5-アミノレブリン酸のHSP90阻害効果によるHER2陽性胃癌に対する新規治療法

• 研究課題/領域番号: 16K19928
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 西垣 貴彦 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (50749695)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 中途終了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2017年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2016年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 胃癌 / HER2 / 5-アミノレブリン酸

研究実績の概要

複数の胃癌細胞株に5-アミノレブリン酸(5-ALA)を投与し、細胞内へのProtoporphyrin 9(Pp9)の蓄積について検討した。HER2陽性胃癌細胞株（NCI-N87）とHER2陰性胃癌細胞株（MKN45・AGS）に1mMの5-ALAを投与し、24時間後に蛍光顕微鏡で観察したところNCIN87・MKN45では赤色蛍光を示し、AGSではほとんど赤色蛍光を示さなかった。Real-time PCRを用いて5-ALAを細胞内に取り込むトランスポーターであるPEPT-1のmRNA発現量を測定したところ、NCI-N87とMKN45はPEPT-1が強く発現し、AGSではほとんど発現を認めなかった。これらのことからNCI-N87・MKN45では5-ALAを投与すると、細胞内にPpIXが蓄積することが確認された。これら２つの細胞株に5-ALAを100uM～1mMで投与し、細胞増殖が抑制されるか検討した。HER2陽性胃癌（NCIN87)では濃度依存的に細胞増殖が抑制されたのに対して、HER2陰性胃癌（MKN45）では5-ALA投与による細胞増殖抑制効果は認められなかった。このことから、5-ALAはHER2陽性胃癌に特異的に作用していると考え、5-ALA投与時のHER2抑制効果について検討した。HER2陽性胃癌細胞株（NCI-N87）に5-ALAを100uM～3mMで投与し、24時間・48時間でタンパクを回収し、ウエスタンブロット法でHER2の抑制効果について検討した。5-ALAを3mMで投与した際のHER2タンパク質の発現・リン酸化はわずかに抑制されることもあったが、再現性に乏しかった。5-ALAによる細胞増殖抑制効果はHER2タンパクの抑制以外の機序が考えられた。
上記結果を踏まえ本研究は終了とする。