研究課題
基盤研究(B)
翻訳終結の触媒中心タンパク質因子であるペプチド鎖解離因子について以下の研究成果公表した。(1)tRNA擬態タンパク質eRF1のコドン識別機能ドメインの解明のため、終止遺伝暗号を普遍遺伝暗号として用いない例が多く見られる繊毛虫類に由来するeRF1ホモログを用いた比較解析を進めた。今回は、近縁種中、普遍遺伝暗表と一致する終始遺伝暗号を持つ事が予想されたLitostomatea属由来のeRF1のクローンを取得し、そのeRF1によるコドン特異性を、既に確立した酵母・ヒト由来因子とのキメラ体構築技術と、新規に開発したin vivo終始コドン効率測定系を応用し実証した。これらの比較機能解析により、従来のコドン認識領域に関する知見の絞り込みが可能になったと同時に、繊毛虫類には、終止コドンについて、普遍遺伝暗号を用いる系統が混在する事実も明らかになった。(2)tRNA擬態タンパク質eRF1と共役し機能するペプチド鎖解離因子eRF3に相互作用することが網羅解析から報告されていた因子群について、その作用機構を系統的解析する遺伝学的実験系の構築を行った。各因子について、機能制御の有無や、互換機能性を検証したところ、正負にそれぞれ機能制御する出芽酵母因子SlaIおよびItt1を同定し、これらの機能制御が未知のタンパク質安定化機構とのカップリングを実現している事を明らかにした。不安定化機構を明らかにする目的で、ユビキチンによるプロテアソームや、オートファジー系の細胞内タンパク質分解機構の阻害剤や変異体株を用いた解析を行い、後者がこの分解に主に関わることを示唆する実験結果を得た。
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GENE (掲載確定)
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