研究課題
基盤研究(B)
1.ジャイアントベシクルの自己生産系ポリアニオンであるDNAをベシクル内部で複製するには、アニオン性の極性基をもつ膜分子を用意する必要がある。アミダイト法を用いて、リン酸エステルを親水基とする膜分子を合成した。このアニオン性膜分子は、リン酸緩衝液/15%メタノール混合溶液中で、コレステロールを添加するとユニラメラ様のジャイアントベシクルを形成した。さらに、両親媒性膜分子前駆体を加えると、自己複製ダイナミクスが起こることを確認した(第88回化学会春季年会口頭発表3L3-17)。2.ジャイアントベシクル内ポリメラーゼ・チェーン・リアクションリン脂質ジャイアントベシクル中でポリメラーゼ・チェーン・リアクション(PCR)法により、鋳型DNA (1229bp)のDNA増幅を行ない、SYBR Green Iにより内水相中での二本鎖DNAの複製過程を可視化すると共に、ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)で鋳型DNAの複製が行われていることを確認した。さらに、FCM分析により、蛍光量を増大させたべシクルが全体の10%弱におよぶこと、またDNAは約100倍に増加したことを明らかにした(第88回化学会春季年会口頭発表3C6-25)。3.DNA複製とジャイアントベシクルの自己生産ダイナミクスの連携両者のダイナミクスをカップリングさせるために、疎水的で膜に溶け込むコレステロールを、一本鎖15量体DNAにポリエチレングリコール鎖で繋いだ連結分子を合成した。この分子は、末端に相補的な配列を持つ鋳型DNA(100量体)を、膜上につなぎ止める作用がある。蛍光顕微鏡観察、生成したDNAのPAGE分析により、本反応系は、膜上で鋳型DNAの相補鎖を合成することを明らかにした(Soft Matter, 2006)。以上の研究成果により、2つのダイナミクスを同期させる基盤が確立した。
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