| 研究課題/領域番号 |
17300120
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
神経化学・神経薬理学
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| 研究機関 | 岐阜薬科大学 |
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研究代表者 |
野元 裕 岐阜薬科大学, 薬学部, 助教授 (80164747)
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| 研究分担者 |
福光 秀文 岐阜薬科大学, 薬学部, 助手 (00308280)
古川 昭栄 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (90159129)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| 研究課題ステータス |
完了 (2006年度)
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| 配分額 *注記 |
7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
2006年度: 4,000千円 (直接経費: 4,000千円)
2005年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
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| キーワード | ニューロトロフィン / タンパク質のプロセシング / 神経成長因子(NGF) / 脳由来神経栄養因子(BDNF) / タンパク質の分泌 / プロペプチド / 糖タンパク質の糖鎖 / 細胞生物学 / プロセシング / NGF / BDNF / 分泌 / 糖鎖 / オートクライン / GDNF |
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| 研究概要 |
NGFやBDNFなどのニューロトロフィン(NT)は、成熟型だけでなく前駆体としても分泌されており、両者は神経栄養因子作用と細胞死の誘導という相反する作用を持つ。したがって、前駆体から成熟型へのプロセシングはニューロンの生死を決定する重要なステップである。
1.NTのプロセシングの効率を決定する部立
プロセシングや分泌の挙動が異なるNGF、BDNF、GDNFの配列の一部を互いに置換した分子を発現し、それらの挙動がプロペプチドの配列に大きく依存することを明らかにした。さらに、プロペプチドの後半部の影響がとくに強いことがわかった。
2.NTのプロセシング効率の決定に関与する細胞内タンパク質の検索
種々のNTと相互作用する細胞内タンパク質を共沈法やクロスリンク法で現在検討している。
3.NTのプロセシングに対する細胞密度の影響
細胞密度の増加に伴いNGFのプロセシング効率の上昇が観察された。COS7細胞にproNGFを加えても変化は観察されなかったが、PC12細胞ではわずかな低分子化が観察された。したがって、培養細胞での細胞外低分子化の寄与は小さいが、細胞密度に依存したプロセシング酵素の誘導についてさらに検討する。
4.proNGFの高感度な測定系の開発
前駆体NTの分泌は神経疾患との相関が高いと考えられるので、体液中のproNGF量と病態との関連を明らかにするため高感度なproNGFの酵素免疫測定法を確立を目的として、抗原となる非切断型proNGFを昆虫細胞で大量調製したので、今後、それに対する特異抗体を作製する。
5.NGFのプロセシングにおける糖鎖の役割
NGFの前駆体に存在する糖鎖を除くとそのプロセシングや分泌が低下することを見出した。そこで、糖鎖の結合部位の影響や、糖鎖をもたないNGFの代謝について検討している。
3.NGFの細胞内での作用
NGFを細胞内に留めると細胞死を誘導することを見出した。これは、NGFの前駆体が細胞内で受容体と相互作用していることを示しており、オートクライン系におけるリガンドと受容体の相互作用についてさらに検討中である。
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