      2016-10-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ナイロン加水分解酵素のサブユニット会合と熱安定化機構の解析2016

    • 著者名/発表者名
      伊東雅人、 衣笠 凌、羽田圭吾、大塚裕人、竹原一起、重田育照、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      第68回 日本生物工学会 大会
    • 発表場所
      富山国際会議場 (富山県)
    • 年月日
      2016-09-28
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] 有機溶媒中でのナイロンの酵素分解2016

    • 著者名/発表者名
      岡崎秀明、伊東雅人、生越大輔、竹原一起、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      第68回 日本生物工学会 大会
    • 発表場所
      富山国際会議場 (富山県)
    • 年月日
      2016-09-28
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] ナイロンオリゴマー分解菌Arthrobacter sp. KI72における6-アミノヘキサン酸代謝系の同定2016

    • 著者名/発表者名
      竹原一起、藤井 翼、加藤太一郎、武尾正弘、根来誠司
    • 学会等名
      第68回 日本生物工学会 大会
    • 発表場所
      富山国際会議場 (富山県)
    • 年月日
      2016-09-28
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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