ハダニRNAiにおけるdsRNAの非侵襲的投与法の開発

• 研究課題/領域番号: 16K18661
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 植物保護科学
• 研究機関: 東京農工大学
• 研究代表者: 鈴木 丈詞 東京農工大学, (連合)農学研究科(研究院), 特任准教授 (60708311)
• 研究協力者: Grbic Miodrag ; Grbic Vojislava
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2017年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2016年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
• キーワード: RNAi / RNA農薬 / 経口投与 / ハダニ / 液胞型ATPアーゼ / V-ATPase / 核酸 / 農薬 / 害虫

研究成果の概要

遺伝子発現を抑制するRNA干渉（RNAi）は遺伝子機能解析手法として広く利用されている．RNAiのトリガーとして機能する二本鎖RNA（dsRNA）を害虫種の必須遺伝子の配列にもとづいて合成し，有効成分とする次世代農薬（RNA農薬）の開発が近年注目されている．本研究では，葉肉細胞の内容物を吸汁するナミハダニを対象とし，RNA農薬の開発に向けたdsRNAの経口投与系の構築を試みた．その結果，dsRNAを塗布した葉を摂食させる塗布法や，dsRNA溶液に虫体を浸漬させる浸漬法を開発した．これら手法は簡便かつ効果的に消化管内へdsRNAを輸送し，RNAi誘導による致死効果も確認された．

研究成果

• [国際共同研究] 西オンタリオ大学(カナダ)
• [国際共同研究] University of Western Ontario(カナダ)
• [雑誌論文] Protocols for the delivery of small molecules to the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae (2017)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Takeshi、Espana Maria Urizarna、Nunes Maria Andreia、Zhurov Vladimir、Dermauw Wannes、Osakabe Masahiro、Van Leeuwen Thomas、Grbic Miodrag、Grbic Vojislava
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 12 号: 7 ページ: e0180658-e0180658
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0180658
  • NAID: 120006355756
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] RNAi-based reverse genetics in the chelicerate model Tetranychus urticae: A comparative analysis of five methods for gene silencing (2017)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Takeshi、Nunes Maria Andreia、Espana Maria Urizarna、Namin Hooman Hosseinzadeh、Jin Pengyu、Bensoussan Nicolas、Zhurov Vladimir、Rahman Tawhid、De Clercq Rebecca、Hilson Pierre、Grbic Vojislava、Grbic Miodrag
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 12 号: 7 ページ: e0180654-e0180654
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0180654
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Foliar application of dsRNA targeting chitinase gene in the spider mite, Tetranychus urticae (2018)
  • 著者名/発表者名: Hebatallah Abouelmaaty, Noureldin Ghazy, Vojislava Grbic, Miodrag Grbic, Takeshi Suzuki
  • 学会等名: 第62回日本応用動物昆虫学会大会
• [学会発表] ナミハダニが吸汁可能な粒子のサイズ (2018)
  • 著者名/発表者名: 山川颯太, 鈴木丈詞
  • 学会等名: 第62回日本応用動物昆虫学会大会
• [学会発表] ナミハダニへのマイクロインジェクション法の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 柴谷駿・鈴木丈詞
  • 学会等名: 第61回日本応用動物昆虫学会大会
  • 発表場所: 東京農工大学（東京都小金井市）
  • 年月日: 2017-03-27
• [学会発表] Toward integrated management of Tetranychus urticae: RNAi, natural enemies, and behavioural manipulation (2017)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, T., N.A. Ghazy, H.G. Abouelmaaty, S. Shibaya, K. Sasaya, S. Yamakawa, A. Takata and A.G. Abouelmaaty
  • 学会等名: 9th Spider Mite Genome Meeting
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] High-throughput platform for RNAi-based reverse genetics in the chelicerate model Tetranychus urticae (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, T., M.A. Nunes, M.U. Espana, H.H. Namin, P. Jin, N. Bensoussan, V. Zhurov, T. Rahman, R. De Clercq, P. Hilson, V. Grbic and M. Grbic
  • 学会等名: 8th Spider Mite Genome Meeting
  • 発表場所: Ibercaja Center (Logrono, Spain)
  • 年月日: 2016-10-17
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Injection or ingestion of small molecules and particles into the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, T., H.G.M. Abouelmaaty, S. Shibaya and S. Yamakawa
  • 学会等名: 8th Spider Mite Genome Meeting
  • 発表場所: Ibercaja Center (Logrono, Spain)
  • 年月日: 2016-10-17
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Foliar application of dsRNA to RNAi-mediated gene silencing in the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae (2016)
  • 著者名/発表者名: Abouelmaaty, H. and T. Suzuki
  • 学会等名: 第25回日本ダニ学会大会
  • 発表場所: 北海道立道民活動センター（北海道札幌市）
  • 年月日: 2016-10-14
• [学会発表] RNA interference by soaking in the two spotted spider mite, Tetranychus urticae (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, T., M.U. Espana, M.A. Nunes, V. Grbic and M. Grbic
  • 学会等名: 25th International Congress of Entomology
  • 発表場所: Orange County Convention Center (Orlando, FL, USA)
  • 年月日: 2016-09-25
  • 国際学会
• [備考] 研究室Webサイト
  • URL: http://web.tuat.ac.jp/~tszk/
• [産業財産権] 節足動物の飼育容器及び節足動物の発育同調方法 (2017)
  • 発明者名: 鈴木丈詞
  • 権利者名: 鈴木丈詞
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2017-057691
  • 出願年月日: 2017