| 研究課題/領域番号 |
17024053
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| 研究種目 |
特定領域研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 審査区分 |
生物系
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| 研究機関 | 関西医科大学 |
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研究代表者 |
伊藤 誠二 関西医科大学, 医学部, 教授 (80201325)
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| 研究分担者 |
西澤 幹雄 関西医科大学, 医学部, 講師 (40192687)
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| 研究期間 (年度) |
2005
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| 研究課題ステータス |
完了 (2005年度)
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| 配分額 *注記 |
3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
2005年度: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
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| キーワード | NMDA受容体 / リン酸化 / 神経因性疼痛 / ノックインマウス / nNOS / トランスロケーション / プロテオミクス |
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| 研究概要 |
NMDA受容体NR2A、NR2Dをはじめとするさまざまなノックアウトマウスに神経因性疼痛モデルを作製し、疼痛行動を解析した結果、FynキナーゼによるNMDA受容体NR2BサブユニットのTyr1472のリン酸化とnNOSの細胞質から細胞膜へのトランスロケーションがnNOSの活性化と神経因性疼痛の維持に必要であることがわかった。
NR2Bサブユニットは長い細胞内部分のC末端にPDZ結合モチーフESDVとその近傍にインターナリゼーションシグナルYEKLをもち、後者に含まれるY(=Tyr1472)のリン酸化は、NR2Bサブユニットを後シナプス肥厚(PSD)に留めることとnNOSの活性化、すなわちシナプス終末からの情報の「受容の場」と「シグナル変換」の2つの機能に関与することを明らかにした。NR2BサブユニットのC末端の重要性を明らかにするためTyr1472をPheに置換したノックインマウスNR2BY1472Fで行動解析を行い、神経因性疼痛が生じないことを確認した。nNOSはN末端のPDZ domainに続くoxygenase、dehydrogenase domainから成り立っている。nNOSのトランスロケーション機構を明らかにするために、nNOSのPDZ-GFPを培養細胞にトランスフェクションする系を確立して解析を進めている。さらに、NR2BのTyr1472のリン酸化による機能分子の探索を行うために、Ettan-DIGE二次元電気泳動に用いるサンプルを調製するために、野生型マウスとNR2BY1472Fノックインマウスからサンブルを調製すべく、1000匹を目標に繁殖を進めている。
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